EM2D9靶向结合整合素蛋白α3β1对人子宫内膜癌细胞迁移能力的影响

发布时间：2020-08-05 07:08

【摘要】：研究背景及目的:子宫内膜癌(endometrial cancer,EC),又被称之为子宫体癌,是一种原发于子宫内膜的上皮性恶性肿瘤。如今,子宫内膜癌已经成为女性生殖系统中最多发的三大恶性肿瘤之一,其发病概率仅次于宫颈癌。但由于子宫内膜癌的致病机制尚不十分明确,影响因素多样化,近年来子宫内膜癌的发病率呈上升趋势,且逐渐趋于年轻化。EM2D9是一种自主研发的单克隆抗体。本研究通过研究抗体EM2D9对子宫内膜癌细胞的靶向性识别作用,分析探讨抗体EM2D9在子宫内膜癌细胞中的靶蛋白及对子宫内膜癌细胞迁移能力的影响,了解抗体EM2D9对子宫内膜癌的具体作用,为开发新型子宫内膜癌药物提供研究基础,为更加安全、有效、优质、稳定的诊断、治疗子宫内膜癌提供新思路。实验方法及实验结果:本研究利用免疫荧光、流式检测及western blot等实验证明了抗体EM2D9能够靶向性识别子宫内膜癌细胞。然后,运用免疫沉淀法将抗体EM2D9的靶蛋白结合分离后进行质谱检测,通过分析发现抗体EM2D9在子宫内膜癌中的靶蛋白是整合素α3β1。通过对子宫内膜癌细胞进行细胞迁移相关的功能性实验发现,抗体EM2D9可以抑制子宫内膜癌细胞的迁移能力。提取细胞的总RNA并进行Real-time PCR后发现,抗体EM2D9处理子宫内膜癌细胞后,细胞中CD151的表达量明显降低,通过文献查询我们猜想EM2D9能够通过整合素α3β1与CD151形成的CD151-整合素复合物来抑制细胞的迁移作用,从而达到抑制子宫内膜癌迁移侵袭的效果。实验结论:1)证明了EM2D9能够靶向性识别子宫内膜癌细胞,并检测出其在子宫内膜癌细胞中的靶蛋白是α3β1;2)证明了EM2D9能够抑制子宫内膜癌细胞的迁移能力,该抑制作用可能是通过CD151-整合素复合物完成的。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R737.33
【图文】：

子宫内膜癌,子宫内膜样,腺癌

图 1.1 子宫内膜癌分类Figure 1.1 Endometrial cancer classification表 1.1 子宫内膜样腺癌与非子宫内膜样腺癌两者之间的区别[5]

序列,整合素,亚单位

1、绪论部的部分比较短，但整合素能够以 -辅肌动蛋白( -actinin) ,踝蛋白(talin着斑蛋白(vinculin)为媒介，与细胞骨架发生相互连接[24]。在整合素中，亚的 N 端区域能够与二价阳离子结合，胞质区近膜处会有一个十分保守XGFFKR 序列，负责参与整合素活性的调节，而不同亚单位主要负责不同之间的相互作用。如含有亚单位的整合素主要参与细胞与 ECM 间的黏附，而白细胞表面间的相互作用主要由含有 2 亚单位的整合素参与介导[25]。

整合素,结构模型

图 1.3 整合素作用结构模型Figure 1.3 Structural model of integrin2 整合素的功能虽然整合素在不同类型的细胞中都能够表达，但尤其在肿瘤细胞，主要和基底膜的层粘连蛋白-322 和其亚型相结合[26]。 3 和 1 亚单位糖蛋白，二者之间以非共价键价结合构成异二聚体的整合素[27]。 3 亚星结构域是有 7 个叶片组成的片层结构，有 7 个相应的重复序列，与 a 区域结合成为配体结合区域。整合素在生物体的胚胎发育时期维持上皮细胞基底膜完整性的作用。整合素参与细胞的许多生理活细胞的生长、凋亡、血管形成及神经系统功能等。还能够与一些蛋白结

【参考文献】