人乳牙根生理性吸收区肿瘤坏死因子受体相关因子-6表达的研究

发布时间：2020-05-20 09:30

【摘要】： 目的：乳恒牙替换是体内严格调控的生理过程,破牙细胞是参与乳牙根生理性吸收的主要的功能细胞。肿瘤坏死因子受体相关因子-6(tumor necrosis factor receptor-associate factor 6,TRAF6)是破牙／骨细胞分化激活信号转导通路中重要的胞内接头蛋白。本实验就是研究TRAF6在恒牙和乳牙根生理性吸收区的表达,在乳牙根吸收不同时期时在破牙细胞中表达量的变化规律,尝试探讨TRAF6在乳牙根吸收中的作用。 方法：1.恒牙和处于生理性吸收期的乳牙经常温脱钙、包埋、切片,分别用TRAF6抗体和TRAF6原位杂交试剂检测实验牙中TRAF6蛋白和mRNA的表达,Im-pro-plas 6.0分析系统测量两组实验牙中破牙细胞、成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞染色的光密度,SPSS13.0统计学分析软件分析其不同表达的规律； 2.把生理性吸收期的乳牙按牙根吸收长度不同分为早、中、晚期三组,分别用TRAP抗体、TRAF6抗体和TRAF6原位杂交试剂检测实验牙破牙细胞中TRAP、TRAF6蛋白和TRAF6mRNA的表达,Im-pro-plas 6.0分析系统测量三组染色的光密度,SPSS 13.0统计学分析软件分析早、中、晚期其表达变化的规律。 结果：1.乳牙根吸收组破牙细胞、成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞TRAF6蛋白及mRNA染色阳性,恒牙组未观察到破牙细胞存在,成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞染色均为阴性。两组同名细胞相比较, t检验得出P0.01。而实验组中破牙细胞染色光密度大于成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞,P0.01,有统计学意义；成牙本质细胞和牙髓成纤维细胞间比较无差异。 2.乳牙根吸收时破牙细胞中,采用单因素方差分析,TRAP染色早、中、晚期均有差异,P0.05,中期光密度最高；TRAF6蛋白及mRNA染色早、中期较高,两者之间无显著性差异,但与晚期比较,P0.05,有统计学意义；三种染色光密度值变化与破牙细胞活性呈正相关关系,值变化曲线基本一致。 结论：1.吸收期乳牙根方吸收陷窝内破牙细胞TRAF6免疫组织化学染色和原位杂交染色均为强阳性棕黄染色,提示TRAF6可能参与该细胞的分化和功能活性,引起牙乳牙根吸收的进行。 2.破牙细胞TRAP免疫组织化学染色在乳牙根吸收中期光密度值最大,早期次之,晚期最弱。提示TRAP在乳牙根吸收中期功能最强,破骨细胞最为活跃,晚期最弱。 3.破牙细胞TRAF6免疫组织化学染色和原位杂交染色,在乳牙根吸收早、中期光密度值高于晚期,而在早、中期差异不大。提示TRAF6在乳牙根吸收早、中期功能最强,破骨细胞最为活跃,晚期较弱。 4.破牙细胞TRAP、TRAF6免疫组织化学和mRNA原位杂交染色在各期变化基本是一致的,与破牙细胞活性呈正相关。
【图文】：

核的破牙细胞，形态不规则，细胞圆形或卵圆形。吸收早、中期组破牙细胞数量多，根面吸收陷窝较深，髓腔内成牙本质细胞层也可见活跃的破牙细胞，胞浆多数染色较深(见图3一1、2);晚期吸收组破牙细胞量少，胞浆多数染色浅(见图3一3)，牙髓组织肉芽性变，髓腔内以炎细胞浸润为主，成牙本质细胞层消失。三、TRAF6免疫组化染色结果同实验一中实验组。四、TRAF6mRNA原位杂交结果同实验二中实验组五、图象分析和统计学分析结果(见表5)1.各实验组破骨细胞图象分析和统计学分析的结果表5各实验组破骨细胞图象分析方差检验结果(I士s)实验一组实验二组实验三组TRAP免疫组化染色55.11士 4.3161.62士 8.2243.56士3.80TRAF6免疫组化染色62.99士 7.2760.12士 8.3157.81士2.78TRAF6mRNA原位杂交染色49.74士 4.4849.02士 7.5245，，61士6.68TRAF6免疫组化染色，TRAF6mRNA原位杂交染色中实验一组、实验二组与实验三组之间比较均为P<0.05，而实验一、二组之间P>0.05.TRAP免疫组化染色中实验二组最高，与实验一组、实验二组之间均P<0.05
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R78

【参考文献】

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本文编号：2672415