急性心肌梗死兔模型血清硫脑苷脂与两种炎症因子（TNF-α和IL-6）的相关性研究以及地塞米松对三者表达水平的影响

发布时间：2020-09-11 07:19

　　目的:随着社会的发展和人们生活水平的提高,冠心病的发病率也逐年增加,而急性心肌梗死作为冠心病发展阶段的急性期,其高发的死亡率在严重影响着国人生存寿命的同时也给社会和家庭带来极大的负担。目前有关AMI的发病机制已逐步趋于完善,但仍有诸多相关因素在急性心梗的发病机制中的作用仍不十分清楚。急性心肌梗死最常见的病理学过程为在冠状动脉粥样硬化的基础上,不稳定的脂质斑块破裂或者出血导致了在斑块部位急性血栓的形成,与此同时,狭窄的冠脉由于血栓的形成而急性闭塞,进而导致了闭塞冠脉提供血流的心肌细胞发生急性坏死。近些年的相关研究发现,在急性心肌梗死发生、发展的过程中,缺血坏死的心肌细胞会引起局部或者全身性的炎症反应。炎症因子TNF-α和IL-6本质为多肽类细胞因子,它们直接参与了全身炎症反应、免疫反应等过程。TNF-α由单核巨噬细胞分泌,它能够启动、诱导和调节机体炎症反应。IL-6为免疫细胞释放的炎症因子,它在细胞反应的起始过程中大量释放,并且能够调节C反应蛋白在肝脏的合成。TNF-α和IL-6是在机体炎症反应的起始过程中起关键性作用的炎症因子,它们的血清浓度能够在一定程度上代表机体炎症反应的程度与阶段。硫脑苷脂是一种酸性鞘糖脂,它于1884年被Johann Ludwig Wilhelm Thudichum发现并命名,在随后的相关研究中,硫脑苷脂被认为是神经系统的重要组成成分。然而近些年有关硫脑苷脂的研究发现,它不仅在神经系统有着重要的病理生理作用,而且在心血管系统中亦发挥了不可忽视的生物学作用。最为著名的就是在凝血系统中发挥了双重功能的作用—也就是在不同的条件下,硫脑苷脂具有抗凝或促凝的生物学作用。而且也有研究提示硫脑苷脂也参与了动脉粥样硬化的发生发展过程,但究竟作为抗炎或者促炎因子却众说纷纭。因此,探讨硫脑苷脂在冠心病以及心肌梗死的发生发展过程中到底扮演何种角色显得尤为重要,因为这将为冠心病以及心肌梗死的预防以及治疗提供一条崭新的思路。本研究旨在观察心肌梗死模型兔中硫脑苷脂与TNF-α和IL-6的相关性,同时验证硫脑苷脂是否在急性心肌梗死的发病过程中作为炎症因子参与了疾病的发展。方法:选取健康纯种新西兰大白兔6只(2.5±0.5kg),采用随机分组的方式将6只兔子分为A、B两组(每组三只兔子),A组为心肌梗死模型组,B组为地塞米松预处理的心肌梗死模型组。采用结扎兔子心脏冠脉前降支的方法制备心肌梗死模型。A组分别于术前、术后0.5h、2h、6h、12h、24h、48h自耳缘静脉采集静脉血3ml,经离心机离心后取上清液测定血清中硫脑苷脂、TNF-α、IL-6的含量。B组在术前采血后经耳缘静脉注射地塞米松5mg进行术前预处理,然后测定术后0.5h、2h、6h、12h、24h、48h的血清硫脑苷脂、TNF-α、IL-6的含量。模型制备成功的标志为心电图ST段较术前相比弓背向上抬高并且能够肉眼观察到心梗区域心肌颜色为苍白或者室壁运动减低。标本采集均在相对无菌环境下操作,应用无菌生化试管采集标本,以3000r/min速率离心留取上清液。血清保存于-80℃冰箱待测。TNF-α、IL-6的测定采用酶联免疫吸附法。硫脑苷脂采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术进行测定。结果:1心肌梗死模型组,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂在术后0.5h开始升高,12小时达高峰,24小时开始回落,48小时回落至正常水平;2地塞米松预处理的心肌梗死模型组,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂在术后0.5h开始升高,6小时达高峰,12小时开始回落,48小时回落至正常水平;3心肌梗死模型组,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂三者两两比较均呈现正相关(P0.05);4地塞米松预处理的心肌梗死模型组,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂三者两两比较均呈现正相关(P0.05);5心肌梗死模型组与地塞米松预处理的心肌梗死模型组相比,在相同时间位点上,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂的含量A组B组(P0.05)。结论:1在急性心肌梗死兔模型中,血清TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂的含量随时间有着动态演变规律,提示血清TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂的含量变化可能在一定程度上代表了心肌梗死的发展阶段。同时验证了血清TNF-α、IL-6的含量能够在一定范围内反映心肌梗死演变过程中炎症反应的动态改变。2心肌梗死模型组和地塞米松预处理的心肌梗死模型组中,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂三者两两比较均呈现正相关关系,提示硫脑苷脂可能为急性心肌梗死发生、发展过程中的炎症因子。3两组在相同时间位点上,TNF-α、IL-6以及硫脑苷脂的含量A组均大于B组,证实了硫脑苷脂为一种炎症因子,并且能够被激素类抗炎治疗所抑制。同时提示,在急性心肌梗死早期如果能够合理应用抗炎治疗,能够减弱急性心肌梗死过程中的炎症反应。而且,A组的炎症因子达峰时间要迟于B组,提示了应用激素类抗炎治疗能够缩短急性心肌梗死的炎症发展的病程。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R542.22;R-332

【参考文献】