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Caspase3和Caspase7在胚胎停育绒毛组织中的表达研究

发布时间:2020-10-11 02:57
   目的:通过对胚胎早期停育患者(胚胎停育组)和正常早期妊娠妇女(正常妊娠组)的绒毛组织中细胞凋亡情况进行检测,同时以标记分子Caspase3、标记分子Caspase7对胚胎早期停育患者(胚胎停育组)和正常早期妊娠妇女(正常妊娠组)的绒毛组织中细胞凋亡情况进行检测,探讨Caspase3和Caspase7蛋白在停育胚胎绒毛组织中的表达意义。方法:选取2017年02月至2019年01月于皖南医学院第一附属医院弋矶山医院及皖南医学院第二附属医院人流室收集的确诊为早期胚胎停育行人工流产术的胚胎绒毛组织21例,作为胚胎停育组;同时期正常早期妊娠要求行人工流产术终止妊娠的胚胎绒毛组织21例,作为正常妊娠组。运用HE染色法结合光学显微镜对两组绒毛组织进行镜下观察;TUNEL法对两组绒毛组织进行凋亡实验;免疫组织化学-SP法对caspase3和caspase7的表达进行定位;蛋白质免疫印迹法(Western blot)对两组绒毛组织的caspase3、caspase7的表达做定量分析。结果:1.两组妊娠妇女的年龄、月经周期、妊娠天数、孕次未发现统计学差异(P0.05)。2.HE染色:正常妊娠组的绒毛组织镜下结构清晰,易于辨认,细胞排列整齐。胚胎停育组绒毛组织镜下结构较清晰,细胞排列稍紊乱。3.TUNEL法:凋亡细胞分布于绒毛滋养层细胞间和/或间质内。正常妊娠组的绒毛内着色较少,分布于绒毛滋养层细胞间;胚胎停育组绒毛内成片着色,颜色较深,明显多于正常妊娠组,分布于绒毛滋养层细胞间和间质内。4.免疫组织化学-SP法:两组标本Caspase3蛋白的表达:(正常妊娠组:0.29±0.05,胚胎停育组:0.59±0.07,P0.05),Caspase7蛋白的表达也有统计学差异(正常妊娠组:0.22±0.04,胚胎停育组:0.32±0.08,P0.05)。5.Western blot:胚胎停育组绒毛组织中Caspase3蛋白(0.033±0.003)及Caspase7蛋白(0.023±0.004)的表达明显高于正常妊娠组Caspase3蛋白(0.023±0.002)及Caspase7蛋白(0.014±0.002)的表达,差异有统计学区别(P0.05)。结论:1.Caspase3可能通过凋亡路径参与了对早期胚胎停止发育的调控。2.Caspase7可能通过凋亡路径参与了对早期胚胎停止发育的调控。3.Caspase3和Caspase7或可作为早期妊娠期间筛查胚胎停止发育病因的分子标记物。4.由于胚胎停止发育的病因复杂,有必要进一步研究以期为将来临床诊疗提供依据。
【学位单位】:皖南医学院
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:R714.21
【部分图文】:

绒毛组织,HE染色,孕次,妊娠天数


1表 1 两组患者的一般资料比较指标 正常妊娠组(n=21) 胚胎停育组(n=21)年龄(y± x) 28.90±6.29 29.95±4.04月经周期(d± x) 29.60±0.89 29.95±0.22妊娠天数(d± x) 56.86±6.08 59.29±5.64孕次(f) 1.86±0.57 2.14±0.91与正常妊娠组相比,P 均大于 0.05HE 染色正常妊娠组的绒毛组织镜下结构清晰,易于辨认,细胞排列整齐。胚胎停毛组织镜下结构较清晰,细胞排列稍紊乱。见图 1,图 2

绒毛组织,HE染色,孕次,妊娠天数


1表 1 两组患者的一般资料比较指标 正常妊娠组(n=21) 胚胎停育组(n=21)年龄(y± x) 28.90±6.29 29.95±4.04月经周期(d± x) 29.60±0.89 29.95±0.22妊娠天数(d± x) 56.86±6.08 59.29±5.64孕次(f) 1.86±0.57 2.14±0.91与正常妊娠组相比,P 均大于 0.05HE 染色正常妊娠组的绒毛组织镜下结构清晰,易于辨认,细胞排列整齐。胚胎停毛组织镜下结构较清晰,细胞排列稍紊乱。见图 1,图 2

绒毛组织,凋亡细胞,细胞凋亡,ImageJ软件


皖南医学院硕士学位论文TUNEL 细胞凋亡检测结果显示两组绒毛组织中均存在细胞凋亡。凋亡细胞着色深,为棕黄色,胞质致密,染色质边集。正常妊娠组偶见少许凋亡细胞,分布于绒毛滋养层细胞间。胚胎停育组绒毛组织凋亡细胞明显增多,不均匀地分布于滋养层细胞和间质细胞间。见图 3,图 4用ImageJ软件对两组绒毛组织细胞的凋亡情况进行分析,结果用IOD值表示。可见胚胎停育组绒毛组织细胞凋亡程度明显强于正常绒毛组织,差异有统计学意义,(P<0.05)。见表 23 TUNEL 法
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本文编号:2835953

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