生长激素预处理在卵巢低反应患者体外受精中应用及作用机制的初步探讨

发布时间：2020-09-07 12:37

　　 目的:1)评估生长激素预处理在卵巢低反应患者体外受精中应用效果;2)体外研究探讨生长激素对低反应颗粒细胞及线粒体膜电位影响。方法:本研究分为两个部分,第一部分回顾性分析2017年4月到2018年10月在我中心就诊的136例患者,均诊断为卵巢低反应。按照其使用生长激素治疗的给药方法和用药时机将研究分组间对照和自身对照。其中组间对照107人,应用生长激素预处理组(Gn启动前应用约4周的GH治疗,n=58)与非预处理组(Gn启动开始间断予以GH治疗,n=49),自身对照29人,移植或取卵失败后应用生长激素预处理(Gn启动前连续应用约4周的GH治疗);组间对照比较Gn使用总量、使用天数、获卵数、胚胎数、优质胚胎数、种植率、生化妊娠率及临床妊娠率,自身对照比较GH预处理前后Gn使用总量、使用天数、获卵数、胚胎数、优质胚胎数、种植率、生化妊娠数及临床妊娠数。第二部分,体外研究GH对低反应颗粒细胞及线粒体膜电位影响。用5mg/L顺铂处理来塑造低反应颗粒细胞模型;研究对象分为三组,新鲜组(即培养后的颗粒细胞)、低反应组(用5mg/L顺铂处理24小时后的颗粒细胞)、GH处理组(用5mg/L顺铂处理24小时后的的低反应颗粒细胞再加用生长激素处理48小时后);分别先用光学显微镜观察颗粒细胞数量及形态变化后用JC-1/PI染色液染色,用共聚焦显微镜观察颗粒细胞线粒体形态变化并组间比较线粒体膜电位的差异。结果:第一部分:(1)组间对照中预处理组Gn的使用总量(2031.03±945.55)和使用天数(8.93±2.53)明显少于非预处理组Gn的使用总量(3578.24±1277.56)和使用天数(11.63±3.04),其胚胎数(2.38±1.75)、优质胚胎数(1.79±1.41)、移植率(36.14%)、生化妊娠率(55.17%)、临床妊娠率(48.28%)明显高于非预处理组的胚胎数(1.76±1.01)、优质胚胎数(1.14±1.14)、移植率(18.97%)、生化妊娠率(24.49%)、临床妊娠率(18.37%),差异均有显著统计学意义(P0.05);但其获卵数(4.98±3.10)与非预处理组的(4.67±1.95)差异无统计学意义(P0.05)。(2)自身对照组应用生长激素预处理后比较之前不但Gn的使用天数(-1±2.66)与总量(-317±872.6)减少,而且获卵数(2.17±2.07)、胚胎数(1.41±1.70)、优质胚胎数(1.31±1.23)、移植率(0%VS 33.33%)、生化妊娠数(1 VS 16)、临床妊娠数(0 VS 14)均升高,差异有显著统计学意义(P0.05)。第二部分:首先通过光学显微镜下观察发现5mg/L顺铂处理后的颗粒细胞数量明显减少伴有形态改变,而后通过GH干预后其数量又明显增加伴形态恢复。接下来从二个方面观察GH的作用:㈠颗粒细胞线粒体形态方面,GH组线粒体体积虽较新鲜组稍增大,但较低反应组明显缩小,其基质密度较低反应组明显升高、界限也较低反应组更清晰。㈡颗粒细胞线粒体膜电位方面,5mg/L顺铂处理后的低反应组的颗粒细胞线粒体膜电位值较新鲜理组的明显减少,差异有显著统计学意义(P0.05);GH处理组的颗粒细胞线粒体膜电位值较低反应组的明显升高,差异有显著统计学意义(P0.05);GH处理组的颗粒细胞线粒体膜电位值小于新鲜组的颗粒细胞线粒体膜电位值,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)生长激素预处理可明显提高POR患者体外受精的临床结局,并明显减少Gn的使用总量和天数。2)GH可改善颗粒细胞功能,增加低反应颗粒细胞线粒体的膜电位值。
【学位单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R714.8
【部分图文】：

先光学显微镜下可明显看出 5mg/L 顺铂处理后的颗粒细胞数量上明显减态发生改变；后经过生长激素干预处理后发现其颗粒细胞数量明显增多，也明显恢复，与新鲜组差异不大。其次，通过共聚焦显微镜下染色可以看处理后线粒体体积肿胀、基质密度低。具体详见图 1。新鲜组 5mg/L 顺铂处理 GH 组

图 2 .新鲜组、低反应组及 GH 处理组的颗粒细胞线粒体荧光染色对比3.2.2 线粒体膜电位结果激光共聚焦显微镜定性观察显示：与新鲜组相比，低反应组红色荧光(JC-1聚合体)／绿色荧光(JC-1 单体)明显下降，提示低反应组膜电位呈现逐渐下降的趋势，聚集体/单体比值差异有显著统计学意义（P<0.05），说明 5mg/L 顺铂制造的颗粒细胞低反应模型很成功。与低反应组相比，GH 处理组红色荧光(JC-1 聚合体)／绿色荧光(JC-1 单体)明显升高，聚集体/单体比值差异有显著统计学意义（P<0.05），说明 GH 处理组膜电位呈现恢复的趋势。与新鲜组相比，GH 组红色荧光(JC-1 聚合体)／绿色荧光(JC-1 单体)略降低，聚集体/单体比值差异无显著统计学意义（P>0.05），说明 GH 处理后线粒体膜电位恢复良好，GH 对低反应颗粒细胞治疗有效。具体详见表 4，表 5 及图 3。

安徽医科大学硕士学位论文表 4 完全随机设计方差分析表变异来源 SS df MS F P处理组间 1.2374 2 0.6187 8.3863 <0.01组内（误差） 1.3279 18 0.0738总 2.5653 20表 5 SNK 法 q 检验计算表对比组 两均数之差 差的标准误 q 值 组数 a P新鲜组与低反应组 0.6007 0.1037 5.7903 3 <0.01新鲜组与生长激素处理组 0.2598 0.0994 2.6132 2 ＞0.05生长激素处理组与低反应组 0.3409 0.1069 3.1898 2 0.01~0.05图 3.三组之间的差异比较

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本文编号：2813353