LGR6对卵巢上皮癌细胞化疗敏感性影响的研究
发布时间：2021-01-10 10:26
研究背景Wnt信号通路持续激活参与了肿瘤干细胞特性的维持,是卵巢上皮癌复发及化疗耐药的关键机制之一。LGR6是富含亮氨酸的G蛋白偶联受体,被认为参与了经典Wnt信号通路的激活;但在卵巢上皮癌中,LGR6的临床意义、生物学功能以及其对Wnt信号通路的调控尚未阐明。研究目的探讨LGR6在卵巢上皮癌组织中表达的临床意义;LGR6在卵巢上皮癌细胞中对肿瘤干细胞样特性维持、对化疗药物敏感性的影响,以及在此过程中LGR6对Wnt经典信号通路的影响。研究方法1.用实时荧光定量PCR、免疫蛋白印迹、免疫组织化学等方法检测LGR6在卵巢上皮癌组织中的表达,分析294例卵巢上皮癌临床样品中LGR6的表达与化疗疗效、生存预后的关系。2.通过siRNA建立稳定的LGR6低表达卵巢上皮癌细胞株,构建卵巢癌细胞模型,用无血清悬球培养法、流式细胞术分析侧群细胞比例、荧光定量PCR检测干细胞分子标记等方法,验证LGR6在诱导和维持肿瘤干细胞特性中的作用。3.在卵巢上皮癌细胞模型中用CCK-8法、AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡、JC-1法测定线粒体膜电位、Caspase-9/-3底物活性测定法和免...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－３?ＬＧＲ６在正常卵巢上皮细胞株及８个卵巢癌细胞株中蛋白的表达??－
ＨＯＳＥｐｉＣ?ａｎｄ?８?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??以上结果提示，高水平的ＬＧＲ６表达有可能与卵巢上皮癌的发病机制有关。??２．３?ＬＧＲ６与卵巢上皮癌不良预后的关系??２．３．１?ＬＧＲ６的表达与卵巢上皮癌的组织学类型相关??为了进一步了解ＬＧＲ６在卵巢上皮癌不同组织学类型中的表达情况，本研??究扩大样本量，选用２９４例卵巢上皮癌和４０例正常卵巢组织的石蜡包埋切片进??行ＬＧＲ６免疫组化检测。以上病人的组织标本都是在医院手术切除的过程中获??得，均经病理证实，且所有患者在手术前均没有接受任何治疗。??不同组织学类型的卵巢上皮癌组织免疫组化染色的结果见图２－５，?ＬＧＲ６蛋??白表达的部位被染成棕色。如图所示，正常卵巢组织的上皮和间质无染色，ＬＧＲ６??在卵巢上皮癌组织中有不同程度的表达。在卵巢上皮癌组织中可以观察到，卵??巢癌细胞染色阳性，间质没有染色，免疫组化染色的定位在细胞浆、细胞核和??细胞膜。??Ｈｉｇｈ?ｇｒａｄｅ?ｓｅｒｏｕｓ?Ｌｏｗ?ｇｒａｄｅ?ｓｅｒｏｕｓ?Ｍｕｃｉｎｏｕｓ?Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｉｄ?Ｃｌｅａｒ?ｃｅｌｌ??ｎａｎｒｎｍｎｒ
Ｆｉｇ．?２－６?Ｔｈｅ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ?ｂｙ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ??ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ??对各种病理组织类型癌组织的评分进行统计学分析，结果见图２－７，可明确??卵巢浆液性腺癌与卵巢子宫内膜样腺癌中ＬＧＲ６表达最高，两者之间无显著性??差异。卵巢低级别浆液性腺癌、粘液腺癌和透明细胞癌表达量低于高级别浆液??腺癌，差别有统计学意义。??１５－｜?Ｐ＜〇．〇〇１?Ｐ＜〇．〇Ｓ?Ｐ＜０?００１?ｎ．ｓ．?Ｐ＜０．０１??＾?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０????＿１??〇?１０－??ｘ?－ｒ￣?？??１?白一?？？工＾??＂〇－Ｌ＝Ｐ￣ｉ——ｉ——ｉ——，——??Ｎｏｒ．?ＨＧＳＡ?ＬＧＳＡ?ＭＡ?ＥＡ?ＣＣＡ??（ｎ＝４０）?（ｎ＝１６２）?（ｎ＝２７）?（ｎ＝４２）?（ｎ＝２９）?（ｎ＝１６）??图２－７不同组织学类型卵巢癌组织的免疫组织化学评分情况??Ｆｉｇ．?２－７?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ?ＬＧＲ６?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ??以上结果表明，ＬＧＲ６在卵巢上皮癌中高表达，ＬＧＲ６的表达与卵巢上皮癌??的组织类型有关
【参考文献】：
期刊论文
[1]卵巢恶性肿瘤的诊治进展和争议问题[J]. 汪希鹏. 实用肿瘤杂志. 2016(06)
[2]近十年中国妇产科病理学的回顾与进展[J]. 沈丹华. 中华病理学杂志. 2015 (12)
[3]2011年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,曾红梅,邹小农,张思维,赫捷. 中国肿瘤. 2015(01)
[4]中国2010年恶性肿瘤发病与死亡[J]. 陈万青,张思维,曾红梅,郑荣寿,邹小农,赵平,吴良有,李光琳,赫捷. 中国肿瘤. 2014(01)
[5]卵巢癌干细胞及卵巢癌治疗[J]. 于风胜,李艺,崔恒. 中国实用妇科与产科杂志. 2014(01)
[6]对卵巢上皮性癌的定义、亚型与病理诊断的新认识[J]. 郭东辉,郑文新. 中华病理学杂志. 2013 (09)
[7]化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白的表达及其与癌干细胞的相关性[J]. 屈洪波,范原铭,韩明利,罗浩军,谢佳,刘红,刘毫,吴诚义,汤为学. 中国医学科学院学报. 2013(02)
[8]卵巢癌初始治疗现状与挑战[J]. 丰有吉. 中国实用妇科与产科杂志. 2012(03)
[9]卵巢浆液性癌的组织学分级与发病机制研究新进展[J]. 申彦,杨帆,刘劲松. 中华病理学杂志. 2011 (08)
[10]糖蛋白激素LGR6的结构分析及其表达细胞株的建立[J]. 徐立,Axel Methner,Rainer Reinscheid. 南通医学院学报. 2000(01)
本文编号：2968547
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－３?ＬＧＲ６在正常卵巢上皮细胞株及８个卵巢癌细胞株中蛋白的表达??－
ＨＯＳＥｐｉＣ?ａｎｄ?８?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??以上结果提示，高水平的ＬＧＲ６表达有可能与卵巢上皮癌的发病机制有关。??２．３?ＬＧＲ６与卵巢上皮癌不良预后的关系??２．３．１?ＬＧＲ６的表达与卵巢上皮癌的组织学类型相关??为了进一步了解ＬＧＲ６在卵巢上皮癌不同组织学类型中的表达情况，本研??究扩大样本量，选用２９４例卵巢上皮癌和４０例正常卵巢组织的石蜡包埋切片进??行ＬＧＲ６免疫组化检测。以上病人的组织标本都是在医院手术切除的过程中获??得，均经病理证实，且所有患者在手术前均没有接受任何治疗。??不同组织学类型的卵巢上皮癌组织免疫组化染色的结果见图２－５，?ＬＧＲ６蛋??白表达的部位被染成棕色。如图所示，正常卵巢组织的上皮和间质无染色，ＬＧＲ６??在卵巢上皮癌组织中有不同程度的表达。在卵巢上皮癌组织中可以观察到，卵??巢癌细胞染色阳性，间质没有染色，免疫组化染色的定位在细胞浆、细胞核和??细胞膜。??Ｈｉｇｈ?ｇｒａｄｅ?ｓｅｒｏｕｓ?Ｌｏｗ?ｇｒａｄｅ?ｓｅｒｏｕｓ?Ｍｕｃｉｎｏｕｓ?Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｉｄ?Ｃｌｅａｒ?ｃｅｌｌ??ｎａｎｒｎｍｎｒ
Ｆｉｇ．?２－６?Ｔｈｅ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ?ｂｙ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ??ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ??对各种病理组织类型癌组织的评分进行统计学分析，结果见图２－７，可明确??卵巢浆液性腺癌与卵巢子宫内膜样腺癌中ＬＧＲ６表达最高，两者之间无显著性??差异。卵巢低级别浆液性腺癌、粘液腺癌和透明细胞癌表达量低于高级别浆液??腺癌，差别有统计学意义。??１５－｜?Ｐ＜〇．〇〇１?Ｐ＜〇．〇Ｓ?Ｐ＜０?００１?ｎ．ｓ．?Ｐ＜０．０１??＾?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０????＿１??〇?１０－??ｘ?－ｒ￣?？??１?白一?？？工＾??＂〇－Ｌ＝Ｐ￣ｉ——ｉ——ｉ——，——??Ｎｏｒ．?ＨＧＳＡ?ＬＧＳＡ?ＭＡ?ＥＡ?ＣＣＡ??（ｎ＝４０）?（ｎ＝１６２）?（ｎ＝２７）?（ｎ＝４２）?（ｎ＝２９）?（ｎ＝１６）??图２－７不同组织学类型卵巢癌组织的免疫组织化学评分情况??Ｆｉｇ．?２－７?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ?ＬＧＲ６?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ??以上结果表明，ＬＧＲ６在卵巢上皮癌中高表达，ＬＧＲ６的表达与卵巢上皮癌??的组织类型有关
【参考文献】：
期刊论文
[1]卵巢恶性肿瘤的诊治进展和争议问题[J]. 汪希鹏. 实用肿瘤杂志. 2016(06)
[2]近十年中国妇产科病理学的回顾与进展[J]. 沈丹华. 中华病理学杂志. 2015 (12)
[3]2011年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,曾红梅,邹小农,张思维,赫捷. 中国肿瘤. 2015(01)
[4]中国2010年恶性肿瘤发病与死亡[J]. 陈万青,张思维,曾红梅,郑荣寿,邹小农,赵平,吴良有,李光琳,赫捷. 中国肿瘤. 2014(01)
[5]卵巢癌干细胞及卵巢癌治疗[J]. 于风胜,李艺,崔恒. 中国实用妇科与产科杂志. 2014(01)
[6]对卵巢上皮性癌的定义、亚型与病理诊断的新认识[J]. 郭东辉,郑文新. 中华病理学杂志. 2013 (09)
[7]化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白的表达及其与癌干细胞的相关性[J]. 屈洪波,范原铭,韩明利,罗浩军,谢佳,刘红,刘毫,吴诚义,汤为学. 中国医学科学院学报. 2013(02)
[8]卵巢癌初始治疗现状与挑战[J]. 丰有吉. 中国实用妇科与产科杂志. 2012(03)
[9]卵巢浆液性癌的组织学分级与发病机制研究新进展[J]. 申彦,杨帆,刘劲松. 中华病理学杂志. 2011 (08)
[10]糖蛋白激素LGR6的结构分析及其表达细胞株的建立[J]. 徐立,Axel Methner,Rainer Reinscheid. 南通医学院学报. 2000(01)
本文编号：2968547
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