不同浓度阿仑膦酸钠对成牙骨质细胞增殖、分化及矿化影响的实验研究

发布时间：2020-09-30 19:56

　　目的：本研究初步探讨不同浓度ALN对成牙骨质细胞增殖、分化及矿化能力的影响，为进一步研究ALN对牙根吸收后修复的影响提供实验依据。方法：本实验分为7个组，加入浓度为1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8)、1×10~(-9)、1×10~(-10)、1×10~(-11)(mol/L)ALN的细胞为实验组，而未加入药物的细胞为对照组；将不同浓度ALN作用于成牙骨质细胞株OCCM-30，应用四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测细胞增殖以及生长曲线变化，酶联免疫吸附试验（Elisa）定量检测细胞内碱性磷酸酶活性，茜素红染色法定量测定矿化结节含量；实验数据应用SPSS Statistics V17.0进行统计处理与分析。结果： 1、MTT法检测结果显示：各组细胞均在48h后进入对数生长期，ALN作用后第三天测得浓度为10~(-8)mol/L、10~(-9)mol/L和10~(-10)mol/L的ALN作用下的OCCM-30吸光度值比对照组增加；第四天浓度为10~(-7)mol/L、10~(-8)mol/L和10~(-9)mol/L的ALN作用下的OCCM-30吸光度值比对照组增加，而在10~(-6)mol/L的ALN作用下，吸光度值比对照组降低；第五天浓度为10~(-6)mol/L的ALN作用下的OCCM-30，吸光度值比对照组降低。以上差异具有统计学意义（P0.05）。 2、Elisa检测结果显示：不同浓度ALN作用于OCCM-30细胞后，ALP活力呈现高浓度和低浓度促进，中间浓度抑制的趋势，但是差异并不显著，与对照组相比，差异无统计学意义（P0.05)。 3、茜素红染色测定结果显示：与对照组相比，不同浓度ALN作用于OCCM-30形成矿化结节呈现高浓度抑制，中间浓度促进的规律。其中浓度为1×10~(-6)mol/L的ALN抑制而1×10~(-9)mol/L的ALN促进矿化结节的生成，差异具有统计学意义（P0.01）. 结论： 1、不同浓度ALN作用下的成牙骨质细胞具有相同的生长趋势，均在48h后进入对数生长期。ALN对成牙骨质细胞增殖的影响具有双相性。浓度为1X10~(-9)mol/L时对成牙骨质细胞增殖的促进作用最强，而ALN浓度为1X10~(-6)mol/L时则抑制成牙骨质细胞的增殖。 2．成牙骨质细胞具有ALP活性，但不同浓度的ALN对成牙骨质细作用48h后均未对其ALP活性产生明显影响。 3、浓度为1×10~(-9)mol/L的ALN能够促进成牙骨质细胞矿化结节的生成，而1×10~(-6)mol/L的ALN抑制矿化结节的生成。
【学位单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R78
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文缩略词表
第1章引言
    1.1 概述
    1.2 国内外研究现状
        1.2.1 成牙骨质细胞的生物学特性
        1.2.2 二膦酸盐（BPs）的结构及分类
        1.2.3 二膦酸盐（BPs）调节成骨细胞的机理研究
        1.2.4 二膦酸盐（BPs）影响牙根吸收的相关研究
第2章材料与方法
    2.1 主要试剂及仪器
        2.1.1 试剂及材料
        2.1.2 仪器及设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 成牙骨质细胞株 OCCM-30 的培养
        2.2.2 OCCM-30 的传代培养
        2.2.3 药物配制
        2.2.4 实验分组
        2.2.5 观察不同浓度 ALN 作用下 OCCM-30 的生长
        2.2.6 不同浓度 ALN 作用下 OCCM-30 内 ALP 活性检测
        2.2.7 不同浓度 ALN 作用下 OCCM-30 形成矿化结节含量测定
    2.3 统计分析
第3章结果
    3.1 不同浓度 ALN 作用下 OCCM-30 的生长曲线
    3.2 不同浓度 ALN 作用于 OCCM-30 细胞 48h 后 ALP 活力改变
    3.3 茜素红染色法测定不同浓度 ALN 作用下 OCCM-30 形成矿化结节含量
第4章讨论
    4.1 成牙骨质细胞的选择
    4.2 ALN 的应用及剂量的选择
    4.3 ALN 对 OCCM-30 增殖能力的影响
    4.4 ALN 对 OCCM-30 分化能力的影响
    4.5 ALN 对 OCCM-30 矿化结节形成的影响
第5章结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献

【引证文献】