MicroRNA-10b与HOXD10在子痫前期患者胎盘中的表达及意义

发布时间：2020-09-09 15:25

　　目的讨论子痫前期患者胎盘组织中miR-10b和HOXD10的表达情况、相关性及其在疾病发生发展中的意义。方法1选取63例于2017.11-2018.07在唐山市工人医院产科住院的患者,其中29例组成正常妊娠组、14例组成子痫前期组、20例组成子痫前期重度组,所选患者的分娩方式均为剖宫产。2采用RT-PCR技术检测miR-10b在正常妊娠组、子痫前期组及子痫前期重度组胎盘组织中的表达差异情况;采用Western blot技术检测HOXD10蛋白在正常妊娠组、子痫前期组及子痫前期重度组胎盘组织中的表达差异情况;培养JEG-3细胞,通过细胞转染技术将miR-10b mimics转入JEG-3细胞内,使miR-10b过表达,采用RT-PCR方法检测JEG-3细胞转染情况;细胞模型构建成功后,采用RT-PCR及Western blot技术检测各组细胞内HOXD10 mRNA及HOXD10蛋白的表达差异情况;采用CCK-8实验及划痕实验检测各组细胞增殖能力及侵袭能力的差异。3各实验数据的统计学分析采用SPSS17.0软件,单因素方差分析用于多样本之间的比较,SNK及LSD分析用于两样本之间的比较,双变量相关分析用于相关性分析。结果1 miR-10b在子痫前期组及子痫前期重度组患者胎盘组织中呈低表达,与正常妊娠组相比较差异有统计学意义(F=1527.224,P0.05),miR-10b在子痫前期重度组患者胎盘组织中的表达明显低于子痫前期组,差异有统计学意义(LSDt=27.312,P0.05);在子痫前期组与子痫前期重度组的患者胎盘组织中的HOXD10蛋白呈高表达,与正常妊娠组相比差异有统计学意义(F=277.302,P0.05),且HOXD10蛋白在子痫前期重度组比子痫前期组的胎盘组织中高表达(LSD-t=10.308,P0.05);miR-10b与HOXD10的表达表现为负相关,差异具有统计学意义(r=-0.961,P0.05)。2 has-miR-10b-mimics转染JEG-3细胞使其过表达,应用RT-PCR进行检测,结果显示实验组细胞中的miR-10b的表达水平显著高于空白对照组、脂质体组及阴性组(F=370.429,P0.05),而miR-10b的表达在空白对照组、脂质体组及阴性组之间无显著性差异(P0.05);细胞转染完成后,实验组细胞中的HOXD10 mRNA的表达水平显著低于空白对照组、脂质体组及阴性组(F=208.196,P0.05),而空白对照组、脂质体组及阴性组的HOXD10mRNA的表达水平无显著性差异(P0.05);细胞转染完成后,实验组细胞中的HOXD10蛋白的表达水平显著低于空白对照组、脂质体组及阴性组(F=105.443,P0.05),而HOXD10蛋白的表达在空白对照组、转染试剂组及阴性组之间无明显差异性(P0.05);细胞转染完成后,实验组细胞的增殖能力显著高于空白对照组、脂质体组及阴性组(F=1985.701,P0.05),而增殖能力在空白对照组、脂质体组及阴性组细胞之间的没有明显的差异性(P0.05);细胞转染完成后,实验组细胞的侵袭能力显著高于空白对照组、脂质体组及阴性组(F=112.800,P0.05),而侵袭能力在空白对照组、脂质体组及阴性组细胞间的差异性不明显(P0.05)。结论1在孕妇胎盘中HOXD10是miR-10b的靶基因,且二者呈负向调控关系;2在子痫前期患者胎盘中miR-10b表达明显下降,且通过负向调节使HOXD10蛋白表达明显增加,随着疾病的发展变化愈发明显;3在JEG-3细胞中过表达miR-10b可以使HOXD10 mRNA及HOXD10蛋白的表达明显下降和使JEG-3细胞的增殖能力与侵袭能力的增强;4 miR-10b及HOXD10可能会成为子痫前期疾病早期预防及诊断的靶向目标。图14幅;表11个;参62篇。
【学位单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R714.244
【部分图文】：

形态图,细胞的,形态,蛋白

rrelation正常妊娠组子痫前期组子痫前期重度组0.00.51.01.5HOXD10蛋白miR-10bmiR-10b与HOXD10蛋白的相对表达量图 4 miR-10b 与 HOXD10 蛋白相对表达量的折线图e graph of the relative expression of miR-10b and HOXD生长形态细胞呈贴壁生长，多数细胞形态表现为上皮细后几乎全部贴壁，成片成长，如图 5 所示，细

示意图,示意图,脂质体,阴性

华北理工大学硕士学位论文mRNA 在空白对照组、脂质体组、阴性组、实验组的细胞中的相对表达量是（1.008±0.011）、（1.057±0.033）、（1.060±0.007）、（0.542±0.048），可见实验组和空白对照组、脂质体组及阴性组之间相比，HOXD10 mRNA 表达显著降低，差异有统计学意义（F=208.196，P=0.000），空白对照组、脂质体组及阴性组之间差异无统计学意义（P 值分别为 0.078、0.067、0.927），表明 miR-10b 在转录水平抑制 HOXD10 的表达。

划痕,细胞,实验组,脂质体

空白对照组脂质体组阴性组实验组图 13 细胞划痕图（×400）Fig.13 Cell scratch map（×400）表 11 细胞划痕后 0 h、48 h 的划痕面积及侵袭率（ x s）Table 11 Scratch area at 0h and 48h after cell scratch and invasive rate ( )组别例数 0 h 划痕面积（Sb） 48 h 划痕面积（Sa）侵袭率（%）空白对照组 3 862.282±51.579 660.673±25.372 23.253±4.223脂质体组 3 878.731±47.601 608.380±14.569 30.686±2.252阴性组 3 842.195±3.298 604.173±56.829 28.205±7.095实验组 3 872.169±53.361 201.850±27.085abc76.659±4.686abcF 0.392 112.800 77.718P 0.763 0.000 0.000注：P 值：One-Way ANOVA test；两组之间比较采用 LSD 及 SNK 检验；a 表示实验组与空白对照组相比，P<0.05，b 表示实验组与脂质体组相比，P<0.05，c 表示实验组与阴性组相比，P<0.05。

【参考文献】