曲妥珠单抗联合奥沙利铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制作用的影响

发布时间：2020-06-20 20:06

【摘要】：目的:研究曲妥珠单抗(Trastuzumab)联合奥沙利铂(Oxaliplatin)对HER2阳性卵巢癌细胞活性的影响及p-AKT、p-ERK、Bcl-2、Bax的相关信号通路,探讨二者联合的可能性及有效性。材料与方法:实验采用人卵巢癌细胞株SKOV3细胞进行体外培养,实验分为4组:对照组,奥沙利铂组,曲妥珠单抗组,联合处理组(奥沙利铂和曲妥珠单抗),分别进行如下实验:1.用光学显微镜对药物处理后的细胞进行形态学观察;2.MTT法检测药物对细胞增殖抑制的影响,分析药物对细胞增殖的抑制率;3.流式细胞仪检测细胞周期;4.用免疫印迹法检测SKOV3细胞p-AKT、p-ERK、Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果:1.不同浓度曲妥珠单抗(0.1μμg/ml、1μμg/ml、10μg/ml、100μg/ml)分别作用24h、48h、72h、96h对SKOV3细胞无细胞毒性(P0.05);2.流式细胞术检测SKOV3细胞周期结果显示:(1)相比于对照组,单独使用曲妥珠单抗对SKOV3的细胞周期分布没有显著影响(P0.05),单独使用奥沙利铂使SKOV3细胞G0/G1期的分布比例降低(P0.05),两药联合使用时,SKOV3细胞G0/G1期的分布比例降低(P0.01);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组SKOV3细胞G0/G1期的分布比例降低(P0.01):相比于奥沙利铂组,联合处理组SKOV3细胞G0/G1期的分布比例降低(P0.05)。(2)相比于对照组,曲妥珠单抗组、奥沙利铂组SKOV3细胞的S期分布比例增高(P0.05),联合处理组SKOV3细胞的S期分布比例显著增高(P0.05);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组SKOV3细胞的S期分布比例增高(P0.05);相比于奥沙利铂组,联合处理组SKOV3细胞的S期分布比例增高(P0.05)。(3)相比于对照组,曲妥珠单抗组、奥沙利铂组SKOV3细胞的G2/M期分布比例增高(P0.05),联合处理组SKOV3细胞的G2/M期分布比例显著增高(P0.05);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组SKOV3细胞的G2/M期分布比例增高(P0.05);相比于奥沙利铂组,联合处理组SKOV3细胞的S期分布比例增高(P0.05)。3.免疫印迹法检测结果显示:(1)p-AKT表达:相比于对照组,曲妥珠单抗组表达减弱(P0.05),奥沙利铂组表达减弱(P0.05),联合处理组表达明显减弱(P0.01);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组表达减弱(P0.01);相比于奥沙利铂组,联合处理组表达减弱(P0.05)。(2)p-ERK表达:相比于对照组,曲妥珠单抗组表达减弱(P0.05),奥沙利铂组表达减弱(P0.01),联合处理组表达明显减弱(P0.01);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组表达减弱(P0.01);相比于奥沙利铂组,联合处理组表达减弱(P0.05)。(3)Bcl-2表达:相比于对照组,曲妥珠单抗组表达减弱(P0.05),奥沙利铂组表达减弱(P0.05),联合处理组表达减弱(P0.05);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组表达减弱(P0.05):相比于奥沙利铂组,联合处理组表达减弱(P0.05)。(4)Bax表达:相比于对照组,曲妥珠单抗组表达减弱(P0.05),奥沙利铂组表达增强(P0.05),联合处理组表达增强(P0.05);相比于曲妥珠单抗组,联合处理组表达增强(P0.05);相比于奥沙利铂组,联合处理组表达增强(P0.05)。结论:1.曲妥珠单抗靶向结合HER2蛋白,奥沙利铂通过抑制PI3K/AKT信号通路和Ras/Raff/MEK/ERK信号通路,影响细胞周期分布,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖。2.曲妥珠单抗联合奥沙利铂应用于治疗HER2阳性卵巢癌具有协同作用。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.31
【图文】：

常规细胞培养，包括细胞复苏、细胞传代、细胞冻存等方法，培养过程中细逡逑胞生长状态良好，培养液澄清，无浑浊。ＳＫ０Ｖ３细胞悬浮状态下，呈亮圆形，逡逑进而呈贴壁生长，形状为长梭形。见图１。逡逑图１邋ＳＫＯＶ３细胞显微镜下形态观察逡逑注：Ａ．细胞传代第Ｉｄ邋Ｂ．细胞传代第３ｄ邋Ｃ．细胞悬浮状态逡逑１７逡逑

（Ｐ＜０．０５）；相比于曲妥珠单抗组，联合处理组ＳＫＯＶ３细胞的Ｇ２／Ｍ期分布比例逡逑增高（Ｐ＞０．０５）；相比于奥沙利铂组，联合处理组ＳＫＯＶ３细胞的Ｓ期分布比例增逡逑高（？＞０．０５）。见图３－５。逡逑１９逡逑

【参考文献】

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本文编号：2722905