硝苯地平在年轻成年大鼠前腭缝扩大时，对NF-kB信号通路与成骨的影响

发布时间：2020-06-03 00:30

【摘要】：上颌骨快速扩弓常用于解决牙列拥挤、牙弓狭窄、前牙反合等问题。在快速扩弓过程中,骨缝在扩弓力的作用下,牵张成骨过程激活,新骨开始在腭中缝沉积。但快速扩弓过程中仍有很多问题出现,比如扩弓后最普遍的并发症--复发。有学者发现,由于在快速扩弓过程中,扩开的腭中缝无法在扩弓期和保持期内,形成充足的新骨,是导致复发的重要原因之一。因此,在上颌快速扩弓过程中,促进骨缝新骨的形成和沉积,是减轻快速扩弓复发的重要措施。目前有多种方法促进骨缝新骨的形成,这些方法包括低能量激光、转化生长因子、二磷酸盐、维生素等。有学者报道硝苯地平可抑制NF-kB的表达,而NF-kB能抑制成骨细胞形成;还有学者报道前腭缝与腭中缝牵张成骨机制类似。本实验通过大鼠腹腔注射硝苯地平剂量为50mg/kg,每天一次,观察大鼠前腭缝成骨情况。目的:建立大鼠前腭缝快速扩弓模型,观察前腭缝中,是否存在NF-kB信号通路,以及成骨细胞的增殖情况与成骨因子OCN、BMP-2的表达情况;硝苯地平在大鼠前腭缝扩大过程中,对NF-kB信号通路的影响,以及对成骨细胞的增殖情况与成骨因子OCN、BMP-2的表达情况。方法:8周龄SPF级雄性大鼠45只,随机分成3组,A组为阴性对照组(Control group,CM)15只,不扩弓,不用药;B组为实验组15只,单纯扩弓;C组大鼠15只,在扩弓的同时还腹腔注射硝苯地平50mg/kg。实验扩弓天数为1、4、7天,扩弓簧采用0.016英寸奥丝弯制带圈开大曲,力值为2.00±0.20N,水合氯醛局麻下,将扩弓簧安装在上颌门牙之间,光固化树脂固定。扩弓组跟用药组,均于扩弓后的第1、4、7天处死,取上颌标本,立刻10%福尔马林溶液固定,拍Micro-CT,测量前腭缝宽度。标本脱钙6周,通过HE、免疫组化、免疫荧光染色,观察NF-kB与各项成骨因子表达情况。结果:1.实验初期,所有参与实验大鼠体重均在280±10g范围内,A组大鼠,体重随时间均匀增加,B、C组大鼠在扩弓后的前两天体重下降较明显,第三天后,体重开始逐渐增加。2.大鼠RME后,前腭缝宽度和组织的形态变化:大鼠上颌前缝线在拉伸力作用下逐渐变宽,在1、4、7天,宽度随扩弓时间递增;Micro-CT在第4天检测到新骨,呈指状突起,几乎与牵张力的方向平行。HE染色,可见前腭缝扩开后,随着扩弓天数的增加,胶原纤维形成也在,同时伴随明显的新生血管生成;Masson染色后,可见前腭缝扩开后,有明显的胶原纤维生成,还可见新生软骨以及软骨细胞。3.各成骨指标表达情况:免疫组化染色显示,与空白对照组相比,实验组的扩弓组与扩弓+硝苯地平组,OCN、BMP-2的表达明显增多。结论:本研究通过建立大鼠上颌扩弓模型,检测IL-1β、P65、OCN的表达情况,并比较硝苯地平悬浊液对大鼠上颌前腭缝扩弓后骨改建的影响,可以得出以下结论:1.较大的扩弓力值(2.00±0.20N)能有效打开年轻成年SD大鼠上颌前腭缝。2.在扩弓过程中,有IL-1β表达,随着扩弓时间的增加;有NF-kB信号通路的激活,随着扩弓时间的增加,P65表达增多。3.在扩弓过程中,机械力能刺激OCN的表达,并随着时间增加,OCN表达增多。4.在扩弓过程中,硝苯地平可以通过抑制NF-kB的信号通路的激活,可能有促进骨细胞增殖、OCN表达增多的作用。
【图文】：

模型图,模型

SD大鼠前腭缝扩弓模型

三维图像,上颌骨,横截面,三维图像

aMicro-CT上颌骨横截面前腭缝变化
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R782

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