Photolon介导的光动力疗法对小鼠子宫内膜异位症的治疗效果

发布时间：2020-09-01 09:07

　　目的探讨Photolon介导的光动力疗法(Photodynamic therapy,PDT)对Balb/c雌性小鼠子宫内膜异位细胞及内膜异位病灶的治疗效果。方法测量光敏剂的吸光度。将6-7周龄Balb/c雌性小鼠(体重为20g)在水合氯醛麻醉下行自体子宫内膜组织移植术,制备内膜异位模型。术后给予激素治疗促进子宫内膜异位模型的生长,当模型病灶平均大小为6mm时为构建模型成功。模型成功后原代培养Balb/c雌性小鼠在位及异位子宫内膜细胞,培养成功后分为对照组、单纯光照组、光敏剂组及Photolon介导的PDT组,在显微镜下观察各组治疗后形态变化。用MTT实验分析Photolon介导的PDT治疗对小鼠异位子宫内膜细胞的抑制率及半数致死量。随机抽取14只模型鼠分为对照组和Photolon介导的PDT组。对照组鼠尾注射200ul生理盐水,3小时后自然光照射lOmin;PDT组:鼠尾注射2mg/ml的Photolon溶液200ul,3 h后行PDT治疗,照射剂量为2.5 J/cm2(660 nm波长,1W,距离病灶表面5cm照射7min)。进行体内治疗后每隔7天测量异位病灶大小,各组5周后处死,取小鼠子宫内膜异位病灶制备病理切片,HE染色观察各组异位子宫内膜的病理改变。结果1.体外培养的异位子宫内膜细胞的间质细胞较在位的间质细胞小,且分散生长,细胞呈细长的纺锤形,伸展挺直装,边缘清晰,胞浆少,核较大呈椭圆形,生长迅速,生长模式似癌细胞。2.Photolon介导的PDT治疗体外培养的异位子宫内膜细胞后细胞大量死亡,细胞原有细长纺锤形得到破坏、边界模糊、胞浆碎裂、细胞核固缩、变形甚至碎裂消失等变化。3.不同浓度的 Photolon(0.015ug/ml、0.03ug/ml、0.06ug/ml、0.125ug/ml、0.25ug/ml、0.5ug/ml)作用后小鼠异位子宫内膜细胞的抑制率(3.82%、10.64%、20.07%、40.37%、71.39%、82.02%)均高于对照组,其浓度0.160ug/ml时达到细胞半致死量。4.对照组小鼠子宫内膜异位灶继续增大,而Photolon+PDT组异位病灶停止生长,并逐渐减小。5.HE染色结果示:与对照相比,photolon+PDT组镜下细胞连续排列被破坏,细胞形态亦遭到破坏,胞浆比减少,部分细胞核固缩,可见泡状核和核周空晕。结论Photolon介导的PDT治疗能够有效抑制小鼠子宫内膜异位病灶的生长。
【学位单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R711.71
【部分图文】：

吸光度,子宫内膜异位

从测得Ｐｈｏｔｏｌｏｎ的吸光度可以看出，当波长为４００ｎｍ时出现最大吸收峰；随着逡逑波长的增大在５００ｎｍ、６７０ｎｍ时也出现了吸收峰，但这些吸收峰值的相对强度随着逡逑波长的逐渐增大而减弱，结果见图１。逡逑３邋ＭＯ邋－逡逑ｔ邋？逡逑？逦ｉ逦？逡逑）？００逦？？逦？逡逑？逦？逦＊逡逑２Ｍ０－逦ｆ逡逑８邋，邋：邋？邋逦逡逑ｆ逦＊逦｜逦？逦ａｐｓｔａｗｒａｌ逡逑＼邋／邋？逡逑：／邋Ｉ逡逑！＼逦Ａ逡逑Ｃ８ａ0４．．￣．．？＿邋二邋．．．．．邋ｒ－．＂？？？？？＿■？？？？“邋－？？？？？？？Ｔ—……？？？？？？？？—．．．．．．．．．—．．．…十邋二二二邋，逡逑图１邋ｐｈｏｔｏｌｏｎ的吸光度逡逑３．２小鼠子宫内膜异位造模成功效果逡逑Ｂａｌｂ／ｃ雌性小鼠子宫内膜异位造模后，在激素药物刺激下初期生长较缓慢；中逡逑期开始可见到小鼠下腹部包块形成；后期逐渐发展为囊性包块，表面呈紫蓝色。当逡逑子宫内膜异位病灶的平均直径达到６ｍｍ时，视为达到实验条件，造模成功率为９０％，逡逑如图２。逡逑９逡逑

形态差异,体外培养,细胞,间质细胞

异位子宫内膜细胞的间质细胞形态较在位的间质细胞小，且分散生长，细逡逑胞呈细长的纺锤形，伸展挺直状，边缘清晰，胞浆少，核较大、呈椭圆形，生长迅逡逑速，生长模式似癌细胞，如图３。逡逑在位细胞逦异位细胞逡逑图３体外培养的小鼠子宫内膜在位细胞和异位细胞的形态差异（ｘ邋２００）逡逑３．邋４邋Ｐｈｏｔｏ邋Ｉｏｎ介导ＰＤＴ对小鼠ＥＭＳ细胞的影响逡逑１０逡逑

异位,侧面观,子宫内膜异位,模型

期开始可见到小鼠下腹部包块形成；后期逐渐发展为囊性包块，表面呈紫蓝色。当逡逑子宫内膜异位病灶的平均直径达到６ｍｍ时，视为达到实验条件，造模成功率为９０％，逡逑如图２。逡逑９逡逑

【参考文献】