鸢尾素对上皮性卵巢癌细胞周期调控作用的研究

发布时间：2020-10-28 06:57

　　 目的:鸢尾素(Irisin)是一种与能量代谢、胰岛素抵抗等相关的细胞因子,在人体中广泛表达且与多种肿瘤的病理过程等密切相关,但目前有关鸢尾素对上皮性卵巢癌细胞生物学作用的相关研究甚少,本研究旨在明确鸢尾素对上皮性卵巢癌细胞的生物学作用及细胞周期的影响。方法:用不同浓度梯度的鸢尾素处理上皮性卵巢癌细胞株A2780,CCK-8实验检测鸢尾素对A2780细胞的生长增殖的影响,流式细胞周期检测实验检测鸢尾素对A2780细胞周期的影响,Western Blot检测细胞周期相关蛋白如细胞周期蛋白D_1的表达。用相关统计学软件进行处理分析,得出相关结论。结果:1.CCk-8实验:在鸢尾素浓度为0.625、1.25、2.5、5、10nmol/L的实验组中,A2780细胞的A值分别为0.428±0.045、0.442±0.048、0.472±0.031、0.469±0.042、0.468±0.027,与对照组(即鸢尾素浓度为0)的A值0.381±0.030相比,P均0.01,差异具有统计学意义。选取鸢尾素浓度为2.5nmol/L做A2780细胞的时间曲线(0h、12h、24h、36h、48h),A值分别为0.144±0.005、1.806±0.053、2.034±0.057、2.258±0.059、2.250±0.085,对照组(即鸢尾素浓度为0)的相同时间的A值分别为0.141±0.007、1.374±0.043、1.610±0.054、1.735±0.098、1.777±0.097,在12h、24h、36h、48h的实验组与对照组相比,P均0.01,差异具有统计学意义。2.流式细胞周期检测实验:在未加入鸢尾素的A2780细胞中,约(59.3±5)%细胞在G0-G1期,约(18.2±4)%、(22.5±6)%的细胞分别聚集在细胞周期中的S、G2-M期;在加入2.5nmol/L鸢尾素培养的A2780细胞中,约(47.2±6)%细胞在G0-G1期,约(26.7±7)%、(26.1±4)%的细胞分别聚集在细胞周期中的S、G2-M期,与对照组分别相比,P均0.01,差异具有统计学意义。3.Western Blot检测细胞周期相关蛋白—细胞周期蛋白D_1的表达,实验组相较对照组,细胞周期蛋白D_1的相对表达量为(1.340±0.024),高于对照组的1,t=19.63,P0.0001,差异具有统计学意义,即实验组细胞周期蛋白D_1的表达明显增加。结论:1.鸢尾素促进上皮性卵巢癌A2780细胞的生长增殖,并呈时间依赖性。2.鸢尾素促进上皮性卵巢癌A2780细胞的细胞周期进程加快,促使细胞从G1期进入S期。3.鸢尾素促进上皮性卵巢癌A2780细胞中细胞周期蛋白D_1的表达。
【学位单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R737.31
【部分图文】：

A2780 细胞的 A 值分别为 0.428±0.045、0.442±0.048、0.472±0.031、0.469±0.042、0.468±0.027 ,与对照组的 A 值 0.381±0.030 分别相比，P 均＜0.01，差异具有统计学意义。结果如图1所示。鸢尾素浓度为5、10nmol/L与鸢尾素浓度为2.5nmol/L分别相比，差异没有统计学意义（t=1.374，P=0.1994；t=1.704，P=0.1191）。当鸢尾素浓度为 2.5nmol/L 时，促细胞生长增殖效应最强，鸢尾素浓度继续上升时并没有表现出更强的促生长增殖能力，且结合实际考虑到减少实验步骤的操作误差及试剂鸢尾素的价格昂贵和不易获得，故选取鸢尾素浓度为 2.5nmol/L 进行后续实验。以鸢尾素浓度为2.5nmol/L 做 A2780 细胞的时间曲线（0h、12h、24h、36h、48h），发现鸢尾素对 A2780细胞的促生长增殖能力呈时间依赖性

表 1：不同时间 2.5nmol/L 鸢尾素对上皮性卵巢癌 A2780 细胞生长增殖能力的影响注:VS 对照，P﹡＜0.01，差异具有统计学意义。A2780 Absorbancetime（h） n control 2.5nmol/L P value0 12 0.141±0.007 0.144±0.005 0.101612 12 1.374±0.043 1.806±0.053 ＜0.001﹡24 12 1.610±0.054 2.034±0.057 ＜0.001﹡36 12 1.735±0.098 2.258±0.059 ＜0.001﹡48 12 1.777±0.097 2.250±0.085 ＜0.001﹡

青岛大学硕士学位论文6)%细胞在 G0-G1 期，约(26.7±7)%、(26.1±4)%的细胞分别聚集在细胞周期中的 S、G2-M期,与对照组分别相比，P 均＜0.01，差异具有统计学意义。结果分别见表 2 及图 5。
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本文编号：2859754