PI3K/AKT信号通路与人上皮性卵巢癌耐药性的相关性研究

发布时间：2021-05-07 14:06

　　目的：从基因和蛋白的水平探讨PI3K/Akt信号通路与人上皮性卵巢癌顺铂耐药性的关系及其耐药性可能的发生机制。为寻找逆转卵巢癌化疗耐药的有效治疗手段提供一定的实验依据。方法：1、人上皮性卵巢癌细胞SKOV3细胞培养于含10%FBS、含100U/ml双抗的RPMI1640培养液，耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞培养于含0.375ug/mlDDP、10%FBS的RPMI1640（含100U/ml双抗）培养液，两种细胞均置于37℃，5%CO2恒温培养箱中培养。对SKOV3及SKOV3/DDP细胞进行细胞计数，绘制两种细胞的细胞生长曲线。确定SKOV3及SKOV3/DDP细胞的对数生长期为培养后的3-5天，取对数生长期细胞用于实验。2、四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测SKOV3与SKOV3/DDP细胞的生长情况。3、实时定量PCR（Quantative Real-time PCR）法（简称Q-PCR法）检测SKOV3与SKOV3/DDP细胞中AKT与PI3K基因的含量。4、蛋白免疫印迹（Western-blotting）法检测SKOV3与SKOV3/DDP细胞中AKT、p-AKT和... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 实验对象与方法
    2.1 实验对象
        2.1.1 细胞株
        2.1.2 相关试剂及耗材
        2.1.3 相关仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 试剂配制
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 绘制 SKOV3 与 SKOV3/DDP 细胞生长曲线
        2.2.4 MTT 法检测 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞生长
        2.2.5 Quantative Real-time PCR 法检测 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中PI3K 与 Akt 基因的含量
        2.2.6 Western blot 检测 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 PI3K,Akt 及 p-Akt 蛋白的表达水平
        2.2.7 统计分析
第3章 结果
    3.1 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞生长情况
        3.1.1 SKOV3 与 SKOV3/DDP 细胞生长曲线
        3.1.2. SKOV3 与 SKOV3/DDP 细胞生长情况
    3.2 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 PI3K 与 Akt 基因的含量
        3.2.1 SKOV3 与 SKOV3/DDP 细胞的总 RNA 浓度
        3.2.2 分析和观察 PI3K 与 Akt 基因 PCR 扩增曲线
        3.2.3 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 PI3K 基因的含量
        3.2.4 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 Akt 基因的含量
    3.3 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 PI3K,Akt 与 p-Akt 蛋白的表达水平
        3.3.1 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 PI3K 蛋白的表达水平
        3.3.2 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞中 Akt 与 p-Akt 蛋白的表达水平
第4章 讨论
    4.1 SKOV3 与 SKOV3/DDP 细胞的生长特性
    4.2 PI3K/Akt 信号通路与上皮性卵巢癌
    4.3 PI3K/Akt 信号通路与卵巢癌顺铂耐药性
        4.3.1 PI3K 与卵巢癌顺铂耐药性
        4.3.2 Akt，p-Akt 与卵巢癌顺铂耐药性
    4.4 PI3K/Akt 信号通路与卵巢癌顺铂耐药机制
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成就
综述
    参考文献



本文编号：3173526