新型溶栓剂—抗血小板整合素GPⅢa49-66融合抗体（SLK）在大鼠急性心肌缺血再灌注损伤中的作用研究

发布时间：2017-09-28 20:44

  本文关键词：新型溶栓剂—抗血小板整合素GPⅢa49-66融合抗体（SLK）在大鼠急性心肌缺血再灌注损伤中的作用研究

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【摘要】：急性心肌梗塞是一类严重危害人类健康的心血管系统疾病,其主要的发生机制是冠状动脉粥样硬化斑块损伤或破裂后诱发血小板粘附、活化及聚集,形成的冠脉血栓堵塞血管,从而导致心肌梗死或心源性猝死。目前,临床常用的抗血小板药物(如阿斯匹林、氯吡格雷、血小板膜糖蛋白II b/IIIa受体拮抗剂等)都是通过抑制正常血小板的黏附、激活和聚集功能来抑制血小板栓块的形成,仅起预防作用,无法清除已形成的血小板栓块。此外,上述抗血小板药物在用量不当或服用时间过长等情况下易诱发高危性脑出血。 新型溶栓剂——血小板膜GPⅢa49-66配基SLK(scFv-All-Linker-Kringle-1),可通过其羧基端Kringle-1环与血小板栓块表面部分降解的纤维蛋白末端赖氨酸(lysine)残基结合,从而使溶血小板单链抗体scFv-All直接富集于血小板栓块表面,溶解已形成的血栓栓块,开通堵塞的血管,恢复脏器血流灌注。我们前期研究证实SLK可用于小鼠急性缺血性脑卒中的治疗,减轻脑梗塞的损伤面积。本课题中,我们利用大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型,研究SLK对冠状动脉血栓形成性疾病等其它动脉血管阻塞性疾病的治疗作用。 研究表明,新型溶栓剂SLK可有效溶解冠状动脉血管内的血栓团块,减轻心肌损伤程度(心肌TTC染色),提供明显的心肌保护作用(心肌LDH测定)。不同剂量SLK(Ⅰ-18.75.Ⅱ-37.5.Ⅲ-75μg/鼠)对大鼠急性心肌梗死的保护作用呈剂量依赖关系,其中37.5μg/鼠为最适注射剂量[心肌LDH释放,A假手术组(sham,n=14)vs生理盐水治疗组(vehicle,n=7)55.5±22.8vs153.1±13.8U/L;#P0.05]；SLK剂量依赖性减轻了LDH的释放,[SLK-Ⅰ(n=6),129.7±35.7U/L; SLK-Ⅱ(n=7),92.1±17.3U/L;SLK-Ⅲ(n=6),89.2±13.1U/L*P0.05];[平均心梗面积MI,sham(n=14)vs vehicle(n=7),0.22±0.11vs0.49±0.14;#P0.05； SLK-Ⅰ (n=6)vs vehicle(n=7),0.39±0.09vs0.49±0.14,P=0.11；SLK-Ⅱ(n=7)vs vehicle (n=7),0.36±0.07vs0.49±0.14；SLK-Ⅲ(n=6)vs vehicle(n=7),0.37±0.04vs0.49±0.14,*P0.05].SLK对大鼠急性心肌梗塞的治疗具有时效性,在心肌损伤后2h内注射为最适治疗时间窗,4h及8h注射SLK无明显的心肌保护作用[LDH释放,SLK-2h(n=4)vs vehicle-2h(n=6),110.6±24.3vs172.7±31.3,*P0.001； SLK-4h(n=9)vs vehicle-4h(n=5),164.6±17.9vs177.6±25.8,P=0.29；SLK-8h (n=9)vs vehicle-8h(n=8),177±22.4vs175.3±23.1,P=0.88];[平均心梗面积MI,SLK-2h(n=14)vs vehicle-2h(n=6),0.37±0.15vs0.51±0.1,*P=0.048;SLK-4h(n=9)vs vehiicle-4h(n=5),0.45±0.08vs0.53±0.17,P=0.25；SLK-8h(n=9)vs vehicle-8h(n=8),0.56±0.12vs0.51±0.13,P=0.4].SLK与尿激酶(UK)联合应用时具有显著的协同效应,效果优于UK单独治疗[LDH释放,SLK+UK=6)vs UK(n=6),60.8±12.1vs86.6±25.8,*P=0.049];[平均心梗面积MI,SLK+UK(n=6) vs UK(n=6),0.28±0.03vs0.36±0.15,*P=0.047]。行为学观察表明不同剂量的SLK(Ⅰ-18.75、Ⅱ-37.5、Ⅲ-75μg/鼠)注射不会对动物产生明显的副作用；结果显示不同剂量的SLK注射不会引发动物脏器出血。因此,SLK可以作为一种潜在的溶血栓药物用于动脉血栓性疾病的治疗。
【关键词】：血小板 整合素 氧化破碎 血栓形成 心肌梗死 融合抗体
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R542.22
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-12
• 第一章 抗血小板药物治疗研究进展（综述）12-17
• 1.1 摘要12-13
• 1.2 针对血小板粘附的药物13-15
• 1.2.1 抑制GPlb/lx/v复合物药物13-14
• 1.2.2 抑制VWF的药物14
• 1.2.3 抑制GPVI受体相关的药物14-15
• 1.3 针对血小板激活的药物15-16
• 1.3.1 抑制血栓素A2(TXA2)的药物15
• 1.3.2 抑制腺苷二磷酸(ADP)的药物15
• 1.3.3 抑制5-羟色胺(5-HT)的药物15
• 1.3.4 抑制凝血酶的药物15-16
• 1.4 针对血小板聚集的药物16
• 1.5 展望16-17
• 第二章 SLK在大鼠急性心肌缺血再灌注损伤中的作用研究17-32
• 2.1 前言17-18
• 2.2 实验材料18
• 2.3 大鼠急性缺血再灌注模型的建立18-20
• 2.4 SLK的表达20
• 2.5 SLK治疗大鼠心肌缺血再灌注损伤的最佳剂量确定20-23
• 2.6 SLK治疗大鼠心肌缺血再灌注损伤的最佳时间窗确定23-25
• 2.7 SLK治疗大鼠心肌缺血再灌注损伤疗效的验证25-28
• 2.7.1 氯化硝基四氮唑兰(NBT)染色25-27
• 2.7.2 苏木精—伊红(HE)染色27-28
• 2.8 SLK与尿激酶(UK)协同效应28-30
• 2.9 SLK的安全性30
• 2.10 讨论30-32
• 攻读学位期间发表的文章及首页32-36
• 致谢36-37
• 参考文献37-44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 张青山,邹江,赵丹,陆宝萍;新型抗血小板药氯吡格雷研究进展[J];化工进展;2003年07期

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本文编号：937976