PHH3阳性细胞计数在子宫平滑肌肿瘤诊断中的作用及意义

发布时间：2017-09-28 04:20

  本文关键词：PHH3阳性细胞计数在子宫平滑肌肿瘤诊断中的作用及意义

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【摘要】：目的：子宫平滑肌肉瘤(Leiomyosarcomas, LMS)与恶性潜能未定的平滑肌肿瘤(Smooth Muscle Tumors of Uncertain Malignant Potential,STUMP),奇异性平滑肌瘤(Bizarre/Atypicaleiomyoma,BLM/ALM),核分裂活跃的平滑肌瘤(Mitotically Active Leiomyoma,MAL)的鉴别诊断主要依靠组织病理学的特征,要综合分析细胞异型性的程度、核分裂象计数的多少及是否存在肿瘤细胞凝固性坏死。准确的核分裂象计数是子宫平滑肌肿瘤分类诊断中很重要的一个参考指标。但是有时候像凋亡小体和某些固缩、奇异型碳炭块状不规则浓染的核在组织形体学上很难与核分裂象进行区分,这就给计数工作带来了很大的困难,降低了计数的可重复性及准确性。磷酸化组蛋白H3 (Phospho-Histone H3, PHH3)是近几年新发现的标记细胞分裂期的特异性标记物,有助于鉴别细胞凋亡、核碎裂、固缩等与核分裂相似细胞形态,并降低人为及制片因素干扰,与HE相结合可有效及准确计数核分裂,从而使平滑肌肿瘤的诊断更加准确客观。Ki-67是判断细胞增殖程度的重要参数,可以识别除GO期以外的G1、S、G2和M期细胞。本文通过对LMS、STUMP、BLM、MAL及平滑肌瘤(Leiomyoma, LM)5种常见平滑肌肿瘤类型中PHH3计数及Ki-67增殖指数的统计,并比较2种指标的分布特点,探讨PHH3是否为计数核分裂象更精确的指标,及其在不同性质及类别的子宫平滑肌肿瘤分类诊断中的作用及意义。方法：应用免疫组织化学染色S-P法检测PHH3和Ki-67在132例子宫平滑肌肿瘤中的表达,包括26例平滑肌肉瘤、16例恶性潜能未定的平滑肌肿瘤、30例奇异性平滑肌瘤、30例核分裂活跃的平滑肌瘤及30例平滑肌瘤,结合HE中核分裂象(HE-MI)的计数进行对比分析。结果：1.PHH3染色的阳性部位定位于细胞核且呈棕黄色,其阳性细胞在显微镜下比较容易被准确识别；2.PHH3和Ki-67的计数及HE-MI的计数在132例子宫平滑肌肿瘤中的均数±标准差分别为13.6±14.6,493.5±495.6,9.4±10.4；三者之间的差异具有统计学意义(P0.05)。3.PHH3的计数与HE-MI的计数呈正相关(r=0.964,p0.05)。在5组中PHH3的计数均高于HE-MI的计数,且差异异均具有同统计学意义(P0.05)。在5组平滑肌肿瘤中PHH3与HE-MI匕值差异较小,且其比值在LM与其余四组之间差异具有统计学意义(P均0.05),LMS、STUMP、BLM和 MAL任意两组间的比较差异均不具有统计学意义(P均0.05)4.Ki-67的计数及HE-MI的计数呈正相关(r=0.643,p0.05)。在5组中Ki-67的计数均高于HE-MI的计数,且差异均具有同统计学意义(P0.05)。在5组平滑肌肿瘤中Ki-67与HE-MI匕值差异较大,且其比值只在STUMP和MAL之间、BLM和LM之间差异不具有统计学意义(P均0.05),除去这两组剩余任意两组间的比较差异均具有统计学意义(P均0.05)5.PHH3在LMS组中的表达高于STUMP组、BLM组、MAL组和LM组(P0.001)。STUMP组和MAL组高于BLM组和LM组(P0.001)。85%的LMS组PHH3计数大于20;PHH3计数在11-20之间的,STUMP组和MAL组分别占81%和63%；BLM组93%的PHH3计数小于10；LM组100%的PHH3计数小于5.结论：1.PHH3能真实的反应处于G2期和M期的细胞数目,与Ki-67相比其与子宫平滑肌肿瘤HE-MI的计数具有更好的线性正相关的关系。2.PHH3可以以一定的比率代替HE中核分裂象计数,在我们的实验中这个比率为1.4-1.5,并且可以消除观察者之间的差异性,是一个更为准确的计数子宫平滑肌肿瘤中核分裂象的指标。3.当PHH3的计数超过20的时候,平滑肌肉瘤的可能性更高。
【关键词】：子宫平滑肌肿瘤 PHH3 Ki-67 核分裂象 免疫组化
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语说明10-12
• 前言12-14
• 对象和方法14-18
• 1 主要材料和试剂14-15
• 1.1 组织标本14
• 1.2 主要试剂14
• 1.3 主要仪器14-15
• 1.4 主要溶液的配制15
• 2 实验方法15-17
• 2.1 组织切片准备15
• 2.2 免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色(S-P法)15-16
• 2.2.1 免疫组化染色基本原理15
• 2.2.2 免疫组化染色基本步骤15-16
• 2.3 免疫组织化学对照16
• 2.4 结果判读16
• 2.5 数据采集16-17
• 3 统计分析17-18
• 结果18-26
• 1 H&E染色结果各PHH3染色在显微镜下的分析18-20
• 2 PHH3、Ki-67和H&E-MI在132例子宫平滑肌肿瘤中的分布情况20-21
• 3 Ki-67在平滑肌肿瘤中的分布特点及与H&E-MI对比分析21-22
• 4 PHH3在平滑肌肿瘤中的分布特点及与H&E-MI对比分分析22-24
• 5 PHH3和Ki-67的对比分析24-25
• 6 PHH3计数的分布区间分析25-26
• 讨论26-32
• 1 研究背景26-28
• 2 PHH3免疫组化图像分析28-29
• 3 PHH3和H&E-MI相关性分析29
• 4 PHH3较Ki67计数核分裂象的优势29-30
• 5 PHH3在子宫平滑肌肿瘤分类诊断中的意义30-31
• 6 小结31-32
• 结论32-33
• 参考文献33-38
• 发表论文和参加科研情况说明38-39
• 综述39-60
• 参考文献49-60
• 致谢60

【参考文献】

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1 肖永光;王贤灿;;内皮源性吲哚胺2,3-过氧化酶对自体移植静脉桥狭窄的抑制作用[J];微循环学杂志;2012年04期

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本文编号：933743