双硫仑联合铜离子对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响

发布时间：2020-12-25 02:09

　　目的:通过体外细胞实验,研究不同浓度的双硫仑（Disulfiram,DSF）及双硫仑联合铜离子（DSF/Cu）对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响,并探讨其与NF-κB及PI3K/Akt/mTOR蛋白通路的关系。方法:1、以人宫颈癌Hela细胞株为研究对象,将Cu（1μmol/L）、不同浓度的DSF（0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L）以及DSF/Cu（浓度为0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L的DSF联合1μmol/L的Cu）分别作用于人宫颈癌Hela细胞24h,每个浓度梯度均设5个复孔,通过噻唑蓝比色法（MTT法）检测各组对Hela细胞的增殖抑制作用,并用graph prims5软件计算相应的IC₅₀值;2、蛋白质印迹法（Western blot,WB）检测Cu、DSF、DSF/Cu分别处理细胞后各组细胞内p65、PI3K、Akt、p-Akt及mTOR蛋白表达的... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DSF单药和DSF/Cu作用24h对体外培养的Hela增殖抑制率的影响

图 4.1 DSF 单药和 DSF / Cu 作用 24 h 对体外培养的 Hela 增殖抑4.2 DSF/Cu 对 Hela 细胞核中 p65 蛋白的影利用 western blot 检测 p65 蛋白表达的变化：将空白对2.64μmol/L (24hIC50浓度) DSF、0.053μmol/L(24hIC50颈癌 Hela 细胞，24 h 后提取核蛋白，利用蛋白质印迹法内 p65 蛋白表达的变化。结果显示，Cu 单药对各蛋白的表P＞0.05)。药物处理组 DSF 单药可明显下调 p65 蛋白表达DSF/Cu 对 p65 蛋白表达的下调比单独 DS 下调更明显(P＜4.2、图 4.3。

表 4.2 不同处理组对 Hela 细胞中 p65 蛋白的注：****：与阴性对照组比较 P＜0.0001；#：与 DSF 组比较 P=0.0038,P＜0.0组别 β-actin P65/β-actin对照组 18240±44.92 0.087±0.005Cu 18264±33.02 0.789±0.005DSF 18265±13.62 0.608±0.017*DSF/Cu 18235±47.89 0.496±0.023*


本文编号：2936749