孕酮对HEV感染细胞Ⅰ型IFN信号通路作用机制的研究
发布时间：2021-01-22 11:00
目的:本研究旨在探讨孕酮对戊型肝炎病毒（HEV）感染细胞中Ⅰ型IFN信号通路的机制的影响,为孕妇感染戊型肝炎的临床治疗和预防控制提供理论基础。方法:HEV感染A549细胞后,荧光定量PCR检测HEV。细胞感染模型建立成功后,用不同剂量孕酮（PG）、米非司酮（MF）和干扰素ɑ（IFN-ɑ）单独或联合处理模型细胞,以未加药物处理的模型细胞和未感染病毒A549细胞为对照,采用Western-blotting检测不同组细胞JAK-STAT信号通路中磷酸化蛋白质酪氨酸激酶（Jak1）、磷酸化酪氨酸蛋白（Tyk2）、信号传导转录激活因子1（Stat2）、信号传导转录激活因子（Stat2）磷酸化水平及黏病毒抗性蛋白1（MX1）、蛋白激酶（PKR）、2,5寡腺苷酸合成酶1（OAS1）蛋白表达水平。结果:1.HEV感染A549细胞后,提取细胞内RNA,进行荧光定量PCR,结果显示在溶解温度Tm=80℃处呈现特异的峰值,没有引物二聚体和非特异性产物,经测序结果提示模型建立成功。2.模型组磷酸化Jak1蛋白表达上调（vs空白对照组,P<0.001）;IFN-ɑ干预可引起磷酸化Jak1蛋白表达下调（vs...
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
病毒拮抗I型干扰素信号通路[28]
图 2 HEV 实时荧光定量 PCR 的溶解曲线.7 免疫印迹法检测 A549 细胞 JAK-STAT 通路中各蛋白的表达水平7.1 药物干预观察各孔细胞生长状态，汇合度达到50%~60%接种病毒100μl (1.5×107拷贝/ml)
图 3：戊型肝炎病毒转染 A549 细胞后形态学变化A： HEV 阴性粪便悬液攻毒对照细胞；B：攻毒 4h 后细胞形态；C：感染一天后后细胞形态；D：感染两天后细胞形态；E：感染三天后的细胞形态；F：感染四天后的细胞形态。2 孕酮、米非司酮干预后 JAK-STAT 信号通路中蛋白的表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷公藤内酯醇抑制小鼠肾小球系膜细胞表达IP-10及其机制研究[J]. 施栋梁,宋艳芳,黄丽华,林友文,林青. 免疫学杂志. 2018(04)
[2]戊型肝炎病毒抗体检测的现状、问题与展望[J]. 周潇滢,孟继鸿. 病毒学报. 2018(01)
[3]我国2004-2014年戊型肝炎流行的时空特征及趋势分析[J]. 刘振球,左佳鹭,严琼,方绮雯,张铁军. 中华流行病学杂志. 2017 (10)
[4]围产期产妇感染乙肝病毒对新生儿脐带血免疫因子、淋巴细胞亚群的影响[J]. 庄景娜,杨敬虞. 国际检验医学杂志. 2017(18)
[5]戊型肝炎病毒与血液安全研究进展[J]. 刘丽,李英兰,焦淑贤. 疑难病杂志. 2017(09)
[6]重组人干扰素α1b抗肠道病毒71型的作用机制研究[J]. 李亚男,张玉和,童梅,高向东,刘金毅,徐晨. 中国小儿急救医学. 2017 (08)
[7]猪流行性腹泻病毒nsp1对Ⅰ型干扰素应答的影响[J]. 王晓雪,李红杰,李永涛,高冬生,陈陆,常洪涛,刘红英,王川庆,赵军. 生物工程学报. 2017(08)
[8]H7N9 IAV PB1蛋白抑制Ⅰ型IFN信号通路[J]. 王婉冰,曾艳,汪亮,韩璐,王正祥,陈化兰,李郁,朱启运. 农业生物技术学报. 2017(07)
[9]核酸抗原免疫识别机制的研究进展[J]. 王炜捷,黄昊华,王道禧,王彤敏. 广东医学. 2017(05)
[10]Toll样受体7作为新靶点在过敏性及自身免疫性疾病中的研究进展[J]. 张伟迅,朱俊萍,何秋水. 国际免疫学杂志. 2017 (02)
博士论文
[1]牛Ⅰ型干扰素家族新成员（IFN-ε、IFN-κ、IFN-χ）抗病毒信号转导与表达调控研究[D]. 郭永丽.东北农业大学 2017
[2]基因Ⅰ型戊型肝炎病毒ORF3抑制TNF-α诱导的核因子-κB信号机制研究[D]. 许剑.华中科技大学 2015
[3]mPRα介导孕酮抑制乳腺癌和肺腺癌细胞迁移和侵袭及其机制研究[D]. 谢明萱.中南大学 2012
[4]孕酮与干扰素-τ对体外培养的牛子宫内膜细胞基因组表达谱的影响[D]. 姚佳.四川农业大学 2011
[5]RIG-I样受体在登革病毒诱导的I型干扰素反应中的作用[D]. 秦成峰.中国人民解放军军事医学科学院 2009
硕士论文
[1]牛副流感病毒3型C和V蛋白通过负调控IRF7拮抗Ⅰ型干扰素表达的研究[D]. 刘莹.东北农业大学 2017
[2]青岛地区献血者戊型肝炎流行病学及血清学特征研究[D]. 张龙穆.青岛大学 2017
[3]副黏病毒Ⅴ蛋白拮抗MAVS介导的Ⅰ型干扰素通路的研究[D]. 吴凤云.南京农业大学 2015
[4]孕酮对体外培养牛子宫内膜基质细胞上孕酮受体表达的影响[D]. 甘潇.四川农业大学 2006
本文编号：2993108
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
病毒拮抗I型干扰素信号通路[28]
图 2 HEV 实时荧光定量 PCR 的溶解曲线.7 免疫印迹法检测 A549 细胞 JAK-STAT 通路中各蛋白的表达水平7.1 药物干预观察各孔细胞生长状态，汇合度达到50%~60%接种病毒100μl (1.5×107拷贝/ml)
图 3：戊型肝炎病毒转染 A549 细胞后形态学变化A： HEV 阴性粪便悬液攻毒对照细胞；B：攻毒 4h 后细胞形态；C：感染一天后后细胞形态；D：感染两天后细胞形态；E：感染三天后的细胞形态；F：感染四天后的细胞形态。2 孕酮、米非司酮干预后 JAK-STAT 信号通路中蛋白的表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]雷公藤内酯醇抑制小鼠肾小球系膜细胞表达IP-10及其机制研究[J]. 施栋梁,宋艳芳,黄丽华,林友文,林青. 免疫学杂志. 2018(04)
[2]戊型肝炎病毒抗体检测的现状、问题与展望[J]. 周潇滢,孟继鸿. 病毒学报. 2018(01)
[3]我国2004-2014年戊型肝炎流行的时空特征及趋势分析[J]. 刘振球,左佳鹭,严琼,方绮雯,张铁军. 中华流行病学杂志. 2017 (10)
[4]围产期产妇感染乙肝病毒对新生儿脐带血免疫因子、淋巴细胞亚群的影响[J]. 庄景娜,杨敬虞. 国际检验医学杂志. 2017(18)
[5]戊型肝炎病毒与血液安全研究进展[J]. 刘丽,李英兰,焦淑贤. 疑难病杂志. 2017(09)
[6]重组人干扰素α1b抗肠道病毒71型的作用机制研究[J]. 李亚男,张玉和,童梅,高向东,刘金毅,徐晨. 中国小儿急救医学. 2017 (08)
[7]猪流行性腹泻病毒nsp1对Ⅰ型干扰素应答的影响[J]. 王晓雪,李红杰,李永涛,高冬生,陈陆,常洪涛,刘红英,王川庆,赵军. 生物工程学报. 2017(08)
[8]H7N9 IAV PB1蛋白抑制Ⅰ型IFN信号通路[J]. 王婉冰,曾艳,汪亮,韩璐,王正祥,陈化兰,李郁,朱启运. 农业生物技术学报. 2017(07)
[9]核酸抗原免疫识别机制的研究进展[J]. 王炜捷,黄昊华,王道禧,王彤敏. 广东医学. 2017(05)
[10]Toll样受体7作为新靶点在过敏性及自身免疫性疾病中的研究进展[J]. 张伟迅,朱俊萍,何秋水. 国际免疫学杂志. 2017 (02)
博士论文
[1]牛Ⅰ型干扰素家族新成员（IFN-ε、IFN-κ、IFN-χ）抗病毒信号转导与表达调控研究[D]. 郭永丽.东北农业大学 2017
[2]基因Ⅰ型戊型肝炎病毒ORF3抑制TNF-α诱导的核因子-κB信号机制研究[D]. 许剑.华中科技大学 2015
[3]mPRα介导孕酮抑制乳腺癌和肺腺癌细胞迁移和侵袭及其机制研究[D]. 谢明萱.中南大学 2012
[4]孕酮与干扰素-τ对体外培养的牛子宫内膜细胞基因组表达谱的影响[D]. 姚佳.四川农业大学 2011
[5]RIG-I样受体在登革病毒诱导的I型干扰素反应中的作用[D]. 秦成峰.中国人民解放军军事医学科学院 2009
硕士论文
[1]牛副流感病毒3型C和V蛋白通过负调控IRF7拮抗Ⅰ型干扰素表达的研究[D]. 刘莹.东北农业大学 2017
[2]青岛地区献血者戊型肝炎流行病学及血清学特征研究[D]. 张龙穆.青岛大学 2017
[3]副黏病毒Ⅴ蛋白拮抗MAVS介导的Ⅰ型干扰素通路的研究[D]. 吴凤云.南京农业大学 2015
[4]孕酮对体外培养牛子宫内膜基质细胞上孕酮受体表达的影响[D]. 甘潇.四川农业大学 2006
本文编号：2993108
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