严重烫伤大鼠骨骼肌消耗的内质网应激机制及胰岛素治疗的作用

发布时间：2021-07-08 17:53

　　目的：高分解代谢是严重烧伤后代谢的显著特点，表现为明显的骨骼肌消耗，严重影响患者预后。我们前期研究发现泛素-蛋白酶体介导的蛋白降解及骨骼肌细胞凋亡是烧伤后骨骼肌消耗的主要机制，胰岛素治疗能够抑制上述过程。内质网（endoplasmic reticulum，ER）是蛋白质合成和修饰的重要场所，也是负责钙离子储存的细胞器，其稳态对细胞的功能和生存至关重要。如果内质网稳态失衡，将导致内质网应激反应（endoplasmic reticulum stress，ERS），后者广泛参与机体的代谢、炎症、肿瘤发生等过程，其介导的凋亡通路也是真核细胞重要的凋亡途径之一。为进一步阐明严重烧伤后骨骼肌消耗的机制，指导临床治疗，本课题拟通过三部分研究：（1）观察严重烫伤大鼠骨骼肌ERS活化、胰岛素信号通路、细胞凋亡及骨骼肌消耗改变；（2）ERS的治疗性药物4-苯基丁酸（4-phenyl butyric acid，4-PBA）干预严重烫伤大鼠骨骼肌ERS活化，观察胰岛素信号通路、细胞凋亡及骨骼肌消耗改变；（3）观察胰岛素治疗对严重烫伤大鼠骨骼肌ERS活化、胰岛素信号通路、细胞凋亡及骨骼肌消耗的影响，以探讨严重烫... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英文缩略词表
中文摘要
Abstract
第一部分 严重烫伤大鼠骨骼肌中内质网应激反应的活化
    前言
    材料与方法
        主要仪器
        主要试剂和试剂盒
        主要实验试剂配制
        动物实验
        免疫组织化学法检测骨骼肌 Caspase-3 表达
        TUNEL 法检测骨骼肌细胞核凋亡状况
        透射电镜观察胫骨前肌超微结构改变
        Western Blotting 检测骨骼肌蛋白表达
        统计学处理
    结果
        动物大体观察
        严重烫伤大鼠体重变化
        严重烫伤大鼠骨骼肌重量变化
        严重烫伤大鼠胫骨前肌细胞超微结构改变
        严重烫伤大鼠骨骼肌 Caspase-3 表达及细胞凋亡改变
        严重烫伤大鼠骨骼肌内质网应激反应相关蛋白表达
        严重烫伤大鼠胫骨前肌磷酸化 PI3K 蛋白表达
    讨论
    小结
    参考文献
第二部分 4-苯基丁酸治疗对严重烫伤大鼠内质网应激反应及骨骼肌消耗的作用
    前言
    材料与方法
    主要仪器
        主要试剂和试剂盒
        主要实验试剂配制
        动物实验
        免疫组织化学法检测骨骼肌 Caspase-3 表达
        TUNEL 法检测骨骼肌细胞凋亡
        透射电镜观察胫骨前肌超微结构改变
            Western Blotting 检测胫骨前肌、比目鱼肌蛋白表达
    统计学处理
    结果
        4-PBA 治疗严重烫伤大鼠体重变化
        4-PBA 治疗严重烫伤大鼠骨骼肌重量变化
        4-PBA 治疗严重烫伤大鼠胫骨前肌超微结构改变
        4-PBA 治疗严重烫伤大鼠骨骼肌 Caspase-3 表达及细胞凋亡改变
        4-PBA 治疗严重烫伤大鼠骨骼肌内质网应激反应相关蛋白表达
        4-PBA 治疗严重烫伤大鼠胫骨前肌磷酸化 PI3K 蛋白表达
    讨论
    小结
    参考文献
第三部分 胰岛素治疗对严重烫伤大鼠内质网应激反应及骨骼肌消耗的作用
    前言
    材料与方法
        主要仪器
        主要试剂和试剂盒
        主要试剂的配制
        动物实验
        免疫组织化学法检测骨骼肌 Caspase-3 表达
        TUNEL 法检测骨骼肌细胞凋亡
        透射电镜观察胫骨前肌超微结构改变
        Western Blotting 检测胫骨前肌、比目鱼肌蛋白表达
        统计学处理
    结果
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠体重变化
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠骨骼肌重量变化
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠血糖变化
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠胫骨前肌超微结构改变
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠骨骼肌 Caspase-3 表达及细胞凋亡改变
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠骨骼肌内质网应激反应相关蛋白表达
        胰岛素治疗严重烫伤大鼠胫骨前肌磷酸化 PI3K 蛋白表达
    讨论
    小结
    参考文献
综述
    参考文献
攻读博士学位期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]胰岛素强化治疗对严重烫伤大鼠血清凋亡配体的作用[J]. 段红杰,柴家科,盛志勇,姚咏明,尹会男,申传安,吴焱秋,胡泉,梁黎明.  中华烧伤杂志. 2009 (01)
[2]胰岛素对体外培养兔骨骼肌肌管蛋白降解的调节作用[J]. 申传安,柴家科,盛志勇,杨红明,尹会男,冯瑞.  中华烧伤杂志. 2006(04)
[3]严重烧伤脓毒症患者骨骼肌蛋白分解代谢的临床研究[J]. 柴家科,申传安,盛志勇.  中华医学杂志. 2005(41)
[4]应重视严重烧伤脓毒症患者骨骼肌蛋白高分解代谢的研究[J]. 柴家科,盛志勇.  中华医学杂志. 2005(41)
[5]进一步重视大面积深度烧伤皮肤替代物的研究[J]. 柴家科,盛志勇.  中华烧伤杂志. 2002(02)
[6]烧伤刺激大鼠骨骼肌组织泛素活化酶的转录表达[J]. 柴家科,吴焱秋,盛志勇.  中华外科杂志. 2002(01)
[7]大面积侵袭感染组织切除对烧伤创面脓毒症患者静息能量消耗的影响(英文)[J]. 柴家科,盛志勇,刁力,杨红明,高建川,许明火.  中华外科杂志. 2000(06)
[8]胰岛素治疗对烫伤脓毒症骨骼肌蛋白高降解的影响[J]. 申传安,柴家科,姚咏明,杨红明,盛志勇,尹会男,迟云飞.  中华创伤杂志. 2007 (01)

博士论文
[1]烫伤大鼠骨骼肌AMPK的活化对蛋白分解的作用及其信号转导机制[D]. 邓虎平.中国人民解放军军医进修学院 2010
[2]烧伤脓毒症大鼠骨骼肌消耗与凋亡之间的关系研究[D]. 吴焱秋.中国人民解放军军医进修学院 2006



本文编号：3272049