B族链球菌母婴传播风险及分子特征的前瞻性队列研究

发布时间：2020-08-21 03:09

【摘要】：目的:掌握孕妇及其新生儿B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)的携带率和GBS垂直传播率,分析GBS垂直传播的影响因素,为制定有效的预防控制措施阻断GBS垂直传播提供重要的理论依据;掌握母婴GBS菌株的耐药谱和耐药机制,为临床GBS感染性疾病的治疗和合理应用抗生素提供数据支持;深入探讨GBS的分子型别和分子特征,为研发GBS多价联合疫苗研发提供新思路;分析母婴配对菌株中分子型别和分子特征的一致性,丰富对母婴GBS垂直传播的研究,为确认GBS母婴传播提供重要的分子证据,也为探究母婴GBS垂直传播过程中菌株分子特征的垂直性突变现象提供数据支持。方法:本研究采用前瞻性队列研究,以深圳市龙华新区待产孕妇及其新生儿为研究对象。在知情同意条件下,对孕妇进行问卷调查和阴道拭子采样分离GBS;对其新生儿的口腔、耳内、脐周进行棉拭子采样分离GBS。孕妇阴道携带GBS则分为暴露组,阴道无携带GBS的孕妇分为非暴露组,其新生儿出生时携带GBS作为观察结局,比较两组中结局的发生率并计算相对危险比(relative risk,RR)。GBS菌株对9类抗生素的敏感性试验采用纸片法进行;使用多位点测序分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)鉴定GBS的序列分型(Sequence Type,ST);运用简单或多重聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)鉴定GBS的血清型、耐药基因、毒素基因以及菌毛(pilus island,PI)分型。两组间的定量变量的差异采用t检验比较;两组间的定性变量采用χ~2检验或确切概率法比较的差异。运用单因素和多因素广义线性模型探究新生儿GBS携带的影响因素;运用简单和多重对应分析探究GBS多种分子特征间的关联。采用Kappa检验分析母婴GBS分子特征的一致性。结果:1.研究对象基本情况共纳入1815名孕妇,92名孕妇检出GBS,携带率为5.1%;共1815名新生儿,24名新生儿检出GBS,携带率为1.3%。92名GBS阳性的母亲中,其新生儿GBS阳性率为14.1%;1723名GBS阴性的母亲中,其新生儿GBS阳性为0.6%。2.GBS垂直传播的影响因素(1)所有新生儿分析发现:孕妇携带GBS、分娩方式、会阴情况、分娩方式合并会阴情况、产检次数、胎次和孕期高血压对新生儿GBS携带的影响具有统计学意义,其中孕妇GBS阳性、阴道分娩、母亲会阴撕裂、阴道产且会阴撕裂、母亲产检次数≥10次和胎次≥4次提高新生儿GBS携带的风险。(2)对母亲GBS阳性的新生儿分析发现:孕妇分娩方式、会阴情况、分娩方式合并会阴情况、胎膜完整和孕期性传播疾病对新生儿GBS携带的影响具有统计学意义,其中阴道分娩、会阴撕裂、阴道产且会阴撕裂、母亲胎膜完整和孕期有性传播疾病提高新生儿GBS携带的风险。3.药敏试验GBS菌株主要对四环素(75.9%)、红霉素(71.6%)和克林霉素(64.7%)耐药,对青霉素、利奈唑胺、头孢曲松和万古霉素均敏感。共有69.8%的GBS菌株呈多重耐药状态,最常见的多耐药性模式为对红霉素、克林霉素和四环素共同耐药。本研究菌株中主要携带的红霉素耐药基因是erm(B)和mef(A/E),其中有16株GBS均携带以上两种基因;本研究菌株中主要携带的四环素耐药基因是tet(M)和tet(O),其中有21株GBS均携带以上两种基因。4.分子特征本研究共鉴定出17种ST型,主要的ST型为ST19(19.8%)、ST17(12.9%)、ST10(12.1%)和ST12(10.3%)。共鉴定出7种克隆群,主要的克隆群为CC19(25.0%)、CC103(13.8%)、CC17(12.9%)和CC10(12.9%)。共检出6种血清型,主要的血清型为III型(48.3%)、Ia型(25.0%)和V型(13.8%)。所有的菌株均携带scpB和hylB基因;109株GBS检出alp基因,主要是rib(37.9%)、epsilon(27.6%)和alphaC(25.0%);所有的菌株均携带菌毛,主要的菌毛分型是PI-2b(38.8%)、PI-1+PI-2a(35.3%)和PI-2a(25.0%)。5.基于GBS分子特征制作的疫苗覆盖血清型相关的3联疫苗(Ia、Ib和III型)的覆盖率为83.6%,4联疫苗(Ia、Ib、III和V型)的覆盖率为97.4%;alp表面蛋白抗原相关的2联疫苗(rib和alphaC基因)的覆盖率为62.9%,3联疫苗(rib、alphaC和epsilon基因)的覆盖率为90.5%;菌毛相关的2联疫苗(PI-2b和PI-1+PI-2a型)的覆盖率为74.1%,3联疫苗(PI-2b、PI-1+PI-2a和PI-2a型)的覆盖率为99.1%。6.多种分子特征的关联多种分子特征的多重对应分析揭示:ST17型菌株与血清型III型、rib基因、菌毛PI-2b型相关;ST19型菌株与III型、rib基因、菌毛PI-1+PI-2a型相关;ST485型菌株与Ia型、epsilon基因、菌毛PI-2b型相关。7.母婴配对GBS分子特征的一致性母婴配对GBS菌株的Kappa一致性检验提示,母婴配对GBS菌株的毒素基因和菌毛分型均完全一致,血清分型的一致性程度为中等(Kappa=0.577,P0.001);ST分型的一致性程度为高(Kappa=0.913,P0.001)。其中有四对母婴配对GBS部分分子特征不一致,包括三对孕妇GBS血清型均为V型,而新生儿GBS则分别是Ib型和Ia型,一对孕妇GBS为ST86而新生儿GBS为ST176。结论:1.母婴GBS垂直传播率为14.1%。母亲GBS携带是垂直传播最重要的因素,因此建议使用风险评估或产前GBS筛查方法,对有携带GBS风险或筛查结果为GBS阳性的孕妇实施产时抗生素预防治疗。值得关注的是,GBS垂直传播与孕妇会阴情况、分娩方式密切相关,因此本研究建议孕妇使用剖宫产术,避免阴道分娩的孕妇使用阴道侧切开口,以减少GBS垂直传播风险。2.GBS菌株主要对四环素、红霉素和克林霉素耐药,主要检出四环素耐药基因tet(M)及tet(O)和红霉素耐药基因erm(B)及mef(A/E)。69.8%的GBS菌株呈多重耐药状态,最常见的多耐药性模式为对红霉素、克林霉素和四环素共同耐药。以上研究结果提示持续监测抗生素耐药性的重要性,临床上使用抗生素治疗和预防GBS疾病时应结合菌株的耐药谱合理选用抗生素。3.本研究GBS菌株主要的ST型是ST19、ST17、ST10和ST12,主要的血清型是III型、Ia型和V型。所有的菌株均携带scpB和hylB基因;主要的alp基因是rib、epsilon、alphaC基因;所有的菌株均携带菌毛,主要的菌毛分型是PI-2b、PI-1+PI-2a、PI-2a型。多重对应分析揭示:菌株的ST型别、血清型、毒素基因、菌毛分型间存在高维的关联性,为今后发现新的GBS流行克隆群提供新思路,也为促进GBS多价联合疫苗的开发与研制提供重要的理论基础。4.本研究利用前瞻性队列研究,对母婴配对GBS菌株的毒素基因、菌毛分型、血清型、ST型别进行一致性检验,根据母婴配对GBS多个分子特征的高度一致性揭示GBS垂直传播的过程;同时,发现GBS菌株在垂直传播过程中可能存在分子特征的垂直性突变现象。因此有必要对GBS菌株进行连续的动态监测,从而验证GBS菌株垂直传播过程和动态分析GBS菌株垂直传播过程中遗传特征的改变。
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R714;R722.1
【图文】：

本研究纳入对象GBS携带情况

B族链球菌母婴传播风险及分子特征的前瞻性队列研究

GBS菌株耐药情况

B族链球菌母婴传播风险及分子特征的前瞻性队列研究

GBS菌株MLSB耐药表型情况

【参考文献】