HBV宫内感染与母体HBV-DNA及胎盘Toll样受体3关系的研究

发布时间：2020-11-11 16:08

　　目的:1.探讨母体血中HBV-DNA含量与胎儿宫内感染的关系。说明孕妇血清HBV-DNA浓度可能存在一影响HBV宫内感染率的载量界面,若控制母体HBV-DNA的载量低于这一界面,则可降低宫内感染率的发生。从而为预防和阻断HBV宫内感染提供临床依据,便于更好更规范的推广阻断方法的使用,有效减少乙肝的母婴垂直传播。2.尽管接受免疫预防,仍有10-15%的婴儿通过母婴传播发展为慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者,通过分析胎盘组织TLR3与HBV感染的关系,探讨宫内感染失败的原因,说明HBV持续感染伴随胎盘组织TLR3表达下调,是造成宫内感染的危险因素之一。方法:选择2016年1月至2016年12月就诊于连云港市东方医院及第一人民医院妇产科住院孕产妇进行乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)检测,其中选取HBsAg阳性者104例,按乙肝血清学标志物检测结果分为HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组38例(A组),HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组55例(B组)和HBsAg、HBcAb阳性组9例(C组)、HBsAg阳性2例(D组)。选择正规产检的夫妻双方HBsAg均为阴性的正常孕妇40例作为对照组。HBsAg阳性孕妇于自然分娩前或剖宫产前采集静脉血检测血清HBV-DNA,新生儿采集脐血检测HBV血清标志物及HBV-DNA;HBsAg阳性孕妇及正常孕妇于自然分娩或剖宫产时迅速无菌收集胎盘组织,用免疫组化方法检测胎盘组织TLR3的表达情况。(1)将≥10~3copy/ml定义为HBV-DNA阳性,并进一步将HBsAg阳性孕妇血清HBV-DNA分为6个等级:1级10~4、2级10~5、3级10~6、4级10~7、5级10~8、6级10~9(copy/ml),然后将每一等级的宫内感染率进行对比分析。(2)比较HBsAg阳性孕妇血清HBV-DNA及其胎盘TLR3的关系。(3)比较HBsAg阳性孕妇胎盘组织及正常孕妇胎盘组织TLR3表达情况。结果:104例HBsAg阳性孕妇,10例新生儿发生宫内感染,占9.62%;其中新生儿HBsAg阳性者3例,HBV-DNA阳性者7例,HBsAg及HBV-DNA均阳性者1例。A、B、C、D组新生儿宫内感染率分别为18.4%(7/38)、5.45%(3/55)、0(0/9)、0(0/2)。其中AB组孕妇新生儿宫内感染率比较有显著性差异(x~2=3.937,p0.05)。104例HBsAg阳性孕妇宫内感染情况中HBV-DNA阳性者为60例,发生宫内感染8例,感染率为13.3%(8/60)。分别对母体血清中的HBV-DNA载量进行等级排序,并分析母体不同等级的HBV-DNA与HBV宫内感染之间的关系。结果显示当HBV-DNA≥10~6copy/ml,宫内感染率显著升高,因此HBV-DNA≥10~6copy/ml可能为宫内感染的载量界面(x~2=5.194,p0.05);当HBV-DNA在1-3等级时,HBV宫内感染率无显著性差异(x~2=2.511,p0.05),在5-6等级之间宫内感染率也无显著性差异(x~2=3.604,p0.05)。TLR3受体在对照组阳性率为100%(40/40),TLR3在40例正常孕妇胎盘各层细胞都有较强的免疫印迹,以胞浆分布为主,于胞核上亦有分布,呈片状分布;病例组阳性率为71.2%(74/104),其中,30例没有阳性信号显示,74例检测有阳性信号,46例滋养层细胞阳性、30例胎盘蜕膜细胞阳性、74例绒毛毛细血管内皮细胞阳性,72例绒毛间质细胞阳性,呈局灶性分布(图1,2)。TLR3在正常孕妇胎盘和HBsAg阳性孕妇胎盘分布差异有统计学意义(x~2=14.575,p0.001)。其中,HBV-DNA载量越高,TLR3的表达越弱,提示TLR3受体可能为HBV感染的保护性因素。结论:HBsAg阳性孕妇可发生HBV宫内感染,随着孕妇血清HBV-DNA含量的升高宫内感染率逐渐增高,HBV-DNA≥10~6copy/ml,宫内感染率显著升高,因此HBV-DNA≥10~6copy/ml可能为宫内感染的载量界面,若孕期控制HBV-DNA低于这一水平,可有效降低HBV宫内感染率。胎盘组织TLR3的表达与孕妇HBV感染有一定关系,胎盘组织中TLR3的表达降低与HBV感染的关系表明胎盘屏障的失败可能是垂直传播的原因之一,其中HBV-DNA的载量越高,TLR3的表达越弱,提示TLR3受体可能参与病毒感染的相关过程。
【学位单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R714.251
【部分图文】：

分布情况,绒毛,滋养层细胞,免疫组织化学法

74 例绒毛毛细血管内皮细胞显示阳性，72 例绒毛间质细胞显示阳性，呈局灶性分布（图1，2）。在正常孕妇和 HBsAg 阳性孕妇的胎盘中，TLR3 的表达差异有统计学意义（x2=14.575,P<0.001），见表 4。其中，检测数值越高的 HBV-DNA 孕妇，其胎盘组织中 TLR3 的表达越弱，提示抗 HBV 感染的保护性因素可能为 TLR3 受体。表 4：TLR3 在 HBsAg 阳性孕妇和正常孕妇胎盘组织分布情况组别总例数 TLR3 阳性 TLR3 阴性阳性率病例组 104 74 30 71.2%对照组 40 40 0 100%注：x2=14.575,P<0.001图 1 免疫组织化学法检测胎盘 TLR3 的表达情况，滋养层细胞、绒毛间质细胞棕黄色信号显示TLR3 的表达（10X40）

信号显示,蜕膜细胞,棕黄色,免疫组织化学法