土木香内酯对人卵巢癌Skov-3和A2780细胞的抑制作用

发布时间：2017-09-12 16:25

  本文关键词：土木香内酯对人卵巢癌Skov-3和A2780细胞的抑制作用

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【摘要】：目的：检测AL对人卵巢癌细胞A2780、Skov3细胞增殖、周期、凋亡以及细胞因子IL-6、IL-8、VEGF分泌的影响,和AL联合PTX诱导人卵巢癌细胞A2780、 Skov3细胞时其增殖及细胞因子分泌的变化,探究AL可能的作用机理,以及是否能作为PTX化疗耐药的增敏药物,亦或是用作不能耐受化疗患者的辅助治疗方法。方法：1.采用ELISA法检测AL、PTX单独及联合诱导A2780、Skov3后细胞上清液中IL-6、IL-8、VEGF的含量。2.采用流式细胞仪检测梯度浓度的AL诱导人卵巢癌细胞24小时后周期的分布情况,以及固定浓度的AL诱导细胞15小时、30小时后细胞的凋亡率。3.采用MTT比对法检测AL诱导后人卵巢癌细胞存活率以及PTX联合AL诱导后卵巢癌细胞的存活率。结果：1.AL可以减少PTX诱导的Skov3细胞对IL-6的分泌而对A2780细胞没有影响；AL可以减少PTX诱导的Skov3细胞对IL-8的分泌而对A2780细胞没有影响；AL可以减少PTX诱导的A2780和Skov3细胞对VEGF的分泌。2.AL的诱导使A2780和Skov3细胞的G1期细胞减少,G2/M期细胞增多。这种周期阻滞作用随着药物浓度的增加而加强。3.AL的诱导使A2780和Skov3细胞的凋亡率增加,这种促凋亡作用随着时间的延长而加强。4.AL对人卵巢癌细胞药物作用浓度区间为1μmol/L至100μmol/L。对细胞的生长抑制作用与AL的药物浓度呈依赖关系。随着AL浓度的升高,细胞的存活率降低。AL对PTX诱导的A2780细胞有增敏作用而对Skov3细胞没有增敏作用。结论：1.AL对PTX诱导的A2780和Skov3细胞分泌的促炎因子有降调节作用。2.AL对人卵巢癌A2780和Skov3细胞有明显的G2/M期阻滞作用,这种周期阻滞作用与紫杉醇类似。3.AL对人卵巢癌A2780和Skov3细胞有促进凋亡的作用。4.AL对人卵巢癌A2780和Skov3细胞有生长抑制作用,对PTX诱导的A2780细胞有增敏作用而对Skov3细胞没有增敏作用。
【关键词】：卵巢癌 紫杉醇 土木香 土木香内酯
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 中文摘要2-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文缩写词汇对照表7-8
• 0.1 前言8-14
• 2.1 材料14-17
• 2.1.1 细胞来源14
• 2.1.2 实验药物及试剂14
• 2.1.3 实验仪器14-15
• 2.1.4 主要溶液及其配制方法15-17
• 2.2 技术方法路线17-31
• 2.2.1 实验流程图17-19
• 2.2.2 细胞培养19
• 2.2.2.1 细胞复苏19
• 2.2.2.2 细胞培养19
• 2.2.2.3 细胞传代19
• 2.2.3 药物配制19-20
• 2.2.4 ELISA检测药物作用后细胞因子分泌的变化20-22
• 2.2.4.1 ELISA检测药物作用后IL-6分泌的变化21
• 2.2.4.2 ELISA检测药物作用后IL-8分泌的变化21
• 2.2.4.3 ELISA检测药物作用后VEGF分泌的变化21-22
• 2.2.5 流式细胞仪检测药物作用后细胞周期的变化22-24
• 2.2.5.1 不同浓度的紫杉醇对人卵巢癌细胞周期的影响22-23
• 2.2.5.2 不同浓度的土木香内酯对人卵巢癌细胞周期的影响23-24
• 2.2.6 流式细胞仪检测药物作用后细胞凋亡的情况24-27
• 2.2.6.1 固定浓度的紫杉醇作用于人卵巢癌细胞的细胞凋亡率变化24-26
• 2.2.6.2 固定浓度的土木香内酯作用于人卵巢癌细胞的细胞凋亡率变化26-27
• 2.2.7 MTT比色法27-31
• 2.2.7.1 对数筛选土木香内酯对人卵巢癌细胞药物作用浓度区间27-28
• 2.2.7.2 梯度浓度的土木香内酯对人卵巢癌细胞增殖的影响28-29
• 2.2.7.3 梯度浓度的紫杉醇对人卵巢癌细胞增殖的影响29-30
• 2.2.7.4 固定药物浓度的土木香内酯联合不同浓度的紫杉醇对人卵巢癌细胞增殖的影响30-31
• 2.2.8 统计学分析31
• 2.3 结果31-44
• 2.4 讨论44-49
• 2.5 结论49-50
• 2.6 问题与展望50-51
• 致谢51-52
• 参考文献52-62
• 综述62-65
• 参考文献64-65
• 附件65-66

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