高渗钠盐溶液对严重烫伤大鼠早期肾脏损伤影响的实验研究

发布时间：2020-07-18 11:52

【摘要】：目的严重的烧伤休克被认为是导致烧伤后早期肾功能下降的主要原因之一,而继发烧伤后急性肾损伤(AKI)的患者死亡率明显增加。本研究通过对严重烫伤大鼠采用乳酸钠林格液(LR)和高渗钠盐溶液(HS,300mmol/L)复苏治疗作比较,分别从肾功能、肾组织细胞形态变化、炎症和氧化应激损伤、以及相关信号转导通路变化,探讨HS对重度烫伤大鼠肾损伤的影响。方法将56只雌性SD大鼠(体重:230±15g)随机分为三组:假伤组(8只,模拟假烫)、和烫伤组LR组和HS组(各24只)。将所有大鼠采用腹腔注射麻醉,行背部剃除毛发和尾静脉放置留置针管,假伤组大鼠采用温水模拟假烫后直接取标本,烫伤组大鼠采用开水烫伤背部致30%体表总面积(TBSA)深二至三度烫伤,再分别通过尾静脉输注LR和300mmol/L HS进行复苏治疗,并在复苏后2、8、24h时间点取大鼠动脉血和肾脏组织。第一部分:高渗钠盐溶液对严重烫伤大鼠血钠、肾功能及组织病理形态的影响取出收集各组大鼠的血浆和肾脏组织标本,血浆中钠离子、肌酐和尿素氮(BUN)浓度直接通过自动生化分析仪测出,采用酶联免疫吸附试验(Elisa)测定血浆中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量,干湿质量法测定肾脏组织中的湿/干比值,HE染色对比各组大鼠肾脏组织细胞形态差异。第二部分:高渗钠盐溶液对严重烫伤大鼠血浆炎症介质表达及肾脏组织氧化应激损伤的影响采用Elisa法检测血浆中肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)6及高迁移率族蛋白B1(HMGB1);硫代巴比妥酸法检测肾脏组织丙二醛(MDA)水平;羟胺法检测肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)含量。第三部分:高渗钠盐溶液对严重烫伤大鼠肾脏组织中p38MAPK通路活化的影响取出冻存肾脏组织,采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测肾脏组织中p38MAPK蛋白表达,以磷酸化p38MAPK/p38MAPK的比值表示p38MAPK通路活化程度。结果第一部分与LR组相比,伤后各时间点大鼠血浆中钠浓度均明显低于假伤组和HS组(P0.01)。伤后各时间点,LR组和HS组大鼠血浆中肌酐、尿素氮以及NGAL含量均显著高于假伤组(P0.01)。伤后2h,LR组血浆中肌酐水平和HS组相近(P0.05),其后8h和24h两组差异显著;伤后2h和24h两治疗组血浆尿素氮水平差异不明显,但在伤后8h两组差异显著(P0.01);伤后各时间点LR组大鼠血浆中NGAL水平均明显高于HS组(P0.01)。伤后各时间点,LR组中肾脏组织W/D比值均高于假伤组和HS组(P0.01)。肾脏组织HE染色提示,伤后8h LR组中肾小管上皮细胞肿胀和坏死,官腔狭窄,可见大量炎性细胞渗出,而HS组肾组织损伤相对减轻;肾小管损伤病理学评分显示,LR组评分分值显著高于假伤组和HS组(P0.05)。第二部分与假伤组相比,LR组和HS组大鼠血浆中TNF-α和IL-6水平均显著升高,且在不同时间点LR组血浆中TNF-α和IL-6水平均显著高于HS组(P0.01);在伤后2h,三组间大鼠血浆HMGB1水平相近,无统计学差异(P0.05),但在伤后8h和24h,LR组和HS组血浆HMGB1水平均升高,且LR组HMGB1含量高于HS组(P0.01)。在伤后不同时间点,LR组和HS组与假伤组相比,大鼠肾脏组织中MDA含量均升高,但HS组在2h和24h肾脏组织中MDA含量增加不明显。与LR组相比,HS组大鼠肾脏组织中MDA含量在不同时间点均降低(P0.01)。与假伤组相比,两治疗组中大鼠肾脏组织中SOD含量在伤后不同时间点均显著降低(P0.01)。伤后2、8、24小时,LR组与HS组相比较,LR组肾组织中SOD含量降低更明显,且两组间差异有统计学意义(P0.01)第三部分伤后不同时间点,各组间肾脏组织中p38MAPK通道活化程度比较,LR组和HS组磷酸化p38MAPK蛋白与假伤组相比均增高,且LR组增加更明显。采用磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)/p38MAPK的A值比值表示p38MAPK通道活化程度。其比值显示,LR组和HS组比值高于假伤组,同时LR组比值也高于HS组,其差异有统计学意义(P0.01)结论(1)与LR相比,HS复苏可防止严重烫伤后大鼠低钠血症的发生,并且能够减缓伤后肾功能下降及减轻肾脏组织细胞损伤。(2)与LR相比,HS复苏可减轻严重烫伤后大鼠血浆中炎症反应和肾脏氧化应激损伤。(3)与LR相比,HS复苏可部分抑制肾脏组织中p38MAPK磷酸化,从而减弱p38MAPK通道激活表达。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R644
【图文】：

见图 2，表 11。 各组大鼠伤后各时相点肾脏组织 p-p38 MAPK /p38 MAPK 值（x±s） 例数 伤后 2h 伤后 8h 伤后 24h 24 0.930 0.049a0.946 0.057a0.885 0.025a 24 0.568 0.020ab0.734 0.018ab0.693 0.036ab 250.73 215.05 291.85 <0.01 <0.01 <0.01组鼠数 8 只，假伤组大鼠肾脏组织 p-p38 MAPK /p38 MAPK 值为（0.327 0.023）；与假伤组比较，LR 组相比，bP＜0.01。LR组假伤组2 h 8 h 24 h2 h 8 h 24 hHS组

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本文编号：2760853