三氯生对胎盘合体滋养细胞11β-HSD2影响的研究

发布时间：2017-10-05 16:24

  本文关键词：三氯生对胎盘合体滋养细胞11β-HSD2影响的研究

  更多相关文章： 胎盘 三氯生 合体滋养细胞 11β羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型 细胞凋亡

【摘要】：背景:三氯生作为广谱抗菌剂被广泛用于个人护理产品。研究发现三氯生具有干扰人体内分泌代谢的作用。11β-羟类固醇脱氢酶2型(11β-HSD2)在人类胎盘组织中广泛高度表达,起着糖皮质激素屏障的作用,能够将有生物活性的糖皮质激素皮质醇代谢为无活性的皮质酮,从而保护胎儿免受过量外源性糖皮质激素的影响。目的:研究三氯生对胎盘滋养细胞11β-HSD2表达的影响和对胎盘滋养细胞凋亡的影响,以及这两者之间的关系。方法:采用改良的Kliman法分离提纯胎盘滋养层细胞,胎盘细胞滋养细胞在体外培养3天后达到最大合体化成为胎盘合体滋养细胞,此时加入不同浓度三氯生(0,0.001,0.01,0.1,1,10μM)孵育24h后,检测11β-HSD2的表达水平和酶活性。通过MTT、DNA ladder、Hoechst33342染色和Western blotting的方法检测胎盘合体滋养细胞经三氯生处理后细胞活力和凋亡相关指标的变化。为了研究三氯生促进胎盘滋养细胞凋亡与抑制11β-HSD2表达之间的关系,用30μM凋亡抑制剂Z-VAD-FMK预处理细胞一小时后,与0.1μM三氯生共同孵育胎盘合体滋养细胞24h,检测胎盘合体滋养细胞凋亡相关指标及11β-HSD2表达的变化。结果:三氯生能够浓度依赖性地抑制胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的m RNA、蛋白和酶的表达。同时三氯生浓度依赖性地抑制胎盘合体滋养细胞的活力。Hoechst33342荧光染色实验显示0.1μM三氯生处理组细胞核质染色明显加深,DNA ladder实验显示0.1μM三氯生处理后细胞琼脂糖电泳出现明显梯状DNA条带。三氯生还能够浓度依赖性地增加胎盘合体滋养细胞的caspase-3酶活性,并且浓度依赖性地促进促凋亡蛋白cleaved-caspase-3和Bax的表达,同时抑制抗凋亡蛋白pro-caspase-3和Bcl-2的表达。用凋亡抑制剂Z-VAD-FMK阻断三氯生对胎盘合体滋养细胞的促凋亡作用后,三氯生对胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的表达和酶活性的抑制作用也被显著减弱。结论:三氯生能够通过促进胎盘合体滋养细胞凋亡来抑制11β-HSD2的表达和酶活性,进而可能破坏胎盘糖皮质激素屏障,损害胎儿的正常发展。
【关键词】：胎盘 三氯生 合体滋养细胞 11β羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型 细胞凋亡
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714
【目录】：

• 缩略词表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-15
• 主要实验仪器15-16
• 主要实验试剂与配方16-27
• 实验方法27-44
• 实验结果44-55
• 讨论55-58
• 结论58-59
• 参考文献59-64
• 综述——11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型在胎盘及胎儿起源成人疾病中的作用64-70
• 参考文献67-70
• 致谢70-72
• 攻读硕士期间已发表论文72

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李怡琳;韩健;刘晓洁;韩磊;俞丽丽;李红梅;周丽娟;张欣;郑英如;郭建新;李力;;小鼠合体滋养细胞微绒毛膜制备方法的研究[J];重庆医学;2013年12期

2 ;胎盘合体滋养细胞的免疫抑制活性[J];广东解剖学通报;1990年02期

3 黄婷;罗红霞;邵勇;;妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘合体滋养细胞中白细胞介素18和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1表达及其意义[J];中国实用妇科与产科杂志;2013年04期

4 桑翠琴,殷秀凤,王秋兰;妊高征患者合体滋养细胞质膜部分生化指标的变化[J];现代妇产科进展;1998年04期

5 陈宇;黄亚绢;蒋荣珍;;合体滋养细胞微粒对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响[J];现代妇产科进展;2013年03期

6 丁依玲,唐玲玲;妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘合体滋养细胞超微结构的观察与脐静脉血总胆酸水平的测定[J];中华妇产科杂志;2005年07期

7 王琳,高英茂,李少玲,霍丽云;纤维粘连蛋白在不明原因流产合体滋养细胞中的核定位与凋亡[J];解剖学杂志;1999年05期

8 洪燕;先兆子痫或胎儿宫内发育迟缓的足月胎盘中合体滋养细胞凋亡增加[J];国外医学.妇产科学分册;2003年01期

9 李志杰;张文真;;合体滋养细胞微绒毛膜与子痫前期[J];国际妇产科学杂志;2008年05期

10 关晓峰;刘启明;周德雄;李飞;杨玉恺;王华毅;邓耀良;;睾丸混合性生殖细胞瘤1例报告[J];中华男科学杂志;2010年09期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 李怡琳;刘晓洁;韩磊;李红梅;周丽娟;张欣;郑英如;郭建新;俞丽丽;韩健;李力;;小鼠合体滋养细胞微绒毛膜制备方法的研究[A];全国中西医结合生殖系统炎症性疾病专题学术会议论文及摘要集[C];2013年

2 李雪莲;归绥琪;王海燕;;补肾益气方调节合体滋养细胞吲哚胺2，3-二氧化酶表达和活性对母胎界面Th细胞因子的影响[A];全国第七届中西医结合妇产科学术会议论文及摘要集[C];2007年

3 邵勇;孙雪梅;王晓璐;姚珍薇;吴味辛;;妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘合体滋养细胞中组成型雄烷受体基因的表达及其临床意义[A];2011中国妇产科学术会议暨浙江省计划生育与生殖医学学术年会暨生殖健康讲习班论文汇编[C];2011年

4 杨博萍;韩健;韩新美;俞丽丽;颜耀华;周元国;李力;;重度子痫前期胎盘合体滋养细胞微绒毛膜脱落与RhoB/ROCK分子表达的关系[A];中华医学会第三次全国妊娠期高血压疾病学术研讨会论文汇编[C];2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 张楠;三氯生对胎盘合体滋养细胞11β-HSD2影响的研究[D];上海交通大学;2015年

2 黄小玲;胎盘合体滋养细胞膜微粒与子痫前期发病机制的关系研究[D];暨南大学;2009年

3 杨博萍;Rho/ROCK分子与合体滋养细胞微绒毛膜脱落及重度子痫前期发病关系的研究[D];第三军医大学;2012年

4 刘彩茹;妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘合体滋养细胞HDAC3表达及意义研究[D];重庆医科大学;2014年

5 李怡琳;合体滋养细胞微绒毛膜制备子痫前期动物模型的研究[D];第三军医大学;2013年

6 李秋红;妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘合体滋养细胞OATP8基因表达及意义研究[D];重庆医科大学;2012年

7 黄婷;妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘合体滋养细胞中IL-18和caspase-1的表达及意义[D];重庆医科大学;2013年

8 孙雪梅;妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘合体滋养细胞组成型雄烷受体CAR基因表达的研究[D];重庆医科大学;2011年

，

本文编号：977807