EPO对急性创面TGF-β1和Smad3蛋白表达的影响

发布时间：2017-09-28 17:16

  本文关键词：EPO对急性创面TGF-β1和Smad3蛋白表达的影响

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【摘要】：目的:探讨外用不同浓度EPO对大鼠急性创面愈合的影响,以及对愈合过程中创面组织TGFβ1及Smad3蛋白表达的影响,并进一步探讨EPO与TGFβ1及Smad3蛋白的表达关系,明确EPO促进创面愈合的机制,最终为临床选择合理浓度EPO外用药物治疗急性创面提供理论依据。方法:(1)SD雄性大鼠72只,随机分为四组:低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组,每组18只;(2)急性创面模型建立:四组大鼠分别麻醉后称重,然后在SD大鼠背部制作直径2.5cm急性创面模型;(3)给药:对各组大鼠每天创面用无菌生理盐水进行清理后,分别给予低、中、高剂量组三组创面对应纱布湿敷50U/m L、100 U/m L、150U/m L三种浓度重组人促红细胞生成素,对照组创面采用生理盐水湿敷,每次使用1m L液体湿敷,每日换药湿敷1次,最长给药于伤后14 d停止给药;(4)记录:每日拍照,游标卡尺测量创面直径,纪录创面大小,计算创面愈合率;(5)4组大鼠分别在制模后3d、7d、14d,每个时间点每组随机取6只大鼠,处死后,在创面与正常组织交界处取组织,留取部分组织作HE染色及免疫组化,部分作免疫蛋白印迹使用;(6)数据分析:实验结果采用平均值±标准差(`x±s)表示,各组间均数比较采用t检验处理,以P0.05为差异具有显著性。结果:1.治疗7d后,促红细胞生成素注射液低、中和高剂量组大鼠创面愈合率较模型对照组相比均增加,有统计学意义(P0.05)。而中浓度组和高浓度组与对照组相比显著增加,统计学意义明显(P0.001),各组之间比较发现,高浓度组和中浓度组与低浓度组相比有统计学意义(P0.05)。高浓度和中浓度组之间相比无统计学意义(P0.05)。2.显微镜下观察,治疗组肉芽组织生长活跃,主要表现为成纤维细胞和血管内皮细胞增生,新生血管增多,同等治疗时间内依次为高剂量组最强,中剂量组其次,低剂量组最弱;同等治疗时间内的模型组与治疗组相比,新生肉芽组织的活跃程度相对较弱。3.转化生长因子(TGFβ1)在高剂量和中剂量EPO治疗组高表达,与对照组相比有明显统计学意义(P0.05)。其中应用到第7天时所取组织中TGFβ1表达明显升高,与对照组相比统计学意义显著(P0.01)而低剂量EPO治疗组转化生长因子在皮肤中表达与对照组无相比无统计学意义(P0.05)。4.Western blot方法进行Smad3蛋白检测结果显示:应用中、高剂量EPO处理3天时所取大鼠组织中Smad3蛋白的表达较对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。而其余组在各时段所取组织与对照组组织中Smad3蛋白的表达无明显差异。结论:1、EPO能够明显促进创面的愈合,其效果与EPO浓度有关,应用100U/ml的EPO即可以达到最佳效果。2、EPO能够促进创面纤维细胞和血管内皮细胞增生,并随着浓度的增加作用逐渐增强3、EPO能够促进转化生长因子(TGFβ1)的表达。创面愈合早期最为明显。4、EPO在创面愈合的早期能够促进Smad3蛋白的表达。5、EPO促进创面愈合的机制与TGFβ1-Smad3信号通路有关。
【关键词】：急性创面 EPO TGF-β1 Smad3蛋白
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R641
【目录】：

• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 研究材料与方法13-20
• 结果20-24
• 讨论24-27
• 结论27-28
• 参考文献28-31
• 综述31-45
• 参考文献38-45
• 附图45-51
• 作者简介及读研期间主要科研成果51-52
• 致谢52-53

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本文编号：937075