XAV939对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及顺铂增敏作用
本文关键词：XAV939对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及顺铂增敏作用，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：背景与目的卵巢癌,以卵巢上皮性癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)为主,是女性妇科肿瘤相关死亡的主要原因,也是妇科最致命的恶性肿瘤。据统计,1999-2010年间我国卵巢癌的总体粗死亡率为7.91/10万,年龄校正总死亡率为5.35/10万[1]。由于缺乏用于早期诊断的特异性指标及该病发病的隐匿性,大部分卵巢上皮性癌患者因症状出现而就诊时已处于临床晚期,而传统的化疗方案则因癌细胞化疗药物抗性的产生难以达到治疗效果,使得该病的治疗遇到了前所未有的挑战[2]。因此,更好地研究与卵巢癌发生发展及耐药性获得相关的分子机制,从而找到早期诊断灵敏度高的特异性指标和针对性强且副作用小的分子靶向治疗药物已迫在眉睫。最近一些国内外学者均发现,目前在肿瘤治疗方面研究相当火热的Wnt/β-catenin通路的活化可能参与了卵巢癌的发生发展及其化疗药物的耐受[3;4]。研究证明在卵巢上皮性癌中存在一些表达上调的Wnt/β-catenin通路成员蛋白,例如细胞外信号蛋白Wnt-1、通路核心蛋白β-catenin及下游靶基因转录蛋白c-myc、cyclinD1,其中β-catenin参与了卵巢癌细胞的异常增殖和转移。因此,如果找到可以抑制该通路中任意环节的靶向性药物,我们便有望解决化疗药物毒副作用大和肿瘤耐药这两大世界性难题,为每一位肿瘤患者带来希望。端粒酶作为端粒长度的“守卫员”,早在上世纪末就被证明在许多恶性肿瘤中表达上调,其中也包括妇科死亡率最高的卵巢癌,murakami等[5]通过对卵巢良性、交界性及恶性肿瘤组织的分析发现,92%的组织中端粒酶呈现高表达,且肿瘤分化程度与酶的活性呈现负相关。目前,有不少学者正在尝试将端粒酶的特异性抑制剂应用于肿瘤的治疗中,主要集中于肝癌、鼻咽癌、胃癌及卵巢癌等方面,也取得了一定的成效,但并没有为肿瘤的获得性药物耐受问题带来帮助。端锚聚合酶(tankyrase)是一种多功能蛋白酶,其一方面利用糖基化功能抑制tankyrase1/2的活性,为端粒酶提供作用位点并维持染色体末端稳定性;另一方面则可增加锚蛋白的稳定性,进而加速β-catenin降解,介导wnt/β-catenin通路的正向运行。xav939是huang,s.m等[6]学者于2009年基于抑制β-catenin转录而筛选出的wnt/β-catenin通路特异性小分子抑制剂,他们利用定量化学蛋白质组学方法发现,其发挥作用主要依赖于介导锚蛋白稳定性的增加,促进该通路的“开关蛋白”β-catenin的降解,进而对肿瘤达到治疗效果。本次研究将端锚聚合酶抑制剂xav939作用于人卵巢腺癌顺铂原发耐药细胞株(skov3细胞株),并检测细胞用药后的增殖、凋亡情况及细胞核质内tankyrase、cyclind1和β-catenin的表达情况,以期为卵巢癌小分子靶向治疗药物的研发和耐药的逆转提供新的方向。材料与方法人卵巢癌skov3细胞体外复苏并培养至对数期,将这些细胞分为端锚聚合酶抑制剂(xav939)组、顺铂组、两者联合组及对照组,以mtt法分别检测不同药物浓度作用下各组细胞的增殖及抑制情况;再以流式细胞技术检测不同浓度的xav939对skov3细胞的凋亡及细胞周期的影响;然后以westernblot法检测skov3细胞中tankyrase、cyclind1及β-catenin的表达情况,并以不同浓度的xav939作用于skov3细胞48小时后再次检测三种蛋白表达量的变化。实验所得计量数据以spss20.0软件进行分析,检验水准定为α=0.05。结果1、XAV939及DDP对SKOV3细胞的生长抑制作用:XAV939与DDP在体外对卵巢癌SKOV3细胞均有一定的抑制作用,且抑制作用的强弱与药物作用浓度及作用时间呈现正相关,即存在浓度和时间的依赖现象(P0.05)。2、XAV939对SKOV3细胞的顺铂增敏作用:以0.8μM的XAV939分别联合DDP各浓度作用于SKOV3细胞48小时后,小浓度时细胞抑制率高于DDP单药组,SKOV3细胞对顺铂的敏感性增加(IC50(DDP)=69.059μg/ml IC50(XAV939+DDP)=52.254μg/ml)。3、XAV939对SKOV3细胞细胞周期及凋亡的影响:细胞周期及凋亡检测显示,与对照组相比XAV939作用后细胞的凋亡率随着药物浓度的增加呈增高趋势,差异统计学意义显著(F=512.78,P0.05)。增加XA939作用浓度后,细胞呈现G0/G1期阻滞(P0.05),S期细胞所占百分比下降,且呈现明显的浓度依赖(P0.05)。4、XAV939对SKOV3细胞中Tankyrase、CyclinD1、β-catenin蛋白表达量的影响:蛋白免疫印迹结果显示,Tankyrase、cyclinD1、β-catenin在卵巢癌SKOV3细胞中均呈现高表达;当XAV939作用后三者的表达量均明显下降。结论1.XAV939及DDP单药于体外对人卵巢癌SKOV3细胞株具有一定细胞毒作用,且具有时间及剂量依赖的特点。2.XAV939与DDP合用时可增加SKOV3细胞对DDP的敏感性,加速细胞的凋亡。3.XAV939可能通过降低Tankyrase和β-catenin蛋白的表达,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖。
【关键词】：卵巢上皮性癌 Tankyrase 化疗耐药 XAV939
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：
- 摘要4-7
- Abstract7-12
- 中英缩略词对照表12-14
- 前言14-17
- 1 材料与方法17-24
- 2 结果24-29
- 3 讨论29-34
- 4 结论34-35
- 5 附图35-36
- 6 参考文献36-39
- 综述 端锚聚合酶及Wnt/β-catenin通路与卵巢上皮性癌发生及化疗耐药的关系39-60
- 参考文献54-60
- 个人简历60-61
- 攻读硕士学位期间发表的学术论文61-62
- 致谢62
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 金晓琴;形态罕见的卵巢肿瘤1例[J];现代中西医结合杂志;2000年07期
2 覃英姿;卵巢肿瘤并发阑尾炎1例报告[J];中国校医;2000年02期
3 韩卫红,李青,李霞;经阴道超声在卵巢肿瘤诊断中的应用[J];青岛医药卫生;2000年03期
4 ;卵巢肿瘤[J];国外科技资料目录.医药卫生;2000年10期
5 秦平,陈焰;二维超声及彩色多普勒联合应用对卵巢肿瘤的诊断[J];中国超声医学杂志;2001年07期
6 王月香;超声多普勒技术在卵巢肿瘤诊断上的新进展[J];河北医科大学学报;2001年06期
7 崔淑莉,徐爱哲,赵世强;经阴式彩色多普勒对卵巢肿瘤性质判定的临床意义[J];哈尔滨医药;2001年01期
8 史海英,姜胜健;卵巢肿瘤误诊13例分析[J];肿瘤防治杂志;2001年03期
9 赵信喜;微波快速石蜡切片诊断卵巢肿瘤206例分析[J];中国误诊学杂志;2001年05期
10 ;卵巢肿瘤[J];国外科技资料目录.医药卫生;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李利;王超英;林忠乙;;老年卵巢肿瘤82例分析[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第六次全国学术会议论文汇编[C];2001年
2 杨幼易;;老年妇女卵巢肿瘤手术治疗140例临床分析[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第六次全国学术会议论文汇编[C];2001年
3 杨帆;杨太珠;罗红;朱琦;郭文琪;田雨;陈娇;;生育前期女性卵巢肿瘤39例超声诊断[A];2005年全国医学影像技术学术会议西部论坛论文汇编[C];2005年
4 张海;李光展;吴瑛;卢俊;王慧芳;邓伟莲;;经阴道彩色多普勒血流图检测卵巢肿瘤血管的临床价值[A];中华医学会第六次全国超声医学学术年会论文汇编[C];2001年
5 洪树勋;许红;曹良杰;;801例卵巢肿瘤临床分析[A];纪念卓越的人民医学家林巧稚大夫诞辰100周年——全国妇产科高级学术论坛论文集[C];2001年
6 梁元姣;叶小勤;;老年妇女双侧卵巢巨大肿瘤1例报告[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第六次全国学术会议论文汇编[C];2001年
7 刘力;李冰琳;张启培;;836例卵巢肿瘤临床病理分析[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年
8 陈晓玲;纪莉;吴晓燕;鱼红菊;王琳;;彩色多普勒超声在卵巢肿瘤诊断中的应用[A];第一届全国妇产科超声学术会议论文汇编[C];2006年
9 许幼峰;郭e，
本文编号：292360
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/292360.html
