辛伐他汀对牙周炎大鼠牙移动保持阶段OPG、bFGF表达影响的实验研究

发布时间：2020-06-12 04:29

【摘要】：错牙合畸形属于三大口腔疾病之一,可影响口腔颌面组织的正常发育,妨碍牙齿及牙周组织的健康,甚至危害全身健康及造成心理负担。近年来,随着我国经济发展和社会的不断进步,公众对形象美日趋重视,要求矫正牙颌畸形从而改善自身形象、提高生活质量的成年患者迅速增加。成年人牙周炎的患病率很高,牙周炎患者由于牙齿支持组织病变,牙周膜面积减少,牙槽骨破坏大于修复,在正畸主动治疗后牙周组织的恢复与适应需要更长的时间,且更易复发。抑制矫正后复发,缩短保持时间,促进牙齿尽早稳定在新的位置对正畸患者尤其是成人牙周炎患者具有重要临床意义。成人牙周炎患者常规的正畸术后调牙合和使用Hawley氏保持器并不足以有效的维持矫正效果,舌侧固定保持、超强纤维牙周夹板或义齿修复等是避免复发维持稳定的重要辅助措施,临床研究表明正畸术后结合牙周手术的方法可以降低错牙合畸形复发的程度,如牙槽嵴顶纤维环切术、前牙区龈乳头劈开术等,实验证明邻牙间的越隔纤维和嵴上龈纤维组织受力时张力增大,在保持阶段有牵拉移动牙返回到原位的作用,行改良嵴上纤维切断术能有效破坏邻牙间的纤维张力,从而在早期阶段阻止移动牙的复发。但牙周手术具有一定的风险性,患者一般很难接受。另外,药物应用也是近年来正畸保持研究的新方向。他汀类药物(statins)是羟甲基戊二酰辅酶A(HMG—CoA)还原酶抑制剂,其中辛伐他汀是胆固醇合成的限速酶,能阻断甲羟戊酸通路,长期应用不良反应小耐受性好。近年来体外试验和动物实验表明,辛伐他汀具有刺激骨形成、增强成骨细胞活性和加速骨改建等作用,是一类应用前景广泛的促骨形成药物。骨保护素(osteoprotrgerin,OPG)又称破骨细胞分化抑制因子,由401个氨基酸残基组成,是一种肝素结合分泌型糖蛋白,由成骨细胞合成,可抑制破骨细胞生成,诱导成熟破骨细胞凋亡。体外及动物实验结果表明,OPG是牙周炎牙槽骨吸收的重要调节因子,几乎所有成骨细胞、牙周膜细胞和成牙骨质细胞均可表达OPG,以自分泌或旁分泌的方式调节牙骨质和牙槽骨代谢,抑制破骨前体细胞分化和破骨细胞成熟。碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是一种肝素结合型蛋白,广泛分布于脑、肝、心、神经、眼、垂体、肾上腺、骨和胎盘组织。bFGF通过细胞表面的受体对来源于中胚层和神经外胚层的细胞发挥促进新生血管生成、细胞分裂增殖和迁移等作用。研究表明bFGF具有促进肢体再生和软骨、骨组织、神经组织以及软组织损伤修复的功能,并能显著增强牙周再生,促进牙周膜细胞的增殖,增加局部新血管形成,还可以调节细胞外基质的合成增强牙周膜成纤维细胞活性。我们课题组已经通过动物实验证实了在正常成年大鼠正畸牙移动保持阶段,全身给予辛伐他汀后可以促进牙周组织骨形成,加速骨改建,并抑制实验性牙移动的复发程度。在此基础我们通过动物实验,观察全身给予辛伐他汀对牙周炎大鼠正畸牙移动后保持期内OPG和bFGF表达的变化,研究辛伐他汀对实验性牙周炎大鼠正畸牙移动后牙齿稳定性的影响,为应用成骨类药物促进牙周炎患者正畸后保持阶段牙齿稳定、缩短保持时间提供实验依据。实验方法: 选用4周龄SPF级健康雄性Wistar大鼠65只,随机分成13个小组:空白对照组:1个小组,5只大鼠。实验对照组和用药组各包括6个小组,每组5只大鼠。建立牙周炎模型,以大鼠上颌前牙作为支抗,使用约50g力分别牵引上颌左、右侧第一磨牙向近中移动,持续21天后去除加力装置,左侧上颌牙弓安装保持装置,分别保持1、3、7、14、21、28天;实验对照组和用药组分别于保持开始前一天腹腔注射生理盐水和辛伐他汀溶液,直至处死。截取上颌骨磨牙区骨段,制作近远中向病理切片,采用HE染色和免疫组化染色观察上颌第一磨牙牙周组织变化及其中OPG和bFGF表达的变化。实验结果: HE染色切片可见,用药组的牙周组织骨形成快于实验对照组,在未保持侧,移动牙的近远中侧均出现了活跃的破骨活动14天后成骨现象明显;保持侧移动牙的远中牙周组织以成骨活动为主,21天后变化不明显,并逐渐进入牙周组织缓慢修复期。通过免疫组化染色图像分析,时间因素与药物因素对大鼠上颌第一磨牙牙周组织中OPG表达量的影响具有统计学意义(P0.05)。在近中侧,用药组与实验对照组OPG表达量在保持阶段早期无明显变化,在第14天开始明显增加;在未保持侧远中,用药组与实验对照组OPG表达量在保持第3天开始逐渐增加,14天后逐渐减少,21天后无明显变化,在保持侧远中,用药组与实验对照组OPG表达量在整个保持阶段表现为逐渐增加的趋势。相同时间段组比较,用药组OPG表达量明显高于实验对照组。时间因素与药物因素对大鼠上颌第一磨牙牙周组织中bFGF表达量的影响均具有统计学意义(P0.05)。在近中侧,用药组与实验对照组bFGF的表达量在保持阶段早期无明显变化,到第14天后逐渐增强。在未保持侧远中,用药组和实验对照组bFGF表达量均在保持初期略有增加,约在第7天开始减少,之后又逐渐增高。在保持侧远中,实验对照组与用药组的bFGF表达量在整个保持阶段表现为逐渐增加的趋势。相同时间段比较,用药组bFGF表达量均强于实验对照组。实验结论:实验性牙周炎大鼠正畸牙移动后保持阶段全身给予辛伐他汀能够增加牙周组织中OPG和bFGF的表达量,从而促进牙周组织中新血管生成与成熟,加速新骨形成和骨质矿化,这可能是辛伐他汀促进牙周炎大鼠正畸牙移动后保持期牙周组织改建的作用机制之一。
【图文】：

龈缘,炎性细胞,成骨细胞

附录免疫组化染色照片图5.1 龈缘处可见炎性细胞组织图5.2 空白对照组,PBS 代替一抗, 未见明显阳性染色(10 ×40)图 5.3 OPG 阴性对照组未保持侧 3 天远中侧：OPG 阳性表达，，PM 排列松弛, 远中侧可见到新骨形成、少量成骨细胞。图 5.4 OPG 阴性对照组未保持侧 7 天远中侧：OPG 阳性表达，固有牙槽骨不连续，可见较多破骨细胞。图5.5 OPG阴性对照组未保持侧14天远中侧：OPG 阳性表达，PM 排列略有规则，可见较多的成骨细胞。图5.6 OPG阴性对照组未保持侧28天近中侧：以成骨表现为主，骨吸收陷窝处有新骨形成和成骨细胞埋入。

成骨细胞,固有牙槽骨,龈缘,骨吸收陷窝

免疫组化染色照片图5.1 龈缘处可见炎性细胞组织图5.2 空白对照组,PBS 代替一抗, 未见明显阳性染色(10 ×40)图 5.3 OPG 阴性对照组未保持侧 3 天远中侧：OPG 阳性表达，PM 排列松弛, 远中侧可见到新骨形成、少量成骨细胞。图 5.4 OPG 阴性对照组未保持侧 7 天远中侧：OPG 阳性表达，固有牙槽骨不连续，可见较多破骨细胞。图5.5 OPG阴性对照组未保持侧14天远中侧：OPG 阳性表达，PM 排列略有规则，可见较多的成骨细胞。图5.6 OPG阴性对照组未保持侧28天近中侧：以成骨表现为主，骨吸收陷窝处有新骨形成和成骨细胞埋入。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R783.5

【参考文献】