胎盘特异性蛋白-1对滋养细胞的影响
本文关键词：胎盘特异性蛋白-1对滋养细胞的影响
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【摘要】：背景：滋养细胞在胚胎发育和着床、诱导妊娠免疫耐受、维持正常妊娠以及胎儿生长、发育和成熟等胚胎、胎儿各个生命阶段发挥至关重要的生理作用,其功能异常影响胚胎发育和着床、胎盘发育与功能以及胎儿生长,因此,与妊娠失败、自然流产、子痫前期(preeclampsia)等妊娠并发症的发病密切有关。滋养细胞功能以及胎盘发育和功能受滋养细胞基因精细而复杂的调控,其中管家基因和胎盘特异性基因的作用尤为重要。胎盘特异性蛋白-1(placenta-specific protein 1, PLAC1)特异性表达于胎盘。妊娠8周起,在孕妇外周血中可检测到循环PLAC1 mRNA,并且在妊娠22-40周胎盘PLAC1表达水平没有显著变化；在妊娠终止时,PLAC1 mRNA却快速廓清。另外和正常妊娠者相比,先兆流产孕妇外周血游离PLAC1 mRNA显著降低,而子痫前期患者外周血PLAC1 mRNA显著增高,同时敲除PLAC1的小鼠会引起胎儿畸形、巨大胎盘和胎儿生长受限。我们在先前研究中也同样发现子痫前期患者胎盘PLAC1的表达明显高于正常妊娠者,这些都提示PLAC1对维持胎盘、胎儿正常发育是必需的。目的：明确PLAC1是否参与调控滋养细胞的生物学功能,通过调控滋养细胞PLAC1表达,明确PLAC1对滋养细胞增殖、迁移、侵袭等重要细胞功能的调控效应,探索PLAC1在胚胎发育、胎盘发育与功能以及胎儿生长中可能的作用。方法：1. SWAN-71细胞、JAR细胞培养、传代后,运用Western blot检测滋养细胞SWAN-71和JAR中PLAC1蛋白的表达。2.滋养细胞SWAN-71和JAR培养和传代后,siRNA干扰PLAC1基因,利用CCK-8方法检测细胞的增殖能力,Transwell检测细胞侵袭力,划痕试验检测细胞迁移能力。结果：1. Western blot显示SWAN-71和JAR细胞表达PLACl。2. siRNA靶向干扰后,SWAN-71细胞JAR细胞表达PLAC1均显著性下降。3. siRNA靶向干扰显著抑制了SWAN-71细胞和JAR细胞的增殖、侵袭和迁移(P均0.001)。结论：PLAC1表达于滋养细胞,抑制PLAC1表达可抑制滋养细胞增殖、迁移和侵袭,提示PLAC1参与调控滋养细胞的生物学功能。
【关键词】：PLAC1 SWAN-71细胞 JAR细胞 细胞生物学活性
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714
【目录】：
- 致谢5-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 缩略词表11-14
- 1 引言14-16
- 2 材料和方法16-30
- 2.1 研究对象16
- 2.2 细胞培养16-18
- 2.3 靶向性siRNA干扰PLAC1表达18-20
- 2.4 Western blot检测蛋白表达20-26
- 2.5 CCK-8法检测细胞增殖26-27
- 2.6 细胞划痕实验27-28
- 2.7 细胞侵袭实验28-29
- 2.8 统计学处理29-30
- 3 结果30-37
- 3.1 人滋养细胞表达PLAC130-31
- 3.2 PLAC1对滋养细胞增殖的影响31-33
- 3.3 PLAC1对滋养细胞迁移的影响33-35
- 3.4 PLAC1对滋养细胞侵袭力的影响35-37
- 4 讨论37-40
- 5 结论40-41
- 参考文献41-47
- 综述47-61
- 参考文献54-61
- 作者简历及在学期间所取得的科研成果61
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9 董e，
本文编号：744066
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