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人脐带间充质干细胞移植治疗肝衰竭的实验研究

发布时间:2020-06-05 00:14
【摘要】:目的:探讨不同途径移植人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对大鼠急性肝衰竭(ALF)的疗效。方法:SPF级SD大鼠60只,参照完全随机对照原则分为4组:肝内途径治疗组、尾静脉途径治疗组、模型对照组、空白对照组。HUC-MSCs通过细胞形态学、细胞标志物和细胞分化再生能力三方面检测,采用流式细胞仪检测表面抗原分离鉴定HUC-MSCs。治疗组HUC-MSCs移植数量:1.0×106个细胞。移植前后肝功能检测:细胞移植后0天、1天、2天、4天和7天检测谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、白蛋白(ALB)含量;组织病理学观察:细胞回输后3天、1周、2周处死大鼠,制作肝脏标本,采用HE染色观察肝脏细胞病理学改变;人CK18水平的表达检测采用免疫组化法,以观察其在肝内的定植情况;人CK8、CK18和AFP基因m RNA转录水平检测应用Real-time PCR法。结果:1.移植HUC-MSCs治疗3天后,ALF大鼠移植治疗组肝功能血清学指标(TBil、ALT和ALB)水平显著优于模型对照组,二者差异有统计学意义(P0.05)。2.与模型对照组比较,治疗组肝脏HE染色显示肝细胞再生明显和炎性细胞浸润减少,说明HUC-MSCs对ALF大鼠肝脏具有修复作用。3.移植后3天,治疗组可检测到人CK18蛋白的表达,说明HUC-MSCs能够在大鼠肝脏组织中存活并进一步定向分化为具有分泌蛋白能力及表面特异性标志物的细胞。4.造模后,治疗组与模型对照组CK8、CK18和AFP m RNA的相对转录量出现显著性差异(P0.05)。而对治疗组之间进一步分析发现:尾静脉组和肝内途径组上述相对转录量数值相当,二者之间的差异不具备统计学意义(P0.05)。结论:1.HUC-MSCs移植可改善大鼠ALF后肝功能,促进肝脏修复,起到治疗作用。2.肝内注射与尾静脉移植HUC-MSCs疗效的无显著差异,均能修复肝组织。3.HUC-MSCs能够在大鼠肝脏组织中存活并进一步定向分化为具有分泌蛋白能力及表面特异性标志物的细胞。
【图文】:

细胞表面抗原,标志物,附图


HUC-MSCs细胞表面抗原标志物表达
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R575.3

【参考文献】

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本文编号:2697192

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