贝伐单抗联合紫杉醇对黏液表皮样癌细胞及腺样囊性癌细胞体外增殖和凋亡的影响研究

发布时间：2020-04-21 06:20

【摘要】：目的：观察贝伐单抗联合紫杉醇对涎腺腺样囊性癌ACC、涎腺黏液表皮样癌MEC体外增殖和凋亡的影响,探讨贝伐单抗联合紫杉醇抑瘤作用机制,为临床治疗涎腺恶性肿瘤提供理论依据。材料与方法：1.通过细胞培养技术,在实验室环境中,用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测涎腺腺样囊性癌ACC、黏液表皮样癌细胞MEC及其正常舌成纤维细胞TF(对照组)中的VEGF表达量；2.采用四甲基偶氮噢蓝(MTT)法检测不同浓度紫杉醇组(60μg/L、120μg/L,250μg/L)、不同浓度贝伐单抗组(2.5mg/L、7.5mg/L、10mg/L、15mg/L)及紫杉醇联合贝伐单抗组对涎腺腺样囊性癌ACC、涎腺黏液表皮样癌MEC、正常舌成纤维细胞TF(对照组)的生长抑制作用；3.用ELISA技术检测紫杉醇分别对ACC、MEC作用48小时后VEGF表达量；4.通过流式细胞技术(FCM)定量研究其凋亡诱导作用,评价紫杉醇及其贝伐单抗对MEC、ACC的作用。研究结果：1.通过ELISA技术检测ACC和MEC中VEGF表达量与TF(对照组)中的VEGF表达量显著增高,ACC(640.33±43.53pg/ml)、MEC (411.50±45.87pg/ml)、TF (318.59±36.54pg/ml)结果具有统计学意义(P0.05)。2.MTT法检测紫杉醇对ACC和MEC细胞抑制作用呈剂量依赖性；ACC细胞抑制率为6.10%、10.08%、15.43%、17.44%；MEC细胞抑制率为23.01%、20.09%、28.11%、26.03%；TF细胞抑制率为6.29%、5.07%、1.52%、0.19%。贝伐单抗对ACC和MEC细胞抑制作用呈剂量依赖性；ACC细胞抑制率为7.99%、30.15%、30.53%、37.13%；MEC细胞抑制率为4.96%、7.69%、19.49%、19.23%；TF细胞抑制率为1.01%、1.54%、7.65%、15.27%。紫杉醇联合贝伐单抗组对ACC和MEC细胞抑制作用呈现出协同作用,联合组对ACC细胞抑制率为57.26%、联合组对MEC细胞抑制率为45.32%。单药组与TF(对照组)相比单药组对ACC和MEC细胞的抑制率有所增高,联合用药组较单药组明显增高,结果具有统计学意义(P0.05)。3.紫杉醇分别对ACC、MEC作用48小时后VEGF表达量与不加紫杉醇ACC、MEC进行对照,其加药后的细胞中VEGF表达量均下降,ACC(50.31±4.56pg/ml)、 MEC(31.95±3.37pg/ml),结果具有统计学意义(P0.05)。4.流式细胞术检测结果显示：TF加药后有凋亡,但是凋亡不多,ACC细胞凋亡增加22.44%,MEC细胞凋亡增加11.37%,显示加入抗VEGF抗体和紫杉醇后,对AC、MEC癌细胞有抑制作用,而TF细胞对药物不敏感,结果具有统计学意义(P0.05)。结论：1涎腺黏液表皮样癌细胞、涎腺腺样囊性癌细胞可以通过自分泌方式分泌VEGF,表达量明显高于正常舌成纤维细胞。2贝伐单抗或紫杉均能抑制涎腺黏液表皮样癌细胞、涎腺腺样囊性癌细胞增殖和诱导凋亡,二者联合作用后能明显提高抑制率。3紫杉醇能下调涎腺黏液表皮样癌细胞、涎腺腺样囊性癌细胞中VEFG表达量；贝伐单抗与紫杉醇联合运用能起到明显的抗肿瘤协同作用。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.8

【参考文献】