pik3r1通过PI3K-AKT-mTOR通路影响小鼠子宫内膜的蜕膜化进程
发布时间：2021-01-25 14:44
目的:作为成功妊娠的关键环节,胚胎植入的顺利完成需要功能完整的囊胚与处于容受态的子宫内膜协同发挥作用。子宫内膜基质细胞的蜕膜化是胚胎植入的重要组成部分,但其机制尚不清楚。本文旨在探讨Pik3r1在小鼠子宫内膜蜕膜化过程中的作用及相关分子机制。方法:（1）建立小鼠正常妊娠模型,于妊娠第4天子宫角注射PI3K的抑制剂LY294002,妊娠第6天取材,观察抑制PI3K对胚胎植入的影响。（2）建立小鼠正常妊娠模型,利用免疫组织化学和Western Blot检测D1-D7子宫内膜组织中pik3r1的蛋白表达。（3）建立小鼠人工诱导蜕膜化模型,利用Western Blot检测pik3r1的蛋白表达水平。（4）分离原代小鼠子宫内膜基质细胞进行培养,借助免疫荧光检测基质细胞分子标志物波形蛋白的表达,观察原代子宫内膜基质细胞的纯度;利用pik3r1的siRNA转染和PI3K抑制剂LY294002处理细胞,通过Western Blot检测转染前后pik3r1的蛋白水平,观察转染效果,通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡水平,研究pik3r1对子宫内膜基质细胞的影响。（5）分离原代小鼠子宫内膜基质细胞进行培...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
pik3r1在早孕小鼠子宫的表达区域A：免疫组织化学检测pik3r1在小鼠早孕子宫内膜中的表达区域
图 3pik3r1 在早孕小鼠子宫的表达量A：Western blot 检测 Pik3r1 在早孕小鼠子宫内膜的表达量；B：定量分析。P＜0.05Fig. 3Expression of pik3r1 in the uterus of early pregnant mice.A: Western blot detected the expression of Pik3r1 in the endometrium of early pregnantmice.B: Quantitative analysis.P < 0.053.4 pik3r1 在人工诱导蜕膜化小鼠子宫内膜中的表达水平建立人工诱导蜕膜化模型，结果显示诱导侧的子宫角明显大于对照侧，且诱导侧的子宫角重量明显重于对照侧，说明人工诱导蜕膜化模型是成功的（图 4A,4B对人工诱导蜕膜化的两侧子宫进行 pik3r1 的 western blot 检测，结果显示 pik3r在诱导侧子宫角的表达明显少于对照侧（图 4C，4D）。
图 4 在人工诱导蜕膜化子宫 pik3r1 的表达：小鼠人工诱导蜕膜化子宫。B：蜕膜化子宫重量的统计。C：Western blot 检测 pik3r1表达。D：定量分析，P＜0.05。IDC，诱导蜕膜化对照；ID，诱导蜕膜化。Fig. 4 Expression of pik3r1 in vitro induced decidualization.A: Artificially induced decidualization of the uterus in mice. B: Statistics of decidualizeduterine weight.C: Western blot tests the expression of pik3r1.D: Quantitative analysis, P <0.05.IDC, Induced decidualizationcontrol;ID, Induced decidualization..5 小鼠原代子宫内膜基质细胞纯度的鉴定利用免疫荧光检测基质细胞分子标志物 Vimentin 的表达，结果显示视野里胞明显阳性表达绿色荧光，说明分离的细胞纯度超过 95%（图 5）。
本文编号：2999405
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
pik3r1在早孕小鼠子宫的表达区域A：免疫组织化学检测pik3r1在小鼠早孕子宫内膜中的表达区域
图 3pik3r1 在早孕小鼠子宫的表达量A：Western blot 检测 Pik3r1 在早孕小鼠子宫内膜的表达量；B：定量分析。P＜0.05Fig. 3Expression of pik3r1 in the uterus of early pregnant mice.A: Western blot detected the expression of Pik3r1 in the endometrium of early pregnantmice.B: Quantitative analysis.P < 0.053.4 pik3r1 在人工诱导蜕膜化小鼠子宫内膜中的表达水平建立人工诱导蜕膜化模型，结果显示诱导侧的子宫角明显大于对照侧，且诱导侧的子宫角重量明显重于对照侧，说明人工诱导蜕膜化模型是成功的（图 4A,4B对人工诱导蜕膜化的两侧子宫进行 pik3r1 的 western blot 检测，结果显示 pik3r在诱导侧子宫角的表达明显少于对照侧（图 4C，4D）。
图 4 在人工诱导蜕膜化子宫 pik3r1 的表达：小鼠人工诱导蜕膜化子宫。B：蜕膜化子宫重量的统计。C：Western blot 检测 pik3r1表达。D：定量分析，P＜0.05。IDC，诱导蜕膜化对照；ID，诱导蜕膜化。Fig. 4 Expression of pik3r1 in vitro induced decidualization.A: Artificially induced decidualization of the uterus in mice. B: Statistics of decidualizeduterine weight.C: Western blot tests the expression of pik3r1.D: Quantitative analysis, P <0.05.IDC, Induced decidualizationcontrol;ID, Induced decidualization..5 小鼠原代子宫内膜基质细胞纯度的鉴定利用免疫荧光检测基质细胞分子标志物 Vimentin 的表达，结果显示视野里胞明显阳性表达绿色荧光，说明分离的细胞纯度超过 95%（图 5）。
本文编号：2999405
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/2999405.html
最近更新
教材专著
