严重烫伤早期主要脏器自噬变化的实验研究

发布时间：2017-06-24 05:01

  本文关键词：严重烫伤早期主要脏器自噬变化的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：自噬是真核细胞内通过单层或双层膜包裹待降解物形成自噬体，而后与溶酶体结合形成自噬溶酶体对包裹物进行降解，降解产物被细胞再循环利用的过程。它是真核细胞适应营养或生长因子缺乏、低氧、内质网应激等有害刺激所发生的一种应激反应，生理状态下参与维持蛋白代谢平衡、细胞和机体的自身稳态。严重烧伤后机体启动全身应激系统及应答反应，从而引起机体固有生理反应失衡和一系列炎症反应、氧化应激损伤、免疫功能改变等病理变化，同时牵涉各重要脏器结构和功能的变化，严重者可诱发多器官功能不全综合症(MODS)等。自噬作为不同于细胞坏死和凋亡的第三种细胞死亡方式——自噬性细胞死亡，是否参与严重烧伤刺激所引起的一系列病理生理变化？是否在严重烧伤后脏器的结构与功能的变化中发挥着怎样的作用？就目前的研究资料而言，这些问题的答案尚未不清楚。因此，本课题旨在通过研究严重烧伤小鼠伤后早期不同时间点时主要脏器自噬水平的变化，初步阐明严重烧伤早期各主要脏器自噬水平变化规律，为深入研究严重烧伤后脏器功能损害的发生机制与防治措施提供新的思路。 方法： 1．以BALB/C小鼠为研究对象，建立30%TBSA的Ⅲ度烫伤模型，分别于烫伤前（正常对照）及烫伤后1h、2h、6h、12h、24h采集小鼠心、肝、肺、肾脏器组织标本。 2．提取各时相点各实验小鼠心、肝、肺、肾脏器组织标本总蛋白，用蛋白免疫印迹检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达量及其变化，以反映烧伤后各时相点不同脏器的自噬相关分子水平的表达变化。 3．将烫伤小鼠心、肝、肺、肾脏器组织标本制备后于透射电镜下观察各脏器自噬现象及其变化情况。 结果： 1．与伤前相比较，烫伤后1h各脏器Beclin1蛋白表达即开始有所增加，，尤以肝脏增加明显；随后均呈现出逐渐缓慢上升趋势，多在伤后12h达高峰。但在伤后24h时，四种脏器Beclin1蛋白表达却出现不同的变化，心脏组织Beclin1表达继续升高，而肝、肺、肾组织Beclin1表达则较12h明显回落，但仍高于伤前。 2．烫伤后1h四种脏器组织LC3蛋白表达均较伤前有所增加，以肾脏增加明显；随着时间的延长，也大多呈逐渐上升趋势，但以肾脏的上升幅度为最大，也多于伤后12h达高峰。伤后24h时四种脏器LC3表达也呈现不同的变化，心脏组织LC3表达继续较12h增加，而肝、肺、肾组织LC3表达则较12h降低，但仍高于伤前水平。 3．透射电镜观察烫伤前后心、肝、肺、肾组织细胞自噬变化的结果显示，烫伤后6h时心、肝、肺、肾组织胞内均出现自噬溶酶体增多，明显多于伤前水平，表明脏器组织细胞自噬水平增加。 结论： 1．严重烫伤后各主要脏器的自噬水平较正常对照明显升高，且自噬水平随伤后时间的推移有逐渐升高的趋势。 2．严重烫伤后各主要脏器的自噬水平随时间变化趋势有所不同，肝、肺、肾自噬水平于伤后持续升高，于12小时达到高峰，24h回落，而心脏自噬水平于伤后24h呈持续升高状态。严重烫伤后自噬水平的升高可能参与了脏器功能损害的发生。
【关键词】：烫伤 自噬 内脏 Beclin1 LC3
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R644
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-12
• 材料与方法12-17
• 1 主要实验试剂和耗材12
• 2 主要实验仪器12-13
• 3 实验动物模型及分组13
• 4 实验方法及操作步骤13-16
• 5 统计学分析16-17
• 结果17-24
• 1 烫伤后各脏器组织自噬相关蛋白 Beclin 1 蛋白表达的变化17-19
• 2 烫伤后各脏器组织自噬相关蛋白 LC3 蛋白表达的变化19-23
• 3 透射电子显微镜观察烫伤后各脏器组织自噬变化23-24
• 讨论24-27
• 结论27-28
• 参考文献28-32
• 英汉缩略语名词对照32-33
• 致谢33-34
• 综述34-50
• 参考文献45-50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 石富胜,罗向东,杨宗城;烧伤后细胞凋亡与多脏器功能不全综合症(MODS)[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2000年05期

2 冯冬杰;许林;;凋亡在肺缺血再灌注损伤中作用机制的研究进展[J];医学研究生学报;2010年02期

3 潘半舟;封冰;宋海珠;;自噬在调控抗肿瘤药物耐药中的研究进展[J];医学研究生学报;2012年12期

  本文关键词：严重烫伤早期主要脏器自噬变化的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：477116