雌激素及雌激素诱导产生的VEGF、bFGF对子宫内膜癌细胞PI3K/AKT通路影响的研究

发布时间：2021-08-31 06:56

　　背景子宫内膜癌（endometrial cancer, EC）是女性生殖道常见的恶性肿瘤之一，近年来发病率呈上升趋势,但其确切病因尚未明确。多数学者认为与内源性和外源性的雌激素长期刺激子宫内膜并缺乏孕激素拮抗密切相关。但雌激素如何调节细胞增殖的作用机制尚不清楚。本课题研究表明1×10-6mol/L雌激素作用于子宫内膜癌细胞30分钟后，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（Basic Fibroblast Growth Factor，bFGF）mRNA及蛋白的表达均明显增高。而新血管的形成和细胞对缺氧环境的适应是肿瘤发生发展的关键。同时肿瘤的形成涉及多条信号转导通路的调节，磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（Phosphatidy linositol-3kinase（P13K）-serine/threonine protein kinase B,PKBor AKT）通路是膜受体信号向细胞内转导的重要途径，调节着机体细胞的生长、分化、分裂、死亡以及细胞间功能同步化等多种过程。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B能被多种... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：99 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
主要缩略词
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 雌激素诱导子宫内膜癌细胞产生的 VEGF、bFGF 对 PI3K/AKT 通路的影响
    1 材料和方法
        1.1 材料
            1.1.1 细胞来源
            1.1.2 主要试剂
            1.1.3 主要仪器设备：
            1.1.4 主要试剂及配制：
        1.2 实验方法
            1.2.1 细胞培养与传代
            1.2.2 细胞分组及药物处理
            1.2.3 Real‐time PCR 检测 AKT、PI3K、VEGF、bFGF 基因 mRNA 的表达
            1.2.4 Western Blot 检测 VEGF、bFGF、AKT、PI3K 蛋白的表达
            1.2.5 统计学处理：
    2.实验结果
        2.1 western blot 测定不同药物浓度作用下 AKT 蛋白的表达
            2.1.1 雌激素作用的浓度
            2.1.2 雌激素作用不同时间
            2.1.3 LY294002 作用不同浓度
            2.1.4 LY294002 作用不同时间
            2.1.5 RNA 质检
            2.1.6 E2 及 LY294002 作用于子宫内膜癌细胞对 AKT、PI3K、VEGF、bFGF 的影响
        2.2
            2.2.1 Bibf1120 的作用时间
            2.2.2 Bibf1120 作用于子宫内膜癌细胞对 AKT、PI3K、VEGF 的影响
        2.3
            2.3.1 Ponatinib 的作用时间
            2.3.2 E2 及 Ponatinib 作用于子宫内膜癌细胞对 AKT、PI3K、bFGF 的影响
    3 讨论
    4 结论
第二章 子宫内膜癌细胞在雌激素及 LY294002、Bibf1120 及 Ponatinib 作用下其生物学功能的影响体外研究
    1
        1.1 材料
            1.1.1 细胞来源
            1.1.2 主要试剂
            1.1.3 主要仪器设备：
            1.1.4 主要试剂及配制：
        1.2 方法
            1.2.1 细胞培养与传代
            1.2.2 细胞分组
            1.2.3 MTT 测生长曲线：
            1.2.4 细胞集落形成实验
            1.2.5 细胞体外迁移能力的测定
            1.2.6 流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的变化
            1.2.7 统计学处理
    2 实验结果
        2.1 MTT 测生长曲线结果
        2.2 细胞集落形成实验结果
        2.3 细胞体外侵袭能力测定的结果
        2.4 流式细胞仪检测细胞周期的结果
        2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡的结果
    3. 讨论
    4、结论
第三章 雌激素促进子宫内膜癌发生机制的研究进展（综述）
全文小结
展望与不足
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]雌激素诱导子宫内膜癌细胞血管因子生成的作用[J]. 邱雁,陆媛媛,张洁清.  中国癌症防治杂志. 2012(01)
[2]雌二醇对子宫内膜癌细胞AKT通路中细胞因子的影响[J]. 丁兰芳,王晓谦,陆媛媛,宋红林,李力,张洁清.  中国肿瘤临床. 2011(20)
[3]pAKT和VEGF在Ⅰ型子宫内膜癌的表达及其临床意义[J]. 崔彬,姜汉国,肖静颖.  实用癌症杂志. 2009(03)
[4]PI3K-Akt信号通路与肿瘤细胞凋亡关系的研究进展[J]. 黄秀兰,崔国辉,周克元.  癌症. 2008(03)
[5]子宫内膜癌细胞中细胞膜雌激素受体表达的初步研究[J]. 王志启,王建六,魏丽惠,赵丹,高敏,郭瑞霞.  中华妇产科杂志. 2006(07)
[6]PI3K/Akt信号转导通路在恶性肿瘤中的研究进展[J]. 夏曙,于世英.  肿瘤. 2006(06)
[7]bFGF单克隆抗体对卵巢癌移植瘤血管生成的抑制作用[J]. 林卫,杨延林,彭芝兰,黄仲英,王光林.  现代妇产科进展. 2005(04)
[8]CD44v6、bcl-2和VEGF在子宫内膜腺癌中的表达及其意义[J]. 项达军,薛文群,冯一中,陆以农,陈萍倩,王嘉园.  癌症. 2003(06)
[9]子宫内膜癌组织碱性成纤维细胞生长因子表达和微血管密度的临床研究[J]. 白晓红,糜若然.  中华妇产科杂志. 2000(06)
[10]女性生殖系统恶性肿瘤组织胞浆雌激素及孕激素受体的研究[J]. 韩守威,何斌,唐茜萍,刘珊玲,彭芝兰,曹泽毅.  中华妇产科杂志. 1994(01)



本文编号：3374429