Buformin通过AMPK/S6通路抑制宫颈癌的增殖和侵袭并与紫杉醇有协同效应

发布时间：2021-10-12 03:24

　　目的:（1）探讨单用Buformin对人宫颈癌细胞的增殖及侵袭的抑制作用及其机制。（2）探讨单用Buformin对人宫颈癌细胞葡萄糖摄取及ATP产生的影响。（3）探讨Buformin联合临床一线宫颈癌化疗药对人宫颈癌细胞的协同抑制作用。（4）探讨单用Buformin及联合化疗药紫杉醇对裸鼠人宫颈癌细胞移植瘤的增殖抑制作用。方法:（1）CCK-8法及克隆形成实验检测递增浓度的Buformin对人宫颈癌细胞Hela、Siha、C33A和HCC94增殖能力的影响,绘制生长曲线,计算半数抑制浓度IC50值;（2）Transwell细胞体外侵袭实验检测Buformin对人宫颈癌细胞Siha和C33A侵袭的影响,并检测侵袭相关蛋白MMP9的表达情况;（3）流式细胞分选技术检测Buformin对人宫颈癌细胞Siha、C33A和HCC94的凋亡及细胞周期的影响;（4）分别检测Buformin对人宫颈癌细胞Siha、C33A和HCC94细胞内葡萄糖摄取、LDH活性、乳酸产生及ATP生成情况的影响;（5）Western-blot检测Buformin处理后对人宫颈癌细胞内AMPK磷酸化激活情况及AMPK/m... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

AMPK/mTOR通路示意图

第二章 Buformin 对宫颈癌细胞的抑制作用100、500、1000、2000μM。经过 72 小时 Buformin 处理，根据 CC胞增殖曲线图，如图 2-1，随着 Buformin 浓度的递增，细胞活性逐到抑制。计算各细胞的半数抑制浓度 IC50，可得 C33A、Hcc94 和 S36.2μM、166.1μM 和 622.8μM；而对 Hela 细胞增殖的抑制不如其他50=1202μM。Hela 细胞为宫颈腺癌细胞，其余均为宫颈癌鳞癌细胞 对 Hela 细胞的增殖抑制作用稍弱于其他细胞株可能与细胞类型有上的病理类型为鳞癌。以下实验选取敏感细胞株 C33A、Hcc94 和

图 2-1 Buformin 抑制 Hela、Siha、C33A、HCC94 细胞增殖趋势图进一步检测 Buformin 对单个宫颈癌细胞的增殖抑制能力，我们选用 Siha、C33A、HCC94 细胞进行细胞克隆形成能力实验，根据预实验结果选取小于三者 IC50 的浓度（100μM）进行实验处理。实验结果显示，与对照组相比,100μM Buformin 处理两周，大幅减少了 C33A、Hcc94 和 SiHa 细胞的克隆集落形成数量，如图 2-2，计算得 C33AHcc94 和 SiHa 细胞的克隆形成率分别为对照组的 40%、37%、56%（P=0.001, 0.001 和0.029）。


本文编号：3431789