Chemerin/CMKLR1在肥胖女性颗粒细胞氧化应激和凋亡中的作用及机制研究

发布时间：2021-06-23 06:04

　　第一部分超重或肥胖患者卵泡液和颗粒细胞内氧化应激、凋亡以及Chemerin/CMKLR1分子水平的检测目的:通过收集接受IVF/ICSI的超重或肥胖女性（超重组）以及BMI在正常范围（对照组）的卵泡液和颗粒细胞检测两组氧化应激、凋亡以及chemerin/CMKLR1分子水平的变化。方法:采用流式细胞术的方法检测超重组和对照组颗粒细胞内活性氧分子（ROS）的水平,RT-PCR检测两组颗粒细胞中抗氧化酶SOD1、SOD2、CAT和Gpx的转录水平;RT-PCR和Western Blot检测两组颗粒细胞的凋亡水平;ELISA检测两组卵泡液的chemerin含量,同时RT-PCR和Western Blot检测两组颗粒细胞chemerin及其受体CMKLR1的表达差异。结果:（1）与对照组相比,超重组的女性颗粒细胞中ROS水平升高,SOD2转录水平明显下调,Gpx转录水平明显上升;（2）与对照组相比,超重组的女性颗粒细胞中促凋亡因子Bax/抗凋亡因子Bcl2的m RNA比例明显上升,活化的caspase-3蛋白水平明显上升;（3）与对照组相比,超重组的女性卵泡液中chemerin水平明显升高,同... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

流式细胞术检测超重组和对照组颗粒细胞ROS水平

超重组和对照组颗粒细胞凋亡水平的比较我们通过RT-PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl2的mRNA水平，通过Wester凋亡执行蛋白活化的 caspase-3 蛋白水平比较超重组和对照组颗粒细胞的凋结果发现超重组女性颗粒细胞中促凋亡基因 Bax 的转录水平较对照组明显上超重组抗凋亡基因 Bcl2 表达没有明显下降，但 Bax/Bcl2 mRNA 的比值明显升超重组女性颗粒细胞的线粒体凋亡通路 Bax/Bcl2 激活（图 3）。同时实验结化的 caspase-3 蛋白水平明显升高（图 4）。图 2 RT-PCR 检测超重组和对照组颗粒细胞抗氧化酶水平ABCD 图分别为对照组和超重组颗粒细胞 SOD1、SOD2、CAT 和 Gpx mRN相对表达量，其中超重组 n=15，对照组 n=12，B、D 图中*表示 P＜0.0

图 3 RT-PCR 检测超重组和对照组颗粒细胞凋亡相关蛋白转录组水平从左到右分别为对照组和超重组颗粒细胞 Bax、Bcl2 和 Bax/Bcl2 的 mRNA 的相对表达量，其中超重组 n=15，对照组 n=12， **表示 P＜0.01。图 4 Western Blot 检测超重组和对照组颗粒细胞活化的 caspase-3 水平


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