甲状腺激素对生发基质—脑室内出血早产兔治疗的实验研究

发布时间：2017-05-06 04:00

  本文关键词：甲状腺激素对生发基质—脑室内出血早产兔治疗的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:生发基质-脑室内出血(germinal matrix hemorrhage-intraventricular hemorrhage,GM-IVH)是造成早产儿获得性脑损伤的常见原因之一,至少占了新生儿颅内出血的80%以上。据文献报道在胎龄32周或(和)出生体重1500g的早产儿中GM-IVH的发生率为20%~40%。我国早产儿GM-IVH的发生率大约为56.6%,明显高于发达国家,其中重度出血的发生率为16.3%;大约35%的存活患儿伴有不同程度的神经系统功能障碍。通过颅脑核磁共振影像学研究显示该病的病理学表现包括脑室周围深部脑白质局灶性坏死,囊性空洞形成,弥漫性脑白质软化,脑白质萎缩以及脑室扩大,神经系统组织学基础为少突胶质细胞髓鞘化延迟。目前对于GM-IVH造成的髓鞘化障碍、继发的不良神经系统结局没有行之有效的治疗手段。有相关文献报道,创伤、炎症等疾病会影响脑组织中甲状腺激素脱碘酶的表达,进而影响中枢神经系统内甲状腺激素的生物学功能。已有大量研究证实甲状腺激素可以促进多发性硬化等脱髓鞘疾病患者少突胶质前体细胞成熟、髓鞘形成,减轻中枢神经系统症状。甲状腺激素是否也可以通过上述机制促进早产儿GM-IVH后脑损伤的修复?关于这方面的研究鲜见报道。本文试图通过动物模型探讨:(1)GM-IVH早产兔脑室周围组织甲状腺激素信号通路中相关蛋白的表达水平;(2)甲状腺激素干预治疗对上述相关蛋白表达的影响;(3)甲状腺激素是否可以促进GM-IVH早产兔脑组织中髓鞘磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表达。方法:1选择孕29天孕兔进行剖宫产(足月为孕32天),迅速取幼兔,共60只,给予保温、奶粉喂养。将所有幼兔随机分为正常组、单纯GM-IVH模型组(简称模型组),GM-IVH模型+甲状腺激素干预组(简称模型+甲状腺激素组),每组各20只。参照腹腔注射丙三醇诱发GM-IVH的方法,模型制备方法如下:于生后3小时内给早产兔腹腔注射50%丙三醇,剂量为10ml/kg,24小时后行颅脑超声筛查,模型+甲状腺激素组中发生GM-IVH早产兔腹腔注射甲状腺激素,即三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine,T3),剂量为20μg/kg·d,1/日。进行上述操作同时,正常组早产兔腹腔注射等体积的生理盐水,24小时后行颅脑超声筛查。2将以上三组中的早产兔随机分为出生后3天、7天、14天三个亚组,按上述时间点给予安乐死,冰上迅速分离脑组织,观察大体标本,选取脑室周边区域组织,一部分置于-80℃冰箱中备用,一部分置于4%多聚甲醛溶液中备用,分别供蛋白印迹、免疫组化实验使用。3使用蛋白印迹的方法比较三组各个时间点早产兔脑室周边组织中2型甲状腺激素脱碘酶(type 2 iodothyronine deiodinase,D2)、3型甲状腺激素脱碘酶(type 3 iodothyronine deiodinase,D3)的表达;采用免疫组化的方法比较三组中各个时间点上早产兔脑室周边中MBP的表达情况。4统计方法:采用SPSS 13.0统计学软件、Microsoft Excel 2003进行数据处理。计量资料以均数±标准差表示,经方差齐性检验方差齐,多个样本均数的比较采用LSD-t法检验,若不满足方差齐性则采用秩和检验的方法。检验水准定为0.05,P值0.05有统计学意义,P0.01时具有显著差异。结果:1成功复制了早产兔GM-IVH模型成功对孕29天的实验兔(孕足月为32天)行剖宫产获得早产兔。通过头颅超声、大体标本观察、组织HE染色观察证实早产兔GM-IVH模型的成功制备。2早产兔脑组织中D2、D3的表达在出生后3-14天,正常组早产兔脑组织中D2的表达量逐渐增加,模型组早产兔脑组织标本中D2的表达量逐渐减少,且在相同时间上均低于正常组,差异均有统计学意义(P0.05);在出生后3-14天,正常组早产兔脑组织标本中D3的表达量逐渐升高,模型组早产兔脑组织标本中D3的表达量逐渐增加,且在相同时间上均高于正常组,差异均有统计学意义(P0.01)。模型+甲状腺激素组早产兔脑组织中D2表达量在7天、14天时均高于模型组的表达量,但低于正常组的表达量,差异有统计学意义(P0.01);模型+甲状腺激素组早产兔脑组织中D3表达量在3天、7天、14天时均低于模型组的表达量,但高于正常组的表达量,差异有统计学意义(P0.01)。3脑组织中MBP的表达模型组早产兔脑组织标本中MBP的表达在出生后3天、7天、14天逐渐降低,在相同时间上均低于正常组,差异有统计学意义(P0.01);模型+甲状腺激素组MBP的表达在出生后14天后高于模型组的表达量,低于正常组中的表达,差异有统计学意义(P0.05);但出生后3天、7天,模型组和模型+甲状腺激素组脑组织中MBP的表达率无差异(P0.05)。结论:早产兔发生GM-IVH后,脑组织内D2的表达量随着时间的变化明显减少,脑组织内D3的表达量随着时间的变化明显增多,MBP的表达率降低。通过给予甲状腺激素干预,可以在一定程度上提高的GM-IVH早产兔脑组织内D2的表达、降低D3的表达,增加脑组织中MBP的表达。提示GM-IVH对甲状腺激素脱碘酶的表达造成影响,从而影响局部组织甲状腺激素低水平,进而干预少突胶质细胞成熟、髓鞘化;早产兔发生GM-IVH后给予甲状腺激素干预有助于少突胶质细胞发育,改善GM-IVH的预后。
【关键词】：甲状腺激素 甲状腺激素脱碘酶 髓鞘磷脂碱性蛋白 早产兔 生发基质-脑室内出血 动物模型
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.21
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-21
• 结果21-24
• 附图24-31
• 附表31-33
• 讨论33-37
• 结论37
• 参考文献37-42
• 综述 甲状腺激素在新生儿脑发育过程中的相关研究42-52
• 参考文献47-52
• 致谢52-53
• 个人简历53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Hao Huang;Xiao-Feng Zhao;Kang Zheng;Mengsheng Qiu;;Regulation of the timing of oligodendrocyte differentiation:mechanisms and perspectives[J];Neuroscience Bulletin;2013年02期

  本文关键词：甲状腺激素对生发基质—脑室内出血早产兔治疗的实验研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：347645