槲皮素对牙龈卟啉单胞菌激活的巨噬细胞极化调控的初步探讨

发布时间：2020-05-03 20:30

【摘要】：实验目的:种植体周围炎是一种类似于牙周炎的口腔慢性炎症性疾病,在疾病的发展过程中伴有巨噬细胞的极化。巨噬细胞是机体重要的防御细胞,在不同的刺激因素的作用下,巨噬细胞会呈现出两种具有不同表型和生理功能的分化状态。M1型巨噬细胞可释放IL-1、TNF-α、i NOS等炎性细胞因子,这些细胞因子赋予M1巨噬细胞强烈的细胞毒性及组织损伤性,在杀灭病原微生物的同时,也会造成结缔组织的降解和骨组织的破坏吸收;M2型巨噬细胞则可释放IL-10、Arg-1等抗炎细胞因子,可促进机体损伤组织的修复重建。槲皮素属于黄酮醇类化合物,具有抗炎作用。本实验的目的在于初步探究槲皮素是否对巨噬细胞的极化具有调控作用,能否通过抑制巨噬细胞的M1型极化,进而减少炎性细胞因子的产生和释放,为实现抑制种植体周围炎的发展提供理论基础。实验方法:1.Real-time PCR法检测牙龈卟啉单胞菌内毒素刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞24h时后,i NOS及Arg-1m RNA的相对表达水平。2.槲皮素预处理RAW264.7小鼠巨噬细胞2h后,Real-time PCR法检测i NOS及Arg-1m RNA的相对表达,ELISA法检测TNF-α及IL-10的表达。3.实验结果均采用Graph Pad Prism软件,单因素方差分析法分析。实验结果:1.牙龈卟啉单胞菌内毒素刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞24h后,i NOS的m RNA表达显著增加,而Arg-1的m RNA表达微量增加,无统计学差异。2.槲皮素预处理RAW264.7小鼠巨噬细胞2h后,i NOS的m RNA及TNF-α的表达均显著降低,而Arg-1的m RNA及IL-10的表达水平均没有显著性变化。结论:实验证实了槲皮素通过抑制P.g LPS激活的RAW264.7向M1极化,减少了炎性细胞因子的释放。
【图文】：

的P.g LPS刺激24h后，其细胞活性明显下降。而1ug/ml的P.g LPS是引起细胞活性显著降低的浓度的千分之一，所以我们实验选择1ug/ml作为P.g LPS对RAW264.7细胞系的最适浓度（图3.1）。图 3.1 不同浓度的 P.g LPS 对 RAW264.7 巨噬细胞在 24h 时的细胞活性影响(**P<0.01VS 对照组)RT-PCR检测结果显示，P.g LPS刺激RAW264.7细胞24h后，iNOS基因的表达水平较对照组明显升高；而Arginase-1基因的表达水平较对照组仅有微量升高（图3.2）。

图 3.2 P.g 刺激 RAW264.7 巨噬细胞后 iNOS、Arginase-1 的 mRNA 表达(***P<0.001 VS 对照组)3.2 在槲皮素预处理 RAW264.7 巨噬细胞后，P.g LPS 激活的RAW264.7 巨噬细胞 iNOS、TNF-α、Arg-1 及 IL-10 的表达CCK-8实验结果显示，槲皮素在75uM时细胞活性明显下降，而50uM是槲皮素对RAW264.7细胞没有细胞毒性的最大浓度（图3.3），，所以，我们实验采用50uM作为槲皮素对RAW264.7巨噬细胞系的最适浓度。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R783.6

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 巢汝;黄靓;屈顺林;张弛;;巨噬细胞能量代谢与动脉粥样硬化[J];生命的化学;2018年03期

2 崔凡;穰真;王有为;杨戈;;AIDS患者巨噬细胞对白念珠菌的吞噬和灭活功能研究[J];中国麻风皮肤病杂志;2017年04期

3 孟董超;王东;宋娟;卢彦珍;;巨噬细胞极化在冠状动脉粥样硬化发生发展中的作用研究进展[J];长治医学院学报;2017年02期

4 李雪岩;杨玉玉;陈君;;中药抗巨噬细胞泡沫化的研究进展[J];药学与临床研究;2017年05期

5 袁锋;尚茹茹;张锦;温婷;李爱萍;刘晓红;;巨噬细胞极化与动脉粥样硬化[J];中华临床医师杂志(电子版);2015年22期

6 高双英;吴静;杨贵丽;;结肠癌肿瘤相关巨噬细胞的浸润和MMP-2的表达、血管生成关系的研究[J];中国免疫学杂志;2016年03期

7 龚立博;索艳荣;王学岭;郭茂娟;;基于巨噬细胞亚型分化探讨中医药防治动脉粥样硬化的研究进展囿[J];中国中医基础医学杂志;2016年05期

8 侯亮;路英进;丁彦春;;养心氏对巨噬细胞极化及活化的调节[J];中西医结合心脑血管病杂志;2016年15期

9 赵清杰;朱琳楠;丁文军;赵勇;;巨噬细胞极化与细胞代谢的相互调控[J];细胞与分子免疫学杂志;2015年03期

10 田媛;刘起会;朱迅;闫东梅;;巨噬细胞极化信号通路及其调控机制研究进展[J];现代免疫学;2015年05期

相关会议论文 前10条

1 姚芳苡;黄自坤;傅颖媛;;人巨噬细胞极化相关长链非编码RNA表达谱筛选及研究[A];第十二届全国免疫学学术大会摘要汇编[C];2017年

2 李枋;霏李杰;;扶正解毒方对共培养体系下肿瘤相关巨噬细胞表型变化影响的实验研究[A];第一届青年中西医结合肿瘤学术论坛论文集[C];2015年

3 白力;张文兰;窦晶莉;王永福;;组蛋白修饰与巨噬细胞极化的关系[A];第十届全国免疫学学术大会汇编[C];2015年

4 史玉玲;王又明;丰美福;;巨噬细胞激活作用的研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年

5 李小鹏;张伦理;;巨噬细胞极化现象与结核病的关系[A];中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会论文汇编[C];2014年

6 陈罗泉;万晓朋;韩泉;王青青;;白细胞介素27在巨噬细胞抗病毒天然免疫应答中的作用研究[A];浙江省免疫学会第十次学术大会论文集[C];2016年

7 马晓媛;田李星;靳贺;梁华平;;创伤/烧伤后单核—巨噬细胞变化及调节措施研究进展[A];2015第十一届全国中西医结合灾害医学大会、江苏省中西医结合学会第二届灾害医学学术会议、中华卫生应急电子杂志第二届编委会会议暨2015江苏国际医疗器械科技博览会学术论文集[C];2015年

8 马翠卿;胡光磊;尹晓琳;胡洁;杨建岭;王秀荣;魏林;;A族链球菌诱导巨噬细胞坏死而非凋亡[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年

9 李奇;王海杰;;透明质酸对于淋巴结巨噬细胞运动的影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

10 许乐;孟立;祝宇;;肾癌组织中巨噬细胞极化状态的临床意义研究[A];中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集[C];2016年

相关重要报纸文章 前10条

1 主持人 王建新;巨噬细胞的多面人生[N];医药经济报;2015年

2 通讯员 李静 记者 胡德荣;恶性肿瘤巨噬细胞未必皆“恶人”[N];健康报;2014年

3 张化;新技术有望延长血小板保存期[N];中国医药报;2003年

4 张化;半乳糖可延长血小板保存期[N];中国医药报;2003年

5 兰克;以尝试用巨噬细胞治瘫痪[N];科技日报;2000年

6 记者 房琳琳;“别吃我”! 癌细胞还有第二种方式对巨噬细胞这样说[N];科技日报;2017年

7 本报记者 张晔 通讯员 蔡心轶 张翰文;肥胖伤肝？原来是巨噬细胞在作怪[N];科技日报;2016年

8 唐颖 倪兵 陈代杰;巨噬细胞泡沫化抑制剂研究快步进行[N];中国医药报;2006年

9 侯嘉 何新乡;硒的神奇功能[N];中国食品质量报;2003年

10 记者 陶婷婷　通讯员 李静;“助纣为虐”细胞竟会“弃恶从善”[N];上海科技报;2014年

相关博士学位论文 前10条

1 范婷婷;TIPE2调控调节性T细胞胸腺外迁及M2巨噬细胞极化的分子机制研究[D];中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院);2018年

2 安冬;巨噬细胞源性泡沫细胞形成与巨噬细胞迁移信号通路的调控机制[D];吉林大学;2018年

3 张晓雨;胞外腺苷二磷酸（ADP）及其受体在类风湿性关节炎中的调控功能和机制研究[D];华东师范大学;2018年

4 初凤娜;巨噬细胞亚型在实验性自身免疫性脑脊髓炎发病中的作用及其机制研究[D];吉林大学;2018年

5 秦居亮;P2X7介导的巨噬细胞调控在肿瘤微环境中的功能和机制研究[D];华东师范大学;2018年

6 王建华;复方肠泰诱导结肠癌细胞自噬促进肿瘤相关巨噬细胞极化的机制研究[D];南京医科大学;2018年

7 赵陶然;炭疽水肿毒素抑制巨噬细胞功能的分子机制研究[D];军事科学院;2018年

8 郑冠琳;巨噬细胞在irisin抗动脉粥样硬化中的作用及相关机制研究[D];山东大学;2018年

9 关晓峰;细胞-晶体反应中外泌体的miRNAs表达谱分析及其调控巨噬细胞极化的初步研究[D];广西医科大学;2018年

10 张峰;巨噬细胞中的IKKα在急性肾损伤向慢性肾脏病转化过程中的作用[D];南京医科大学;2018年

相关硕士学位论文 前10条

1 郝瑾;探究JNK通路在IL-4诱导的巨噬细胞极化中的作用[D];重庆医科大学;2018年

2 吴玲;皮质酮对LPS诱导鼠巨噬细胞NLRP3表达的抑制作用及机制研究[D];重庆医科大学;2018年

3 李依蔓;位于内置网上的蛋白Herpud1调节IL-4诱导的巨噬细胞极化和迁移[D];重庆医科大学;2018年

4 余骏川;体外共培养模型中巨噬细胞对HAP诱导HK-2细胞炎性相关因子表达的调控作用研究[D];广西医科大学;2017年

5 高弘斐;外周血间充质干细胞对巨噬细胞和Th17/Treg细胞平衡的体外调节研究[D];遵义医学院;2018年

6 刘英光;GPR120受体在巨噬细胞功能调节中的作用[D];遵义医学院;2018年

7 刘芊伊;猫爪草醇类提取物对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的影响[D];遵义医学院;2018年

8 王泽帆;Integrins和FNs蛋白在巨噬细胞迁移中的作用[D];陕西师范大学;2018年

9 孟慧杰;结核特异性多肽E7诱导巨噬细胞极化的信号通路的探讨[D];广州医科大学;2018年

10 金争;TRIM59表达的信号转导通路及其对巨噬细胞生物学活性调控的研究[D];吉林大学;2018年

本文编号：2648082