低分子肝素对脓毒症大鼠肺血管内皮细胞功能的影响

发布时间：2017-11-01 03:19

  本文关键词：低分子肝素对脓毒症大鼠肺血管内皮细胞功能的影响

  更多相关文章： 低分子肝素 脓毒症 血管内皮细胞 细胞凋亡

【摘要】：目的:本研究通过静脉注射内毒素(LPS)制备脓毒症大鼠模型,通过测定各组大鼠血清s TM、s E-selectin表达的变化,以及观察肺组织病理形态学变化和肺组织VEC凋亡的变化,探讨低分子肝素对脓毒症大鼠血管内皮细胞损伤和凋亡的作用,及其可能的机制,为脓毒症的治疗提供理论依据。方法:(1)将72只SPF级的SD雄性大鼠分为对照组(18只)、脓毒症组(18只)、脂多糖+肝素(LPS+UFH)组(18只)和脂多糖+低分子肝素(LPS+LMWH)组(18只),各组再按照观察时间点平均分为造模后6h、12h和24h各3个亚组,每亚组6只。(2)取造模后各时间点各组大鼠的肺组织制作石蜡切片,并分别进行HE和Hoechst 33258染色,用以检测肺血管内皮细胞的损伤和凋亡情况。(3)运用免疫组化法检测各实验组大鼠肺各时间点血管内皮细胞Bcl-2、Bax的表达量;(4)用ELISA的方法检测实验组大鼠肺各时间点血清中s TM和s E-selectin的表达。结果:(1)HE染色结果显示脓毒症导致肺泡腔和小血管内红细胞聚集,并且而随着建模时间的延长症状加剧。LPS+UFH组和LPS+LMWH组与脓毒症组相比,肺水肿及红/白细胞浸润的现象显著改善,其中LPS+LMWH组较LPS+UFH组改善效果明显。(2)Hoechst 33258染色结果表明,脓毒症发生时易导致肺血管内皮细胞呈现不同程度的核固缩,且随着时间延长,血管内皮细胞的凋亡显著增加;LPS+UFH组和LPS+LMWH组较脓毒症组VEC凋亡显著降低(P0.01),与对照组相比,LPS+UFH组凋亡细胞核明显增多(P0.01),LPS+LMWH组凋亡细胞核较LPS+UFH组减少(P0.05)。(3)免疫组化检测Bcl-2、Bax结果表明,LPS+UFH组和LPS+LMWH组血管内皮细胞Bax蛋白的表达均明显低于脓毒症组(P0.01);每组Bcl-2的表达量无统计学意义,但Bax/Bcl-2值与脓毒症组相比显著降低(P0.05);LPS+LMWH组较LPS+UFH组Bax的表达量显著下降(P0.05)。(4)血清s TM和s E-selectin表达量检测发现,与对照组相比,脓毒症组在各时间点(6 h、12 h和24 h)血浆s TM浓度均升高(P0.01);LPS+UFH组和LPS+LMWH组与脓毒症组相比,在各时间点血浆s TM浓度均降低(P0.01),但较对照组仍有升高(P0.01);LPS+LMWH组与LPS+UFH组相比略有降低(P0.05)。从各时间点来看,脓毒症组在6 h、12 h、24 h s E-selectin表达量与对照组相比仍然较高(P0.01),而在24 h时LPS+UFH组和LPS+LMWH组与对照组相比无统计学差异;各时间点LPS+UFH组和LPS+LMWH组与脓毒症组相比s E-selectin表达量均有下降(P0.01)。结论:(1)脓毒症大鼠血清中s TM和s E-selectin的表达量显著升高,大鼠肺VEC中Bax的表达量升高,Bax/Bcl-2增大,肺VEC凋亡增加;(2)LMWH可降低脓毒症大鼠s TM和s E-selectin水平,减轻脓毒症大鼠肺病理损伤程度,对脓毒症时肺VEC具有保护作用,这可能是通过对凝血-炎症轴的作用来实现的。
【关键词】：低分子肝素 脓毒症 血管内皮细胞 细胞凋亡
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R459.7
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 英文缩略语10-11
• 前言11-14
• 一、材料与方法14-20
• 1 实验材料14-15
• 1.1 实验动物14
• 1.2 实验试剂14
• 1.3 实验仪器14-15
• 1.4 主要溶液配制15
• 2 试验方法15-20
• 2.1 实验分组15
• 2.2 处理方法15-16
• 2.3 脓毒症模型的评价16-17
• 2.4 检测指标及方法17-20
• 二、结果20-29
• 1 大鼠一般情况观察20
• 2 脓毒症大鼠模型的评价20-21
• 3 HE染色结果21-23
• 4 Hoechst 33258染色法观察肺VEC的凋亡23-26
• 5 免疫组化法检测Bcl-2 和Bax表达26
• 6 s TM和s E-selectin检测26-29
• 三、讨论29-35
• 1 脓毒症动物模型的建立29-30
• 1.1 脓毒症动物模型的类型及评价29-30
• 1.2 实验性脓毒症LPS模型的建立30
• 1.3 LPS脓毒症模型效果的评价30
• 2 脓毒症时肺血管内皮细胞的变化30-32
• 3 脓毒症时血管内皮细胞Bcl-2、Bax的表达量32
• 4 脓毒症时血清s TM和s E-selectin的表达量32-33
• 5 肝素和低分子肝素对脓毒症中肺血管内皮细胞的保护作用33-34
• 6 研究的局限性34-35
• 四、结论35-36
• 参考文献36-41
• 综述41-48
• 综述参考文献45-48
• 致谢48-49
• 作者简介49-50
• 导师评阅表50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 柳枫,冷希圣,朱继业,冯洪强,李澍,杜如昱;肝硬变门静脉高压症患者门体分流术前后血中内皮素、血栓素与前列环素动态临床观察[J];肝胆外科杂志;2000年01期

2 于亮;段绍斌;居来提;杨东鹰;邓明飞;樊晓静;吾买尔江;史志涛;刘郁;张增峰;;黄芪注射液对两次打击大鼠致多器官功能障碍综合征中心肌和血管内皮细胞损伤的影响[J];中国全科医学;2010年09期

3 龙健,曾智;低分子肝素对血管内皮细胞舒缩功能的影响[J];心脏杂志;2004年04期

4 王长远;秦俭;;重组人活化蛋白C在脓毒症中的应用进展[J];中国误诊学杂志;2008年06期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 肖雪飞;姜黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用及分子机制研究[D];中南大学;2012年

，

本文编号：1125017