培养箱内温度和pH值对小鼠体外受精及胚胎发育的影响

发布时间：2017-04-14 10:23

  本文关键词：培养箱内温度和pH值对小鼠体外受精及胚胎发育的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究不同培养箱内温度和p H值对小鼠体外受精及胚胎发育的影响,探索较为优化的体外受精培养箱内温度及p H值,为人类辅助生殖技术提供较规范的实验方法与数据。方法采用小鼠卵母细胞与精子进行体外受精,并将受精后的胚胎置于胚胎培养液中培养,分别将培养箱温度设在36.4℃、36.7℃、37.0℃、37.3℃、37.6℃,观察、计数D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率,应用激光共聚焦显微镜检测胚胎染色体的畸变类型及计算畸变率。分别将培养液p H值设在7.05、7.20、7.35、7.50、7.65,观察、计数D1天受精率、D2天卵裂率、D4天囊胚形成率、D5天囊胚孵出率,应用激光共聚焦显微镜观察胚胎纺锤体的改变情况。结果1培养箱内温度在小鼠配子体外受精及胚胎发育影响方面,受精率在37.0℃时最高,36.4与37.0℃组比较无统计学差异(P0.005),36.4与37.3℃组比较(P0.005),无统计学差异,36.4与37.6℃组比较(P0.005),有统计学差异,说明在36.4-37.3℃之间较适合配子受精。卵裂率在36.7℃时最高,36.4与37.0℃组比较无统计学差异(P0.005),36.4与37.3℃组比较(P0.005),无统计学差异,36.4与37.6℃组比较(P0.005),有统计学差异,说明在36.4-37.3℃之间时较适合受精卵卵裂。囊胚形成率在37.0℃时最高,36.4与37℃组比较有统计学差异(P0.005),36.7与37.0℃组比较无统计学差异(P0.005),36.7与37.3℃组比较有统计学差异(P0.005),说明在36.7-37.0℃之间较适合囊胚形成。囊胚孵出率在37.0℃时最高,36.4与37.0℃组比较有统计学差异(P0.005),36.7与37.0℃组比较无统计学差异(P0.005),36.7与37.3℃组比较有统计学差异(P0.005),说明在36.7-37.0℃之间较适合囊胚孵出。2培养箱内培养液p H值在小鼠体外受精及胚胎发育影响方面,配子受精率在p H7.50最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P0.005),p H7.20与7.65组比较无统计学差异(P0.005),说明在7.20-7.65之间较适合配子受精。卵裂率在p H7.35最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P0.005),p H7.20与7.50组比较无统计学差异(P0.005),p H7.5与7.65组比较有统计学差异(P0.005),说明在7.20-7.50之间较适合受精卵卵裂。囊胚形成率在p H7.50最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P0.005),p H7.20与7.50组比较无统计学差异(P0.005),p H7.50与7.65组比较有统计学差异(P0.005),说明在7.20-7.50之间较适合囊胚形成。囊胚孵出率在p H7.35最高,p H7.05与7.20组比较有统计学差异(P0.005),p H7.20与7.50组比较无统计学差异(P0.005),p H7.50与7.65组比较有统计学差异(P0.005),说明在7.20-7.50之间较适合囊胚孵出。结论1培养箱内温度36.4℃-37.3℃之间较适合配子受精、受精卵卵裂。36.7℃-37.0℃之间较适合囊胚形成、囊胚孵出。2培养箱内培养液p H值7.20-7.65之间较适合配子受精,7.20-7.50之间较适合受精卵卵裂、囊胚形成及囊胚孵出。
【关键词】：体外受精 胚胎发育 胚胎培养 培养系统 温度 pH值
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 实验研究13-41
• 1.1 材料与方法13-21
• 1.1.1 实验材料13-15
• 1.1.2 实验方法15-21
• 1.1.3 数据分析21
• 1.2 结果21-27
• 1.2.1 培养箱温度对小鼠体外受精及胚胎发育的影响21-24
• 1.2.2 培养液pH值点对小鼠体外受精及胚胎发育的影响24-27
• 1.3 讨论27-37
• 1.3.1 IVF-ET的意义27
• 1.3.2 实验动物的选择27-28
• 1.3.3 体外受精及胚胎培养的影响因素28-29
• 1.3.4 培养箱内温度及pH值对IVF-ET的意义29-30
• 1.3.5 实验培养箱内温度范围的选择及温度点的设定30-31
• 1.3.6 实验培养液pH值范围的选择及pH点的设定31-32
• 1.3.7 受精卵纺锤体32
• 1.3.8 激光共聚焦显微镜技术32-34
• 1.3.9 实验中的相关技术34-35
• 1.3.10 实验培养箱温度及培养液pH值对纺锤体的影响35
• 1.3.11 体外受精技术的培养箱温度及培养液pH值建议35-37
• 1.4 结论37
• 参考文献37-41
• 第2章 综述 体外受精及胚胎发育培养相关因素研究进展41-50
• 2.1 研究背景41
• 2.2 体外受精及胚胎发育的影响因素41-42
• 2.3 培养相关因素对体外受精及胚胎培养的影响42-46
• 2.3.1 培养箱对体外受精及胚胎培养的影响42-43
• 2.3.2 培养液对体外受精及胚胎培养的影响43
• 2.3.3 耗材对体外受精及胚胎发育的影响43-44
• 2.3.4 气体对体外受精及胚胎发育的影响44-45
• 2.3.5 温度对体外受精及胚胎培养的影响45
• 2.3.6 湿度对体外受精及胚胎培养的影响45-46
• 2.3.7 pH值对体外受精及胚胎发育的影响46
• 2.4 总结46-47
• 参考文献47-50
• 结论50-51
• 附录51-53
• 致谢53-54
• 导师简介54-56
• 作者简介56-57
• 学位论文数据集57

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本文编号：305808