机械刺激在体小鼠早衰卵巢激活休眠卵泡的实验研究

发布时间：2021-06-12 00:46

　　目的:卵巢早衰是当今女性不孕的主要原因之一。由于原始卵泡储备较少且成熟障碍,导致自然受孕率极低,因此如何激活残余的原始卵泡成为治疗的关键。2013年日本学者通过片段化卵巢皮质体外激活剂共培养激活休眠的原始卵泡获得一例妊娠,2016年我国学者仅通过片段化皮质移植也成功获得妊娠。由于体外激活剂安全性未知,且卵巢皮质移植后没有快速的血管吻合和血供建立,早期处于一种缺血缺氧状态,引起大量卵泡丢失等问题,该项技术仍处于探索阶段。本实验通过在体刺激早衰小鼠卵巢,检测处理前后各组卵泡数目及前后激素变化,探究卵巢早衰患者辅助生殖技术的新方法及其运用的可行性。材料与方法:本研究采取环磷酰胺构建早衰小鼠模型,将全部小鼠分为6组,空白对照组、模型对照组、实验组A、实验组B、老年对照组、老年实验组。取眶后静脉血备用后实验组针刺双侧卵巢各25次,深度约1mm,对照组仅需探查见卵巢即可关腹。除实验组B于术后第10d促排卵,第13d处死外,其余各组于术后第5d给予促排卵,第8d处死。取双侧卵巢组织及静脉血,检测处理前后激素水平变化及各组小鼠卵巢组织HE染色观察各级卵泡数目。剩余造模小鼠于干预后1h取卵巢组织行免疫组... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组小鼠卵巢组织HE染色，200注：A：空白对照组；B：造模对照组；C：实验组A；D：实验组B；E：老年对照组；F：★

中国医科大学研究生学位论文14各组小鼠卵泡计数：与空白对照相比，模型对照组、老年对照组原始卵泡、生长卵泡数目下降（P<0.05），闭锁卵泡数目增多差别均有统计学意义（P<0.05）；与模型对照组相比，实验组A、实验组B及老年实验组生长卵泡数目增多，闭锁卵泡数目减少，差异均有统计学意义（P<0.05），原始卵泡之间差异无统计学意义（P>0.05）。与老年实验组相比，实验组A、实验组B生长卵泡数目增多，差异有统计学意义（P<0.05），闭锁卵泡及原始卵泡差异无统计学意义（P>0.05），实验组A、实验组B之间相互比较，各级卵泡数目均无统计学意义（P>0.05）。见表5、图3。表5各组小鼠卵泡计数（x±s）组别n原始卵泡生长卵泡闭锁卵泡空白对照组622.60±1.6746.40±7.406.40±1.14模型对照组617.20±1.92△27.00±4.69△10.20±0.84△实验组A1217.40±1.1440.20±4.14*8.00±1.58*实验组B1216.60±1.5843.20±4.82*7.20±1.60*老年对照组616.40±1.14△23.40±2.88△9.60±1.82△老年实验组615.80±0.8433.40±1.14*7.00±1.58*注：*与模型对照组和老年对照组相比，P<0.05；△与空白对照组相比，P<0.05。图3各组小鼠卵泡计数比较3.4干预后YAP蛋白表达对干预1h后的卵巢内YAP蛋白进行免疫组化检测，结果显示干预1h后卵泡内颗粒细胞YAP蛋白细胞核内增加，刺激后1h卵巢YAP蛋白较未处理组增加，差异有统计学意义（P<0.05）。结果如图4、图5。

中国医科大学研究生学位论文15图4免疫组化显示YAP蛋白定位变化400图5两组YAP蛋白定量注：A：未干预组；B：干预组，箭头指向YAP蛋白定位颗粒细胞核内


本文编号：3225603