PcG蛋白HPC2的生物信息学分析及其在不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中的表达研究

发布时间：2017-08-16 21:37

  本文关键词：PcG蛋白HPC2的生物信息学分析及其在不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中的表达研究

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【摘要】：目的:宫颈癌是全球女性恶性肿瘤中的常见疾病,严重威胁着女性的生命健康。作为发展中国家的中国每年的新发病例占世界总新发病例的30%左右,且宫颈癌患者以每年2%-3%的速度增长。近年来多个宫颈癌普查显示发病年龄趋于年轻化。现已有大量的研究表明HPV感染特别是高危型HPV病毒的感染是绝大多数宫颈癌癌前病变和宫颈癌的主要原因。而HPV16与HPV18在致宫颈癌的高危型HPV中最常见。多梳基因(Polycomb group,PcG)是近年来新发现的一个肿瘤相关基因。其已被证实为发育时维持同源异形基因稳定表现的重要因子,在胚胎发育、肿瘤发生和转移以及干细胞的维持中有着重要的作用。现已有多项研究表明PcG是一种肿瘤相关基因,参与鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等多种人类肿瘤的发生和发展。HPC2属于PcG基因家族成员,在多种癌组织中有大量表达。研究证实PcG蛋白HPC2在诱导癌细胞凋亡、调控细胞生长等方面的作用,并有研究表明HPC2在宫颈癌中的表达较正常宫颈组织明显增高,但其在宫颈癌组织中的表达及作用途径仍不明晰,需要进一步研究证实。因此深入了解与深入研究PcG蛋白HPC2的生物信息学功能及其与宫颈癌的关系很有必要,希望能为宫颈癌的发病机制的研究提供新的方向。本实验先通过生物信息学方法,对HPC2蛋白的氨基酸序列进行理化性质分析、亲/疏水性分析、细胞内的定位情况、结构域分析,并对其进行系统演化关系预测,为日后开展HPC2的相关研究提供理论依据。后通过体外培养不同HPV感染状态的宫颈癌细胞Siha(HPV16感染),HeLa(HPV18感染),C-33a(无HPV感染),探讨PcG蛋白HPC2在3种宫颈癌细胞中的表达情况,并比较PcG蛋白HPC2在不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中的表达是否存在差异,旨在为HPV致宫颈癌的作用机制提供一个新的研究方向。方法:1.体外培养三种宫颈癌细胞株;2.采用荧光定量RT-PCR,观察不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中HPC2基因的表达情况。比较Siha,HeLa,C-33a细胞中HPC2的表达有无差异;3.采用western blot技术,比较Siha,Hela,C-33a宫颈癌细胞中PcG蛋白HPC2的表达是否存在差异。结果:1.荧光定量RT-PCR结果显示:不同HPV感染状态下的宫颈癌细胞均有HPC2基因的表达。Hela、Siha细胞中的HPC2基因的表达较C-33a细胞明显下调,P值均小于0.05,有统计学意义。Hela与Siha细胞间HPC2基因的表达无明显差异,P=0.3180.05。2.Western Blot结果显示三种宫颈癌细胞中均有HPC2蛋白的表达,且C-33a中蛋白的表达比Hela、Siha细胞多,与RT-PCR结果一致。结论:1.宫颈癌SiHa,HeLa,C-33a细胞中均有PcG蛋白HPC2的表达。2.存在HPV感染的Siha,Hela细胞的HPC2表达与无HPV感染的C-33a细胞相比明显降低,而均被HPV感染的Siha、Hela细胞的HPC2表达无明显差异。3.HPC2蛋白的表达情况与HPV病毒感染具有相关性。
【关键词】：宫颈癌 PcG蛋白HPC2 生物信息学 Siha细胞 HeLa细胞 C-33a细胞
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-8
• 前言8-11
• 第一部分:PcG蛋白HPC2的生物信息学分析11-15
• 一、材料11
• 二、方法：对HPC2蛋白的进行生物信息学分析11
• 三、结果11-14
• 四、讨论14-15
• 第二部分:不同HPV感染状态下的宫颈癌细胞中HPC2的表达研究15-38
• 材料与方法15-28
• 结果28-32
• 讨论32-38
• 结论38
• 参考文献38-45
• 主要缩略词中英对照表45-47
• 致谢47-48
• PcG蛋白HPC2在宫颈癌发生中的作用 综述48-58
• 参考文献54-58

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本文编号：685674