硫化氢对尿源性脓毒血症肾细胞凋亡的影响

发布时间：2017-08-16 07:07

  本文关键词：硫化氢对尿源性脓毒血症肾细胞凋亡的影响

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【摘要】：目的 复制尿源性脓毒血症兔模型；应用NaHS（H2S供体）干预，明确外源性硫化氢对尿源性脓毒血症急性肾损害的作用，探讨H2S在尿源性脓毒血症中对肾细胞凋亡、NF-κB、Bcl-2、Bax表达的影响，进而揭示H2S对尿源性脓毒血症所致肾细胞凋亡的影响。 方法 1、采取结扎家兔左输尿管，并向结扎近端输尿管内注入大肠埃希菌（ATCC25922），以建立因急性上尿路梗阻、感染而引发的兔脓毒血症模型； 2、将48只健康的雄性家兔(体重：1.8-2.2Kg/只)随机分成4组，每组12只。对照组、假手术组、尿源性脓毒血症组（模型组）；硫氢化钠治疗组（治疗组）； 3、每组实验动物按时间点划分为5个时间观测点：术前，术后12h、术后24h、术后36h、术后48h。分别于每个时间点测实验兔的肛温(RT)、呼吸(RR)、心率(HR)； 4、分别于手术前，手术后各时间点采血，，用以行外周血常规(WBC、中性粒细胞)、肾功能(Cr、BUN）的测定； 5、于手术后48小时取各组家兔肾脏组织行HE染色，于光学显微镜下，观察肾脏形态及其结构的改变，Tunel法检测肾脏组织细胞凋亡；应用免疫组化测定各时间点、各组家兔组肾脏组织中的Bcl-2、Bax的蛋白表达；Western-Blot法检测各组家兔肾脏组织NF-ΚB的蛋白表达。 结果 1.各组家兔体温、呼吸频率、心率比较：假手术组与对照组比较无明显差异（P＞0.05）；模型组明显高于对照组、假手术组（P＜0.05），治疗组明显低于模型组（P＜0.05）。 2.血常规、肾功能化验结果表明：各组家兔术前血常规（白细胞、中性粒细胞）、肌酐（Cr）、尿素氮（Bun）比较，差异无统计学意义。术后血WBC、中性粒细胞；Cr、Bun结果：对照组与假手术组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；模型组明显高于对照组、假手术组（P＜0.05）；治疗组与模型组相比有下降趋势，有统计学意义（P＜0.05）。 3.病理形态： 微观形态学改变：镜下（HE染色）：模型组可见肾小球萎缩、变形，并可见大量炎性细胞浸润；治疗组较模型组上述变化有所减轻。 4.免疫组化法检测，肾脏组织Bcl-2、Bax的蛋白表达：对照组、假手术组肾脏组织可见Bcl-2、Bax蛋白微弱表达；Bax蛋白表达在模型组最强，而Bcl-2蛋白在模型组表达微弱；治疗组较模型组Bax蛋白表达明显减弱，而Bcl-2蛋白表达明显增强。 5.原位末端转移酶标记（Tunel）法,检测肾脏组织细胞凋亡：对照组、假手术组肾脏组织可见散在的少量的肾小管上皮细胞凋亡。模型组可见成片的细胞凋亡以及凋亡小体的形成，与对照组比较P0.05。治疗组较模型组肾脏组织细胞凋亡显著减轻（P0.05）。 6. Western-Blot法检测NF-ΚB的蛋白表达：对照组与模型组比较： NF-ΚB蛋白表达无明显差异；对照组与模型组比较：模型组NF-ΚB蛋白表达显著高于对照组，于术后48小时差异显著，（P0.05）有统计学意义；治疗组与模型组比较：模型组NF-ΚB蛋白表达显著高于治疗组，术后48小时差异显著（P0.05）有统计学意义。 结论 硫化氢可抑制NF-κB及Bax表达，上调Bcl-2表达，减少肾脏细胞凋亡，减轻肾损害。
【关键词】：硫化氢 尿源性脓毒血症 细胞凋亡 肾细胞 家兔
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R459.7
【目录】：

• 英文缩写注解4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-19
• 结果19-34
• 讨论34-38
• 结论38-39
• 参考文献39-43
• 综述43-49
• 参考文献47-49
• 硕士期间发表的文章49
• 参加过的学术会议49-50
• 致谢50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：681943