超顺磁性氧化铁-短发夹RNA双功能分子探针体外转染卵巢癌细胞的最佳浓度

发布时间：2021-08-24 01:38

　　目的:采用不同质量浓度的超顺磁性氧化铁-短发夹RNA（superparamagnetic iron oxide-short hairpin RNA,SPIO-ShRNA）分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞,观察细胞形态,检测细胞的生物学行为,寻找最佳的转染浓度。方法:将铁浓度分别为5、15、30、45、75、100 mg/L的探针转染SKOV3细胞后,采用荧光倒置显微镜观察探针进入细胞情况,普鲁士蓝染色及透射电镜观察细胞形态及细胞内铁颗粒,原子吸收光谱仪法测定细胞内铁含量,cell counting kit-8（CCK-8）检测细胞活性,流式细胞术观察细胞凋亡,Western blot检测细胞内表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）蛋白的表达,磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）检测细胞内信号强度变化。结果:在5³0 mg/L铁浓度范围内,细胞摄取量随探针铁质量浓度增加而增大,当探针铁浓度为45 mg/L时,进入细胞达到饱和,标记率接近100%;细胞活性随探针质量浓度的增加... 

【文章来源】：北京大学学报(医学版). 2015,47(05)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1主要实验材料及仪器
    1.2探针转染卵巢癌细胞
    1.3荧光倒置显微镜观察转染细胞
    1.4普鲁士蓝染色
    1.5细胞内铁含量的测定
    1.6透射电镜观察细胞内铁颗粒及细胞形态
    1.7细胞活性的检测
    1.8细胞凋亡的检测
    1. 9 EGFR蛋白表达检测
    1. 10体外MRI扫描
    1. 11统计学分析
2结果
    2. 1荧光倒置显微镜观察结果
    2. 2普鲁士蓝染色结果
    2. 3细胞内含铁量测定结果
    2. 4透射电镜观察结果
    2. 5细胞活性检测结果
    2. 6细胞凋亡检测结果
    2. 7 EGFR蛋白表达检测结果
    2. 8 MRI扫描结果
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]卵巢癌特异性MR分子探针的制备[J]. 文曦琳,李易,葛晓东,李妹玲,文明,李少林.  基础医学与临床. 2014(11)
[2]超顺磁性氧化铁（SPIO）与多聚赖氨酸（PLL）纳米粒的制备、结构验证及其空间结构表征[J]. 李易,文曦琳,孙红武,葛晓东,李妹玲,文明.  复旦学报(医学版). 2014(03)
[3]SPIO-PLL-pshRNA分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞及MR成像研究[J]. 文曦琳,李易,葛晓东,李妹玲,邓小林,吴晓凤,文明.  重庆医科大学学报. 2014(04)
[4]不同质量浓度磁性c-erbB-2反义探针对SK-Br-3肿瘤细胞株形态及表达的影响[J]. 刘海燕,温志鹏,文明,贺海容,谭书德,李少林.  中国医学科学院学报. 2013(01)



本文编号：3359013