二甲双胍对人子宫内膜癌细胞增殖作用的干预研究

发布时间：2017-04-23 05:05

  本文关键词：二甲双胍对人子宫内膜癌细胞增殖作用的干预研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过观察二甲双胍(Metformin)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞株中REDD1蛋白表达的影响,及可能存在的REDD1/mTOR信号通路(独立于AMPK信号通路)在其中的作用,探讨REDD1对人子宫内膜癌细胞增殖影响。方法:取人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞株复苏,于含5%CO2、37℃培养箱中培养,培养液为含有10%FBS的RPMI 1640培养液,细胞达汇片后按5×105细胞/瓶接种于25 cm2培养瓶,每2天换一次细胞培养液。Ishikawa细胞体积达到90%左右时,改用不含血清的RPMI 1640培养液培养12h,再进行以下药物干预:二甲双胍1 mmol/l、5 mmol/l、10 mmol/l干预48小时,以等体积无血清的RPMI 1640培养液为对照组。干预后取各干预组细胞,MTT法测各组细胞增殖率,提取各组RNA及总蛋白,分别用RT-PCR及Western-blot检测各组REDD1、mTOR蛋白及基因的表达水平。结果:1、二甲双胍抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖,随着二甲双胍浓度的增加,细胞增殖的抑制率也随之增加,在10 mmol/L浓度时二甲双胍对细胞增殖的抑制作用最强(P0.05)。2、二甲双胍能上调REDD1的表达及抑制mTOR的表达。1 mmol/l、5 mmol/l、10 mmol/l REDD1 mRNA的表达是对照组的1.09倍、1.15倍、1.29倍(P0.05),差异有统计学意义。mTOR mRNA的表达是对照组的0.90倍、0.38倍、0.24倍(P0.05),差异有统计学意义。3、二甲双胍能增加REDD1/mTOR信号通路中REDD1蛋白的表达,并抑制其下游mTOR蛋白的表达,REDD1蛋白的表达分别是对照组的4.29倍、4.45倍、8.66倍,mTOR蛋白的表达分别是对照组的0.70倍、0.51倍、0.20倍,均在10 mmol/l的浓度作用最显著,差异有统计学意义(P0.05)。结论:二甲双胍能明显上调REDD1的表达,REDD1/m TOR信号通路可能是调节Ishikawa细胞株增殖的关键信号通路之一。二甲双胍通过增加REDD1/mTOR信号通路中REDD1的表达及抑制mTOR的表达来发挥其对Ishikawa细胞株的抑制作用。提示REDD1可能在治疗人子宫内膜癌过程中发挥重要作用,且REDD1/mTOR信号通路参与了这一过程。
【关键词】：二甲双胍 人子宫内膜癌 细胞增殖 REDD1/mTOR信号通路
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 英文缩写及全文和中文对照表9-10
• 第1章 引言10-14
• 第2章 材料与方法14-26
• 2.1 主要材料及试剂14-16
• 2.1.1 实验细胞14
• 2.1.2 主要试剂、产地14-15
• 2.1.3 主要仪器设备和产地15-16
• 2.2 实验方法16-26
• 2.2.1 细胞培养用品及液体的配制16-18
• 2.2.2 细胞培养方法18-19
• 2.2.3 分组及药物干预19
• 2.2.4 MTT试剂检测细胞增殖19-20
• 2.2.5 RT-PCR检测m RNA表达20-23
• 2.2.6 Western blot检测蛋白表达23-25
• 2.2.7 数据处理25-26
• 第3章 结果26-29
• 3.1 二甲双胍对人子宫内膜癌ISHIKAWA细胞增殖的影响：26
• 3.2 二甲双胍对人子宫内膜癌ISHIKAWA细胞REDD1/MTOR信号通路的影响26-29
• 3.2.1 二甲双胍对人子宫内膜癌Ishikawa细胞REDD1/m TOR信号通路中相关蛋白表达的影响26-28
• 3.2.2 二甲双胍对人子宫内膜癌Ishikawa细胞REDD1/m TOR信号通路中相关基因表达的影响28-29
• 第4章 讨论29-33
• 第5章 结论与展望33-34
• 5.1 结论33
• 5.2 展望33-34
• 致谢34-35
• 参考文献35-39
• 综述39-50
• 参考文献45-50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 宋红林;梁少凤;;不同浓度二甲双胍对子宫内膜癌细胞增殖与凋亡的影响[J];中国临床新医学;2013年08期

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  本文关键词：二甲双胍对人子宫内膜癌细胞增殖作用的干预研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：321850