自噬对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响

发布时间：2017-09-30 23:26

  本文关键词：自噬对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响

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【摘要】：目的观察自噬对宫颈癌细胞增殖迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度雷帕霉素诱导人宫颈癌HeLa细胞,吖啶橙染色观察自噬小体的形成,Western blot检测自噬相关基因LC3B以及PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达情况,采用RTCA仪器实时检测细胞的增殖能力,Transwell小室检测细胞的迁移能力。应用自噬抑制剂3-methyladenine(3-MA)阻断宫颈癌细胞自噬后,采用RTCA仪器实时检测细胞的增殖能力,Transwell小室检测细胞的迁移能力。构建带有绿色荧光蛋白的LC3B质粒,转入HeLa细胞,通过G418药物筛选转染阳性细胞,荧光显微镜观察LC3B的细胞定位,Western blot检测LC3B表达。RTCA仪器实时检测野生型和LC3B过表达HeLa细胞的增殖能力,Western blot检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达。结果雷帕霉素诱导后,宫颈癌HeLa丑细胞自噬水平增高,增殖和迁移能力有所下降;PI3K/Akt/rnTOR通路蛋白表达改变(P0.05)。自噬抑制剂3-MA诱导HeLa细胞增殖和迁移水平下降(P0.05)。荧光显微镜和Westem blot结果显示构建的LC3质粒成功转入Hela细胞中并且能够抑制宫颈癌细胞的增殖(P0.05)。结论在一定范围内,随着自噬水平的升高,HeLa细胞增殖和迁移能力降低,可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥作用。通过基因靶向扰乱自噬关键基因(如LC3等)而改变宫颈癌细胞自噬水平可能为宫颈癌的治疗带来新策略。
【作者单位】： 武汉大学附属中南医院基因诊断中心;
【关键词】： 自噬 宫颈癌细胞 雷帕霉素 LC
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81541147) 湖北医药学院博士研究生启动金资助项目(2015QDJZR01)
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 宫颈癌是威胁女性生命健康的三大癌症之一, 是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤。近年来其发 病趋势年轻化。目前生物治疗逐渐成为肿瘤治疗的研究热点,但多以诱导肿瘤细胞凋亡为主,随着对细胞自噬认识的深人,通过诱导自噬促进肿瘤细胞自噬性死亡可能成为肿瘤治疗的新途径。 自

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本文编号：951052