E-钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究

发布时间：2017-04-27 14:06

  本文关键词：E-钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:子宫肌瘤是妇女在生育年龄最常见的肿瘤,其发生率约为20~30%。虽然子宫肌瘤是良性肿瘤,但是它可以导致女性月经出血过多、慢性盆腔痛、反复流产、不孕等。子宫肌瘤的确切发病机制到目前仍不清楚。有研究表明子宫肌瘤的发生和发展与一些肿瘤抑制基因的异常表达相关,例如:T-cadherin、p53、KLF11、DLEC1和KRT19等。肿瘤抑制基因的失活或者功能缺失可能是形成子宫肌瘤的原因之一。E-钙粘蛋白是一个重要的肿瘤抑制基因,属于细胞表面糖蛋白家族中的一员,它可以维持同质细胞间的粘附和保持组织结构的完整性。大量研究表明,E-钙粘蛋白的异常表达与许多上皮性肿瘤的侵袭和转移有关,包括子宫内膜癌、子宫颈癌、卵巢癌和肉瘤等。另外,E-钙粘蛋白的异常表达在一些良性侵袭性疾病的发生和发展中也起着重要作用。如:E-钙粘蛋白表达的缺失是子宫内膜异位症中异位内膜转移的先决条件。有关E-钙粘蛋白与子宫肌瘤的研究还少有报道,Matsuzaki等发现患有子宫肌瘤的不孕妇女的分泌中期内膜E-钙粘蛋白表达明显升高。E-钙粘蛋白的异常表达与E-钙粘蛋白基因(CDH1)基因突变、等位基因的缺失以及基因启动子区甲基化有关。积累的研究表明CDH1基因启动子区甲基化是导致其在肿瘤中转录失活的重要分子机制。甲基化对启动子区的活性有明显的降低作用,进而可以导致E-钙粘蛋白表达下调甚至失活,从而引起肿瘤的发生、侵袭和转移。本研究拟在探讨CDH1基因启动子区甲基化与子宫肌瘤发病的关系,目的在于从表观遗传学上更为深入地探究子宫肌瘤的发病机制,也为临床上治疗该疾病提供新的靶点。方法:1标本采集:病例组:取自2014.1月—2014.8月在河北医科大学第四医院妇科因子宫肌瘤就诊并接受手术的患者102例,患者的年龄段为31~58岁(平均年龄47.67±4.51岁)。术后经病理证实均为子宫肌瘤,无恶变。对照组:收集在河北医科大学第四医院同期因宫颈上皮内瘤变III级(CINIII级)就诊并接受手术治疗的患者50例,其年龄段为26~55岁(平均年龄44.90±8.49岁)。均经病理证实是正常子宫内膜组织。以上标本收集均在经过患者知情同意后进行。2实验步骤2.1标本处理:病例组与对照组标本离体后,即刻浸泡在事先准备好的RNA later液中,并马上转移到4℃冰箱中过夜,然后放在-20℃冰箱中贮存以备用。2.2 DNA提取:将病例组与对照组组织标本各取出50-100mg,分别进行组织研磨,提取组织DNA。2.3 E-钙粘蛋白基因启动子区甲基化状态的检测:利用甲基化特异性PCR技术(MSP)检测所有标本的组织DNA中的甲基化情况,分别计算两组的甲基化率。2.4 E-钙粘蛋白表达水平的检测:应用流式细胞术分别检测甲基化阳性和甲基化阴性的组织标本中E-钙粘蛋白的表达情况。2.5数据分析:实验数据使用SPSS软件进行分析。结果:1比较病例组与对照组中CDH1基因启动子区的甲基化情况在子宫肌瘤的内膜组织和正常子宫的内膜组织中,CDH1基因的甲基化率分别是33.3%(34/102)和8%(4/50)。与正常内膜组织相比,子宫肌瘤的内膜组织中CDH1基因甲基化率明显升高(P=0.001)。2比较增殖期内膜和分泌期内膜中CDH1基因启动子区的甲基化情况在病例组中,增殖期和分泌期内膜中CDH1基因的甲基化率分别为36.36%(12/33)和32.35%(23/68),两者间甲基化率无明显差异(P=0.357);在对照组中,增殖期和分泌期内膜中CDH1基因的的甲基化率分别为6.67%1(1/15)和9.38%(3/32),两者间甲基化率也无明显差异(P=0.272)。3比较CDH1基因甲基化阳性组织和其阴性组织中的E-钙粘蛋白表达量在CDH1基因甲基化阳性的组织中,E-钙粘蛋白平均表达量为61.74±17.53;在其阴性的组织中,E-钙粘蛋白平均表达量为80.13±40.06。经秩和检验统计,E-钙粘蛋白在CDH1基因甲基化阳性组织中的平均表达量明显低于其在甲基化阴性组织中的平均表达量(Z=-2.045,P=0.041)。结论:在子宫肌瘤患者的子宫内膜组织中,CDH1基因启动子区存在异常甲基化状态,且CDH1基因启动子区的异常甲基化可能与E-钙粘蛋白表达丢失相关。结果提示CDH1基因可能在子宫肌瘤的发病中起一定的作用。
【关键词】：E-钙粘蛋白基因 甲基化 子宫肌瘤 发病机制 MSP
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文缩写10-11
• 前言11-12
• 材料与方法12-18
• 结果18-20
• 附图20-22
• 附表22-24
• 讨论24-27
• 结论27-28
• 参考文献28-32
• 综述 子宫肌瘤及其相关遗传32-48
• 参考文献41-48
• 致谢48-49
• 个人简历49

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 田玉玲;;B超和CT在诊断子宫肌瘤中的作用对比[J];中外医学研究;2012年31期

2 李臣;董坚;陈明清;李文亮;任俊宇;陈圣雄;李秋恬;耿计伟;缪延栋;杨静;;上皮钙黏素1基因启动子甲基化对结肠癌上皮钙黏素和β-连接素表达的影响[J];中华胃肠外科杂志;2011年07期

3 秦保锋,张婷婷;子宫肌瘤发病相关因素研究进展[J];现代诊断与治疗;2005年04期

4 郭昕,佟丽波,杜佳秋;细胞调亡相关基因bcl-2和bax在子宫肌瘤中表达的意义[J];黑龙江医药科学;2004年04期

5 柳英兰,赵怡璇,李守柔;子宫肌瘤的分子遗传学研究进展[J];国外医学.妇幼保健分册;2003年06期

6 耿力,候纬敏,顾方颖,李美芝,陆爱丽;子宫肌瘤中抑癌基因p53和Rb的表达[J];北京医科大学学报;1997年03期

  本文关键词：E-钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：330739