人子宫内膜间充质干细胞在修复大鼠子宫韧带损伤过程中弹性蛋白的表达

发布时间：2020-07-08 19:12

【摘要】：目的:本实验研究通过建立大鼠子宫韧带机械性损伤模型,利用子宫内膜间充质干细胞的多向分化潜能,使损伤的韧带组织进行再生修复,检测在修复前后韧带中弹性蛋白表达的情况,初步探讨干细胞在韧带组织损伤修复过程中的部分再生或完全再生功能。方法:选择体重为300±10g的清洁级SD雌性大鼠建立第一次普通大鼠子宫韧带机械性损伤模型,分别取术后3天、6天、9天、12天、15天以及正常的大鼠子宫韧带,每组取材后将组织进行福尔马林浸泡,后石蜡包埋组织,采用苏木素染色法分析不同时间点瘢痕愈合情况,确定最佳的瘢痕修复时间点。第二次建立注射干细胞的大鼠子宫韧带机械性损伤模型,此次于损伤的韧带部位局部注射未标记的人子宫内膜间充质干细胞,分别于术后3天、6天、9天、12天取材,用小鼠抗人细胞核抗体(mAb1281)进行核标记,阳性细胞即为移植细胞,以此利用免疫荧光技术观察移植的人子宫内膜间充质干细胞在大鼠体内存活情况。通过两次造模,最终选定瘢痕修复最佳时间点。以该时间点为基础,建立瘢痕组、干细胞组以及正常对照组模型,利用苏木素染色、免疫组织化学法和westen-blot比较三组间损伤子宫韧带在瘢痕修复过程中弹性蛋白的表达情况,从而探讨干细胞在韧带组织损伤修复过程中的部分再生或完全再生功能。结果:1.苏木素染色法瘢痕修复最佳时间点的选取:术后3天、6天、9天、12天、15天、正常大鼠子宫韧带进行HE染色,结果发现,术后3天韧带组织中明显可见大量新生壁薄的毛细血管、炎细胞、成纤维细胞,胶原纤维少,随时间推移损伤组织中新生血管、炎细胞、成纤维细胞逐渐减少,网状纤维及胶原纤维逐渐增多,12天与15天组织瘢痕修复无明显差别,遂取12天为实验时间节点。2.免疫荧光染色检测人子宫内膜间充质干细胞的存活情况:用小鼠抗人核抗体(mAb1281)标记注射人子宫内膜间充质干细胞后,观察术后3天、6天、9天、12天大鼠子宫韧带中干细胞存活情况,发现12天免疫荧光反应仍呈阳性,表明此时间点间充质干细胞仍存活。3.术后12天瘢痕组、干细胞及正常对照组之间的的比较:(1)免疫组化结果显示:瘢痕组、干细胞组及正常组的OD值分别为分别为0.09±0.01、0.23±0.04、0.22±0.02;弹性蛋白在瘢痕组中的阳性表达比干细胞组低,差异具有统计学意义(P0.05),干细胞组与正常对照组相比弹性蛋白抗体阳性表达无统计学意义(P0.05)。(2)免疫印迹法检测结果显示:弹性蛋白在瘢痕组、干细胞组、正常对照组中的灰度值分别于β-Actin灰度值的比值为:0.17±0.01、0.34±0.12、0.32±0.10,弹性蛋白在瘢痕组中的表达比干细胞组中低,差异具有统计学意义(P0.05),干细胞组与正常对照组相比弹性蛋白抗体阳性表达无统计学意义(P0.05)。结论:弹性蛋白在干细胞组中的表达较瘢痕组明显增高,表明干细胞在损伤的韧带组织修复过程中发挥了其分化潜能,可向成纤维细胞分化,或通过其他途径,如外泌体、旁分泌作用等促进弹性蛋白的分泌,进一步组装成成熟的弹性纤维,使组织部分或完全再生。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R711.5

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 严冰浩;张燕;方硕;王越;刘厚奇;;间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用[J];解剖学杂志;2016年05期

2 钟玉兰;淦鑫;;间充质干细胞源外泌体在肺部疾病中的应用与作用[J];中国组织工程研究;2019年13期

3 刘超;张丽君;陶昊;杜心洁;王芮;李文菁;丁淑梅;王怡;姜磊;黄玉香;;基于细胞生物学方法比较5种不同组织来源间充质干细胞的特征[J];中国组织工程研究;2019年33期

4 徐郑美;邵立宇;孙宏亮;王瑶;许美花;鲁文赓;;间充质干细胞在动物临床上的应用前景[J];动物医学进展;2019年08期

5 阿诺得 卡普兰;廖联明;王萍;谭建明;;间充质干细胞更改名称的时候到了[J];中华细胞与干细胞杂志(电子版);2017年05期

6 邱坤银;廖雄宇;郭淑仪;祁皓宁;蓝菁菁;方建培;黄科;黎阳;徐宏贵;周敦华;;间充质干细胞治疗儿童难治性迟发性出血性膀胱炎疗效和安全性的临床研究[J];中国实验血液学杂志;2018年03期

7 陈俊秋;黄梁浒;;间充质干细胞及其外泌体促血管再生的分子机制研究进展[J];中国实验血液学杂志;2018年06期

8 赖秀蓝;马廉;;间充质干细胞的临床应用及产业化前景[J];中国小儿血液与肿瘤杂志;2016年06期

9 申晓靖;刘海蓉;刘新燕;赵鹏;郑建金;卢恕来;王超;;阿司匹林影响人牙髓间充质干细胞成骨分化的新型药理研究[J];中国医学前沿杂志(电子版);2017年01期

10 陶一昕;马钢;;皮肤间充质干细胞的研究进展[J];中国科学:生命科学;2017年04期

相关会议论文 前10条

1 白雪;霍波;;面积约束情况下形状对间充质干细胞分化的影响[A];第十一届全国生物力学学术会议暨第十三届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编[C];2015年

2 李坦;刘卓;徐运;;人脐带间充质干细胞治疗脊髓小脑共济失调3型的研究[A];中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（上）[C];2015年

3 陈可;王丁;韩之波;朱德林;韩忠朝;;人脐带间充质干细胞体外发挥免疫活性的研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

4 金明顺;张毅;贾秀芬;周燕华;闫妍;刘慧雯;;小鼠脂肪间充质干细胞的分离、培养以及多潜能分化的研究[A];中国解剖学会第十一届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会论文汇编[C];2009年

5 张彦;李尚珠;;间充质干细胞在血管工程中的机制及应用[A];2009全国中西医结合周围血管疾病学术交流会论文集[C];2009年

6 石玉;戴\戎;;周期性拉应力对间充质干细胞分化影响的研究[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年

7 黎娇;朱争艳;杜智;骆莹;王鹏;高英堂;;人脐带间充质干细胞分泌物对肝细胞增殖和凋亡的影响[A];天津市生物医学工程学会第30次学术年会暨生物医学工程前沿科学研讨会论文集[C];2010年

8 余慧;黄红云;陈琳;王洪美;;生物反应器培养间充质干细胞的研究现状[A];中国医师协会神经外科医师分会第六届全国代表大会论文汇编[C];2011年

9 覃永亮;曾慧兰;卜欠欠;钟启;韩新爱;;尼古丁诱导人脐带间充质干细胞凋亡的机制研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年

10 乔淑敏;陈广华;王易;吴德沛;;人脐带间充质干细胞超微结构观察[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）[C];2012年

相关重要报纸文章 前10条

1 见习记者 卜叶;科学家勾勒间充质干细胞临床应用“路线图”[N];中国科学报;2019年

2 本报记者 刘艳芳;牙髓间充质干细胞填补了干细胞研究的空白[N];广东科技报;2017年

3 上海生科院 上海交大医学院健康科学研究所 曹楷;间充质干细胞：干细胞中的孙悟空[N];上海科技报;2014年

4 第三军医大学西南医院输血科 李忠俊 整理 吴刘佳;间充质干细胞研究又见新方法[N];健康报;2013年

5 刘道安;细胞产品国家工程研究中心启用间充质干细胞库[N];健康报;2007年

6 记者　陈建强;首家间充质干细胞库在津建成[N];光明日报;2006年

7 南方日报记者 严慧芳;选择干细胞储存须谨慎[N];南方日报;2016年

8 记者 李素锋;我市首例间充质干细胞移植手术取得成功[N];临汾日报;2009年

9 冯国梧;全球首个脐带间充质干细胞库规模化运营[N];科技日报;2008年

10 刘莹清;全球首个脐带间充质干细胞库泰达规模运营[N];北方经济时报;2008年

相关博士学位论文 前10条

1 陈晓;IFN-β基因导入间充质干细胞对非小细胞肺癌迁移增殖的作用及机制研究[D];山东大学;2019年

2 马彩云;间充质干细胞诱导分化为肺泡Ⅱ型上皮细胞修复肺损伤研究[D];中国农业科学院;2018年

3 浦雯雯;人小涎腺间充质干细胞体外快速成肝诱导相关研究[D];北京协和医学院;2018年

4 韩兵;脂肪来源间充质干细胞旁分泌因子抗病理性瘢痕成纤维细胞纤维化的作用及分子机制的研究[D];北京协和医学院;2018年

5 亓立峰;脐带间充质干细胞及细胞因子共移植治疗脑损伤的分子机理研究[D];山东大学;2018年

6 邓鑫;PIWIL2在食管癌发生发展中的作用和机制以及脂肪间充质干细胞分离鉴定的研究[D];北京协和医学院;2018年

7 朱永朝;人胎盘来源间充质干细胞细胞特性及其生物学功能的研究[D];宁夏大学;2015年

8 段妍;细胞膜片技术的成骨微环境的研究及新型成骨材料的研发[D];第四军医大学;2016年

9 易东晔;胶质瘤相关间充质干细胞在胶质瘤微环境中向血管周细胞分化及其血管生成能力的研究[D];华中科技大学;2018年

10 张颖颖;脂肪间充质干细胞对臭氧诱导的慢性阻塞性肺疾病小鼠作用的研究[D];南京医科大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 薛婧;低剂量地西他滨增强间充质干细胞对2型糖尿病小鼠胰岛修复效应的研究[D];中国人民解放军医学院;2018年

2 张志慧;顺铂对肿瘤间充质干细胞IL-6表达的影响及机制研究[D];山东大学;2019年

3 杨格;人脐带间充质干细胞微泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞组蛋白乙酰化水平影响的研究[D];山西医科大学;2019年

4 王玲玲;LOX和Fibulin-5在人子宫内膜间充质干细胞修复大鼠子宫韧带损伤中表达的实验研究[D];山西医科大学;2019年

5 韩晓瑾;人子宫内膜间充质干细胞的分离、鉴定及生长因子对其向韧带成纤维细胞分化作用研究[D];山西医科大学;2019年

6 袁瑞利;人子宫内膜间充质干细胞在修复大鼠子宫韧带损伤过程中弹性蛋白的表达[D];山西医科大学;2019年

7 林瑶;间充质干细胞来源的外泌体改善骨髓间充质干细胞体外衰老的初步研究[D];深圳大学;2018年

8 张霞;基于合成基因回路的尿酸调控评价研究[D];安徽大学;2019年

9 魏真真;脐带间充质干细胞对DSS诱导结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及相关作用机制探讨[D];山西医科大学;2016年

10 杨作峰;人胎盘间充质干细胞对妊娠期糖尿病大鼠血糖及胰岛细胞形态学影响的研究[D];沈阳医学院;2019年

本文编号：2746931