羊水直接扩增快速诊断骨骼发育异常类单基因遗传病

发布时间：2021-05-08 05:37

　　目的:以最原始的羊水样本为起始模板直接进行PCR扩增,建立一种快速、简便的骨骼发育异常单基因遗传病的产前基因诊断方法。方法:对2013年4月—2018年1月于南京医科大学第一附属医院就诊的超声提示骨骼发育异常的38例胎儿行羊膜腔穿刺并进行软骨发育不全、软骨发育低下、致死性发育不全及成骨发育不全4种单基因遗传病诊断,抽取孕妇羊水后不经过胎儿细胞培养,也不经过羊水中胎儿细胞DNA的提取,加入中性盐等物质作为PCR缓冲液,控制缓冲液pH值为8～10,扩增FGFR3及COL1A2基因上的靶标片段,直接在反应体系中加入8μL羊水进行PCR扩增测序,行产前基因诊断;考察扩增体系中的成分及含量对羊水直接扩增方法的影响。结果:38例胎儿样本中检出单基因遗传病致死性发育不全3例,分别为Ⅰ型1例,Ⅱ型2例;软骨发育不全3例,软骨发育低下1例。中性盐缓冲液、0.20 U/μL Promega Taq DNA聚合酶、每条引物1.2 pmol/μL用于羊水直接扩增效率最佳。结论:本方法省略了羊水细胞培养和羊水中胎儿DNA核酸提取这两步繁琐步骤,无需浓缩羊水即可直接扩增,缩短了诊断时间,节约了诊断成本,可以减少P... 

【文章来源】：南京医科大学学报(自然科学版). 2020,40(03)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 羊水标本采集
        1.2.2 骨发育异常单基因遗传病检测
2 结果
    2.1 羊水直接扩增实验
    2.2 骨发育异常单基因遗传病检测结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]基于FOK1酶体系的PCR防污染法及在产前诊断中的应用[J]. 吴江平,黄欢,瞿琳,姚维银.  南京医科大学学报(自然科学版). 2019(09)
[2]假性软骨发育不全的临床影像学分析[J]. 顾海斌,唐文伟.  南京医科大学学报(自然科学版). 2010(09)



本文编号：3174776