NOX1蛋白对卵巢癌细胞EMT影响的研究

发布时间：2021-06-13 06:32

　　目的:本课题旨在探讨NOX1在卵巢癌系A2780和SK-OV-3细胞中对细胞上皮细胞-间充质细胞转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）过程的调控作用,为卵巢癌的筛查、诊断及临床治疗提供新的思路。方法:1利用细胞瞬时转染技术在卵巢癌细胞中过表达NOX1蛋白;2利用shRNA基因沉默技术和慢病感染技术构建稳定敲低NOX1基因的卵巢癌细胞株;3利用平板克隆形成实验检测NOX1基因敲低对细胞克隆形成能力的影响;4利用MTT法检测NOX1基因敲低对细胞增殖能力的影响;5利用划痕实验检测NOX1基因敲低对细胞迁移能力的影响;6利用Transwell实验检测NOX1基因敲低对细胞迁移能力、侵袭能力的影响;7利用蛋白免疫印迹实验检测过表达NOX1蛋白和敲低NOX1基因对细胞EMT相关分子标记物表达水平的影响。结果:1蛋白免疫印迹实验检测过表达NOX1蛋白对细胞EMT相关分子标记物表达水平的影响结果显示,与对照细胞株相比,在A2780细胞和SK-OV-3细胞中过表达NOX1蛋白后,将会降低细胞中E-cadherin蛋白表达水平,同时提高N-cadherin和V... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Westernblot检测NOX1过表达对A2780细胞EMT相关标记物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin表达水平的影响

图 2 western blot 检测 NOX1 过表达对 SK-OV-3 细胞 EMT 相关标记物E-cadherin、N-cadherin 及 Vimentin 表达水平的影响Figure 2 The protein expression of EMT-related markers inNOX1-overexpressing SK-OV-3 cellsVector：瞬时转染对照质粒 pcDNA3.1-Vector；NOX1：瞬时转染 NOX1 过表达质粒 pcDNA3.1-NOX1；*：p<0.05；**：p<0.01；2 稳定敲低 NOX1 基因卵巢癌细胞株的构建为了进一步研究 NOX1 对卵巢细胞 EMT 的影响，本研究通过慢病毒感染构建稳定细胞株的方法，分别构建了稳定敲低 NOX1 基因

2780 细胞和 SK-OV-3 细胞，以及相应的对照细胞株，rn blot 法检测 NOX1 敲低效率。结果显示，与对照细胞株0 细胞感染慢病毒 shNOX1 1#和 shNOX1 2#后，都成功1 基因的表达水平；与对照细胞株相比，SK-OV-3 细胞感NOX1 1#后，也成功敲低了 NOX1 基因的表达水平（图 续实验中，所用 NOX1 敲低细胞株都为 shNOX1 1#慢病

【参考文献】：
期刊论文
[1]Relationship between expression of NADPH oxidase 2 and invasion and prognosis of human gastric cancer[J]. Peng Wang,Qiao Shi,Wen-Hong Deng,Jia Yu,Teng Zuo,Fang-Chao Mei,Wei-Xing Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(20)



本文编号：3227196