关于人类精子自发顶体反应率与ART结局相关性关系研究

发布时间：2020-09-27 07:20

　　 目的：本论文通过对人类精子进行自发顶体反应率的检测,并探讨精子自发顶体反应率与ART结局相关性关系的前瞻性研究,包括自发顶体反应率与AI结局(夫精IUI妊娠率、供精ICI妊娠率)、IVF结局(夫精IVF受精率、供精IVF受精率)的相关性关系探讨,期待确定精子自发顶体反应的检测是否具有真正意义的临床预测性,建立一套自发顶体反应检测的评估体系,通过评估精子自发顶体反应率,提高预测样本生育力的准确性,为进行ART治疗的夫妇在选择正确的治疗方案提供一定的临床指导意义。 方法：选取我院接受AI(夫精IUI、供精ICI)、IVF(夫精IVF、供精IVF)治疗的不孕夫妇,其夫精精液、供精精液经精液制备处理后,取微量精液通过FITC-PSA荧光染色,×400荧光显微镜下至少计数200个精子分别检测自发顶体反应率。随后根据分别符合夫精IUI、供精ICI、夫精IVF、供精IVF治疗指征的不孕不育夫妇临床病例资料选择纳入研究的对象组,使用统计软件SPSS16.0对精子自发顶体反应率与精液各参数、ART临床结局进行相关性分析,使用ROC曲线分析筛选出各研究对象组中对临床治疗方案选择有指导意义的最佳阈值,期待建立一套自发顶体反应检测的参考值体系。本研究已申报伦理审查并已获伦理委员会批准,批件号：LL-SC-SG-2013-014。 结果：(1)接受夫精IUI治疗的不孕不育夫妇,夫精精子自发顶体反应率与精液处理前后密度、精液处理前后(C+D)级精子数正相关,与精液处理前后活率负相关。(2)接受夫精IVF治疗的不孕不育夫妇,ROC曲线分析筛选出诊断低受精率(IVF卵母细胞受精率50%)的夫精精子自发顶体反应率的最佳阈值为4.4%,夫精精子自发顶体反应率与精子正常形态率、精液处理前密度、精液处理前活率、精液处理前前向运动精子百分率、精液处理前后A级精子百分率、精液处理前B级精子百分率负相关,精液处理前C级精子百分率、精液处理前D级精子百分率正相关。(3)接受供精IVF治疗的不孕不育夫妇,供精精子经双层密度梯度离心制备处理后,ROC曲线分析筛选出诊断低受精率的供精精子自发顶体反应率的最佳阈值为17.62%,自发顶体反应率与精液处理后密度、IVF受精率负相关；供精精子经微量密度梯度离心制备处理后,ROC曲线分析筛选出诊断低受精率的供精精子自发顶体反应率的最佳阈值为25.36%,自发顶体反应率(按25.36,≥25.36)进行分组,两组间IVF受精率有显著性差异。(4)接受供精ICI治疗的不孕不育夫妇,精子自发顶体反应率与冷冻复苏率正相关。(5)精液经上游法制备处理后检测的自发顶体反应率显著低于双层密度梯度离心。 结论：(1)对接受夫精IUI、供精ICI治疗的不孕不育夫妇,精子自发顶体反应率对临床妊娠的预测价值仍需进一步研究验证。(2)对夫精IVF、供精IVF治疗的不孕不育夫妇,虽然ROC曲线分析给出cut-off值,但两组间IVF受精率均大于70%,对决定临床治疗方案指导意义不大。(3)不同的精液制备方法、冷冻损伤对精子自发顶体反应率有一定影响。
【学位单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2014
【中图分类】：R714.8
【部分图文】：

每张涂片添加一滴1滴焚光封固液，对精子涂片焚光进行封固。在激发光450-490nm，x400倒置焚光显微镜下观察结果，每张精子涂片根据不同精子分类至少计数200个精子，每份精子标本重复计数两张精子涂片，计算自发顶体反应率。(7)结果判定与计算：根据X400焚光光学显微下观察结果，并拍照记录染色效果。精子分为两类：1、顶体完整(AI):精子头部一半以上发明亮的均匀的焚光2、顶体反应(AR):分为3种类型，包括顶体区斑点状着色、仅赤道带出现焚光、顶体区无焚光着色(包括精子表面没有焚光、仅顶体后区有焚光两种类型）。3、自发顶体反应率（％)=(发生自发AR的精子数/被观察显微镜下所计精子总数）XI00%2结果2.1 X400焚光显微镜下精子自发顶体反应辨别标准

图4三号样本FITC-PSA焚光染色图片a:顶体完整精子（AI);b:顶体反应精子（AR); d:顶体反应精子（AR)2.3数据统计结果统计分析：使用SPSS 16.0统计软件，组间连续性变量的比较采用t检验，分类资料采用卡方检验2.3.1精液处理前各参数均值在我院门诊进行相关精液检查不育男性，按照WHO第5版《人类精液检验与处理实验室手册标准》，精液体积、密度、活力正常精液标本共40份，精液处理前各参数均值见表1。

6.49±3.50%, 9.94±4.88%,具有极显著性差异（PCO.Ol)，见表2，不同精液制备方法精子自发AR率比较条形图见图5。 表2上游法与密度梯度离心处理后精子自发顶体反应率比较 精液制备处理方法 + P值 上游法 双层密度梯度离心 精子自发 AR 率（％) 6,49±3.50 9.94±4.88 0.007****P<0.0110 00- I 8,00-f. I 1卩 6 00->73八^ 4 00-200-。00_1 1 , 1 1 1 1 *个袖液制各Jj fk图5不同精液制备方法精子自发AR率比较10

【参考文献】

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本文编号：2827585