绝经后女性阴道微生态菌群及其与经阴道益生菌干预相关性研究

发布时间：2020-06-29 13:47

【摘要】：背景和目的女性阴道作为与外界相通的自然腔道之一,具有一个复杂的微生态体系。已有研究表明育龄期女性研究较多。而雌激素水平低落,绝经后女性阴道微生态少有研究,且与绝经后症状相关性也未见报道。材料和方法在2018年12月至2019年4月就诊于北京协和医院体检中心的健康绝经女性150人。收集受试者阴道症状评分和阴拭子,对其中的细菌进行16SDNAV3-V4高通量测序,得到菌群分布信息。对其中的13人使用阴道益生菌(德氏乳杆菌DM8909每粒胶囊不少于2.5*10^10CFU)干预10天,对比干预前后阴道菌群分布情况。结果绝经后女性阴道菌群中,共测出33个门、737个属。属水平聚类分析将阴道菌群分为五类:第一类包含70例(46.7%)样本,以乳杆菌属为主,平均相对丰度达到40.05%,还有相对丰度10.8%的链球菌属,5.66%的加德纳菌属,5.28%的厌氧球菌属,3.66%的普雷沃菌属,2.83%的气球菌属,2.66%的脲原体,2.42%的嗜胨菌属,1.69%的韦荣球菌属,1.49%的韦荣球菌科Dialister菌属,1.45%的革兰氏阳性的厌氧球形Ezakiella菌属,1.18%的奇异球菌属;第二类包含13例样本(8.7%),无明显优势菌种,以厌氧菌属为主,其各菌相对丰度分别为埃希菌属的13.91%,厌氧球菌属8.79%,普雷沃菌属8.38%,嗜胨菌属5.91%,链球菌属5.72%,卟啉单胞菌属 3.83%,Ezakiella 菌属 5.2%,弯曲菌属 5.16%,Dialister 菌属4.11%,芬戈尔德菌属2.3%,乳杆菌1.84%,梭杆菌属1.02%;第三类包含9例样本(6%),以埃希菌属为主,平均相对丰度达到48.34%,其他还有18.09%的变形杆菌属,3.57%的乳杆菌属,3.53%的链球菌属,2.76%的普雷沃菌属,1.67%的厌氧球菌属,1.59%的加德纳菌属,1.12%的嗜胨菌属。第四类包含15例样本(10%),以加德纳菌属为主,平均相对丰度达到51.36%,同时还有9.05%的奇异杆菌属、9%的双歧杆菌属、6.05%的乳杆菌属、5.32%的气球菌属、3.71%的脲原体、3.4%的普雷沃菌属、1.59%的链球菌属、1.12%的厌氧球菌属;第五类包含43例样本(28.7%),以普雷沃菌属为主,平均相对丰度达到21.09%,还有7.74%的厌氧球菌属,7.34%的卟啉单胞菌属,6.54%的嗜胨菌属,5.28%的梭杆菌属,4.78%的纤毛菌科的Sneathia菌属,4.23%的加德纳菌属,3.6%的链球菌属,3.59%的弯曲菌属,1.75%的乳杆菌属,1.33%的奇异菌属,1.14%的芬戈尔德菌属;使用NT数据库进一步进行种水平检测,共测出1992个菌种,相对丰度大于1%的有21个种。检测乳杆菌共测出39种,平均相对丰度1%的种有个:母鸡乳杆菌(相对丰度9.0%)、惰性乳杆菌(相对丰度8.8%)、詹氏乳杆菌(相对丰度1.0%)。其余还有马乳杆菌、德氏乳杆菌、加氏乳杆菌(0.07%)、乳杆菌sp.、HSLZ-75、发酵乳杆菌、鼠乳杆菌、面包乳杆菌、罗氏乳杆菌、布氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌、酸鱼乳杆菌、肠乳杆菌、食淀粉乳杆菌、嗜酸乳杆菌、KC38、人阴道乳杆菌、棒状乳杆菌、黏膜乳杆菌、鹦鹉乳杆菌、寡发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、瘤胃乳杆菌、曲面乳杆菌、食木薯乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、路氏乳杆菌、songhuajiangensis、porci、HRROTE4、牛痘乳杆菌、食果糖乳杆菌、MbBipro17。绝经时间与菌群无明显相关。年龄与链球菌属呈显著正相关,P值0.037,(OR 7.487 95%CI 0.471,14.503);年龄与 Ezakiella 菌属呈显著正相关,P 值 0.039,(OR24.125 95%CI 1225,47.025)。阴道干涩症状与菌群无明显相关。阴道瘙痒症状(严重程度)与菌群多样性有显著相关性。阴道瘙痒症状(有无)与芬戈尔德菌属有显著相关性,P 值 0.037,(OR 4.157*10*10,95%CI 4,465-3,871*10*20)。经阴道放置德式乳杆菌的13人中,有4人用药前诉阴道干涩症状,用药第2天4人均诉症状明显缓解。干涩症状评分由平均1.5降至平均0.25,2人于停药4天、另2人于停药7天再次诉出现干涩症状,停药30天时4人阴道干涩评分同用药前,乳杆菌种类和相对丰度达峰时间均在停药14天以前。另9人用药前无明显阴道症状主诉,其中有3人用药后感到“舒服”,1人自觉分泌物较前增多,其余5人无明显变化。乳杆菌种数量的变化趋势:2人在停药即有所下降,3人在停药4天时出现峰值,5人在停药7天时出现峰值,3人在停药14天时出现峰值,而在停药30天时,11人(84.6%)可测到的乳杆菌种数量为5次取样中的最低值。乳杆菌属相对丰度变化:4人停药后即有所下降,4人在停药4天时出现峰值,4人在停药7天时出现峰值,1人在停药14天出现峰值,到停药30天时8人(61.5%)乳杆菌平均相对丰度为5次最低值。结论1.根据16S DNA V3-V4可变区高通量测序及菌种分析结果,绝经期女性阴道菌群可聚类分析成5类:第一类以乳杆菌属为主,占总人数46.7%%;第三类以埃希菌属为主,占总人数6%;第四类以加德纳菌属为主,占总人数10%;第五类以普雷沃菌属为主,占总人数28.7%;第二类具有较多的菌属多样性,占总人数8.7%,包括埃希菌属、乳杆菌属、普雷沃菌属、链球菌属、厌氧球菌属、嗜胨菌属、卟啉单胞菌属、Ezakiella菌属、Dialister菌属、弯曲菌属、梭杆菌属、芬戈尔德菌属。2.绝经时间与菌群无明显相关。年龄与链球菌属和Ezakiella菌属呈显著正相关。阴道干涩症状与菌群无明显相关。阴道瘙痒症状(严重程度)与菌群多样性有显著相关性。阴道瘙痒症状(有无)与芬戈尔德菌属有显著相关性。3.经阴道用德氏乳杆菌制剂对绝经女性阴道干涩症状缓解作用明显;在绝经女性阴道菌群重建上,不同个体用药后乳杆菌菌种数量及相对丰度达峰时间不等,但总体对乳杆菌构成的改善不超过停药后2周。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R71
【图文】：

属分别存在于９９．３％、９２％、９９．３％、９８．７％、１００％的受试者中。逡逑３．４．３种水平分布逡逑图５绝经后女性菌群分布属水平饼图逡逑属水平分布逡逑■加德纳菌Ｉ禹逡逑，普雷沃菌属逡逑■笔球菌属逡逑１７７ｒ0／逦■嗜胨

本文编号：2733937